Rahim içi Telemetri Fare Kontraktil Basıncını Ölçmek<em> İn Vivo</em
Summary
This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.
Abstract
Moleküler ve elektrik sinyallerinin karmaşık bir entegrasyon gebeliğin sonunda bir kasılma organı içine sakin rahim dönüştürmek için gereklidir. Uterin kontraktilitenin anahtar regülatörleri bulunmuş olmasına rağmen, bu işlem hala tam olarak anlaşılmamıştır. Transgenik farelerin doğumu incelemek için ideal bir model sunmaktadır. Daha önce, fare uterus kasılmalarını incelemek için tek yöntem çeşitli nedenlerden dolayı optimal ex vivo izometrik gerilim kayıtları, oldu. rahim fizyolojik ortamından çıkarılması gerekir, soruşturmanın sınırlı bir zaman ders mümkündür, ve fareler kurban gerekir. radyometrik telemetri son gelişme farelerde in vivo uterus içi basınç uzunlamasına, gerçek zamanlı ölçümleri için izin vermektedir. Teslimat açıklanan kadar burada, intrauterin telemeter implantasyonu orta gebelik fare rahim basınç değişiklikleri ölçmek için. Basında karşılaştırarak farklılıklar tarafındanyabani tipteki ve transjenik fareleri arasındaki ures, ilgi konusu genin bir fizyolojik etki açıklanacaktır edilebilir. Bu teknik erken doğum gibi hamilelik sırasında miyometrial bozuklukların tedavisinde kullanılan tedavilerin gelişimini hızlandırmak gerekir.
Introduction
Erken doğum, perinatal morbidite ve gelişmiş ülkelerde mortalitenin önde gelen nedenidir; perinatal morbidite% 50 ve perinatal mortalite 1,2% 75 sorumludur. Erken doğum yönlü ve idiyopatik olabilir. Çok araştırma kasılma bir bir sakin dokudan myometrium dönüştüren moleküler ve elektrik yollar üzerinde ortaya çıkmıştır rağmen, erken doğum kesin patofizyolojisi zor kalır. Endokrin, inflamatuar ve gen regülasyonu tüm erken doğum 3,4 bağlantılı olmuştur. Ancak, etik kaygılar insanlarda erken doğum mekanizmaları araştırma yeteneğini sınırlayabilir.
Bu sınırlamalar göz önüne alındığında, birçok araştırmacı doğum fizyolojisini incelemek için bir model sistem olarak farelere döndü. Fareler kısa gebelikler yaklaşık üç hafta süren ve kolayca genetik manipüle edilebilir var. Ayrıca, çoklu genetik fare modelleri varemek 5 için gerekli olan sinyal yolları belirlemek için geliştirilmiştir. Fare ve insan doğum arasındaki temel farklılıklara rağmen, fareler ve insanlar intrauterin inflamasyon ve enfeksiyon 6 olmak üzere emek için gerekli olan aynı mekanizmaların, birçok paylaşıyoruz. Böylece, fareler rahim aktivitesini incelemek için paha biçilmez bir araç olarak hizmet vermektedir. Bugüne kadar, altın standart farelerde rahim kasılmasını ölçmek için ex vivo izometrik gerilim kayıtları olmuştur; Bununla birlikte, bu deney için bir gebelik zaman noktası ile sınırlıdır ve fizyolojik ortamından rahim çıkarılması gerekir. Bir diğer önemli faktör için bu araştırmalar için gerekli hayvan büyük bir sayıdır. Son olarak, bu yöntem emek ve erken patofizyoloji indüksiyon inceleyen uzunlamasına çalışmalar için izin vermez.
Arter basıncı incelemek için kullanılan radyometrik telemetri cihazları yapılan son gelişmeler farelerde ve int 7 değiştirirsıçanlarda 8 rauterine basınç aynı teknoloji gebelik sırasında farelerde intrauterin basınç değişiklikleri incelemek için kullanılan olabilir olup olmadığı sorusunu yalvardı. İlk sorun giderme sonra, bir yöntemi başarıyla fare işgücü uyarma ve ilerlemesini ölçmek için geliştirilmiştir. Bu in vivo yaklaşımı güçlü çalışma kasılmaları gösterge yüksek basınç durumuna hareketsiz rahim düşük basınçlı durumdan geçiş ölçebilir. Bu yöntem aynı zamanda gen ifadesinin 9 fizyolojik etkisini gösteren, tehlikeye doğum ve vahşi tip fareler ile transgenik fareler arasında önemli basınç farkları tespit etmek mümkün olmuştur. Bu protokol, hamilelik sırasında fare uterus basıncı çalışma in vivo metodunda, bir gerçek zaman sağlar.
Protocol
Representative Results
Discussion
Myometrial kontraktilitenin araştırmaları kas gerginliği ex vivo ölçümleri yararlanmıştır. Bu yöntem, canlı hayvan için uygulanabilir değildir, yeni geliştirilen uterotonik ilaçların erken evre test edilmesi için yararlı olabilir. Uzunlamasına emek ilerlemesini anlamak Bununla birlikte, in vivo yaklaşımlar gereklidir. in vivo ölçümler çeşitli amaçlara hizmet. Birincisi, gebelik süresi boyunca rahimde kasılma desen değişikliklerin tam bir resim yakalama etkinleş…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive–stored in Drierite |
| Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
| Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
| Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
| Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
| Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
| Sterile Surgical Gloves–Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
| PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
| Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
| Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
| Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
| Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |
References
- Slattery, M. M., Morrison, J. J. Preterm delivery. Lancet. 360, 1489-1497 (2002).
- Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. Epidemiology and causes of preterm birth. Lancet. 371, 75-84 (2008).
- Keelan, J. A. Pharmacological inhibition of inflammatory pathways for the prevention of preterm birth. Journal Of Reproductive Immunology. 88, 176-184 (2011).
- Voltolini, C., et al. Understanding spontaneous preterm birth: from underlying mechanisms to predictive and preventive interventions. Reproductive Sciences. 20, 1274-1292 (2013).
- Ratajczak, C. K., Muglia, L. J. Insights into parturition biology from genetically altered mice. Pediatric research. 64, 581-589 (2008).
- Rajakumar, A., et al. Placental HIF-1 alpha, HIF-2 alpha, membrane and soluble VEGF receptor-1 proteins are not increased in normotensive pregnancies complicated by late-onset intrauterine growth restriction. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 293, (2007).
- Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D’Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American journal of physiology. Heart And Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).
- Mackay, L. B., Shi, L. B., Maul, H. .., Maner, W. L., Garfield, R. E. The effect of bilateral pelvic neurectomy on cervical ripening in pregnant rats. Journal Of Perinatal Medicine. 37, 263-269 (2009).
- Pierce, S. L., Kutschke, W., Cabeza, R., England, S. K. In vivo measurement of intrauterine pressure by telemetry: a new approach for studying parturition in mouse models. Physiol Genomics. 42, 310-316 (2010).
- Imamura, T., Luedke, C. E., Vogt, S. K., Muglia, L. J. Oxytocin modulates the onset of murine parturition by competing ovarian and uterine effects. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 279, R1061-R1067 (2000).
- McCloskey, C., et al. The inwardly rectifying K+ channel KIR7.1 controls uterine excitability throughout pregnancy. EMBO Mol Med. 6 (9), 1161-1174 (2014).
