Sıçanlarda Ortotopik HCC Lokorejyonel Tedavisi için oncolytic virüs transarteryel İdaresi
Summary
Oncolytic virotherapies are under development as novel therapeutics for the treatment of hepatocellular carcinoma (HCC). Here we describe a method for locoregional therapy of HCC via hepatic arterial administration of oncolytic virus.
Abstract
Hepatocellular carcinoma (HCC) is a disease with limited treatment options and poor prognosis. In recent years, oncolytic virotherapies have proven themselves to be potentially powerful tools to fight malignancy. Due to the unique dual blood supply in the liver, it is possible to apply therapies locally to orthotopic liver tumors, which are predominantly fed by arterial blood flow. We have previously demonstrated that hepatic arterial delivery of oncolytic viruses results in safe and efficient transduction efficiency of multifocal HCC lesions, resulting in significant prolongation of survival in immune competent rats. This procedure closely mimics the application of transarterial embolization in patients, which is the standard palliative care provided to many HCC patients. The ability to administer tumor therapies through the hepatic artery in rats allows for a highly sophisticated preclinical model for evaluating novel viral vectors under development. Here we describe the detailed protocol for microdissection of the hepatic artery for infusion of oncolytic virus vectors to treat orthotopic HCC.
Introduction
Hepatosellüler karsinom (HCC) dünya çapında beşinci en yaygın kanser ve önemli bir sağlık sorunu 1,2 yapma kansere bağlı ölümlerin üçüncü lider nedenidir. Transarteryal embolizasyon (TAE) ya da transarteryal kemoembolizasyon (TACE) içeren tümör rezeksiyonu veya bu bekleyen karaciğer nakli, lokal tedavi için uygun olmayan hastalar için standart palyatif bakım 3,4 olarak uygulanır. Çevreleyen karaciğer portal ven 5,6 onun kan kaynağının çoğunluğunu alırken bu tedaviler, tümörler hepatik arter kan akışının neredeyse sadece beslenen sayede karaciğerde ikili kan kaynağının benzersiz bir özellik istifade eder.
HCC için mevcut tedavilerin son derece sınırlı etkinliklerinin nedeniyle, onkolitik virüs umut verici bir alternatif terapötik maddeler olarak ortaya çıkmıştır. JX-594, son zamanlarda PEXa-VEC adını, bir timidin kinaz silinmiş aşı vektörü, granülosit-m ile silahlı olduğunuHCC 7 Faz II klinik deneme tamamladı acrophage koloni uyarıcı faktör (GM-CSF). Daha yakın bir zamanda, insan interferon-beta ifade eden bir yeniden birleştirici veziküler stomatit virüs vektörü (VSV), sorafenib dirençli HCC (NCT01628640) bir safha I klinik deneme girmiştir. onkolitik virüsler yakın hastalarda HCC için klinik uygulama için onay alma taşımak gibi, etkili bir uygulama yolu için ihtiyaç multifokal hastalık açıktır hedef. Sistemik teslim verimsiz tümör iletimi için büyük ölçüde etkisiz olmakla birlikte, tümör içi uygulamalar hastalığın ilerlemesine karşı duyarlı uninjectable mikroskobik lezyonlar bırakarak, enjekte edilen tümör tedavisinin etkinliğini sınırlayabilir.
Biz ortotopik HCC hedeflemek için lokoregional şekilde onkolitik virüs tedavisi yönetmek için sıçanlarda hepatik arter izole bir yöntem kurduk. Biz göstermiştir ki güvenli ve verimli olarak bu yönetim rota sonuçlarıBağışıklık yetkili sıçanlarda 8-10 anlamlı sağkalım uzaması sonucu, multifokal HCC nodüllerin transdüksiyonunu ettik. Burada, biz, erişme diseksiyon ve sıçanlarda hepatik artere enjekte yöntemi tarif etmektedir. Prosedürün bir şema, Şekil 1 'de gösterilmiştir (daha önce 9 yayınlanmıştır)
Protocol
Representative Results
Discussion
Although direct intratumoral injection is undoubtedly the simplest method to result in efficient tumor transduction of a single tumor nodule, hepatic arterial infusion represents an ideal administration route to target multifocal, orthotopic HCC. This method has proven to be both safe and effective for treating HCC in immune competent rats with oncolytic viruses. Furthermore, since HCC patients are routinely treated by transarterial application of chemoembolization, the method described here is readily translatable to …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work is supported by the SFB 824 subprojects C6 and C7 (DFG Sonderforschungsbereich 824), German Research Foundation, Bonn, Germany.
Materials
| Veterinary clippers | Aesculap | GT415 | Small, cordless trimmer ideal for removing fur from surgical area |
| Stereomicroscope | Zeiss | Stemi SV6 | |
| 30G Needles | Braun | 4656300 | 30G x ½” |
| 1ml syringes | Braun | 9161406V | Tuberculin syringe |
| Disposable scalpel | Feather | 2975#15 | #15 blade |
| Standard surgical scissors | Fine Science Tools | 14001-13 | Sharp/blunt, for opening skin and muscle |
| Adson forcep | Fine Science Tools | 1101-12 | With teeth, for grasping skin and muscle |
| Alm retractor | Fine Science Tools | 17008-07 | With blunt teeth, for spreading abdominal cavity open during surgery |
| Gauze swabs | Lohmann & Rauscher | 18504 | 7.5 x 7.5 cm, should be autoclaved prior to use |
| Cotton-tipped applicator swabs | Lohmann & Rauscher | 11970 | Sterile |
| Fine-tipped foreceps | Fine Science Tools | 11063-07 | 0.4mm, angled tip, for dissecting hepatic artery |
| Vannas spring scissors | Fine Science Tools | 91500-09 | For delicate cutting |
| Micro-needle holder | Fine Science Tools | 12076-12 | For ligating gastroduodenal artery |
| Needle holder | Fine Science Tools | 12005-15 | Tungsten carbide jaws |
| 7-0 Prolene sutures | Ethicon | 8648H | Polypropylene suture with curved needle, for ligating gastroduodenal artery |
| 4-0 Vicryl sutures | Ethicon | V3040H | With curved needle attached |
| Infrared warming lamp | Beurer | IL11 | For maintaining body temperature post-operatively |
References
- Murray, C. J., Lopez, A. D. Evidence-based health policy – lessons from the Global Burden of Disease Study. Science. 274, 740-743 (1996).
- Parkin, D. M., Bray, F., Ferlay, J., Pisani, P. Estimating the world cancer burden: Globocan 2000. Int J Cancer. 94, 153-156 (2001).
- Bruix, J., Sala, M., Llovet, J. M. Chemoembolization for hepatocellular carcinoma. Gastroenterology. 127, 179-188 (2004).
- Miraglia, R., Pietrosi, G., Maruzzelli, L., Petridis, I., Caruso, S., Marrone, G., Mamone, G., Vizzini, G., Luca, A., Gridelli, B. Efficacy of transcatheter embolization/chemoembolization (TAE/TACE) for the treatment of single hepatocellular carcinoma. World J Gastroenterol. 13, 2952-2955 (2007).
- Breedis, C., Young, G. The blood supply of neoplasms in the liver. Am J Pathol. 30, 969-977 (1954).
- Nakashima, T., Kojiro, M. Pathologic characteristics of hepatocellular carcinoma. Semin Liver Dis. 6, 259-266 (1986).
- Heo, J., et al. Randomized dose-finding clinical trial of oncolytic immunotherapeutic vaccinia JX-594 in liver cancer. Nat Med. 19, 329-336 (2013).
- Altomonte, J., Marozin, S., Schmid, R. M., Ebert, O. Engineered newcastle disease virus as an improved oncolytic agent against hepatocellular carcinoma. Mol Ther. 18, 275-284 (2010).
- Shinozaki, K., Ebert, O., Kournioti, C., Tai, Y. S., Woo, S. L. Oncolysis of multifocal hepatocellular carcinoma in the rat liver by hepatic artery infusion of vesicular stomatitis virus. Mol Ther. 9, 368-376 (2004).
- Shinozaki, K., Ebert, O., Woo, S. L. Eradication of advanced hepatocellular carcinoma in rats via repeated hepatic arterial infusions of recombinant VSV. Hepatology. 41, 196-203 (2005).
- Altomonte, J., et al. Synergistic antitumor effects of transarterial viroembolization for multifocal hepatocellular carcinoma in rats. Hepatology. 48, 1864-1873 (2008).
