حيوي داخلي المجهري والجلطة التعريفي في شحمة الأذن ماوس بلا شعر

Summary

نموذج الأذن للأصلع الماوس SKH1-HR ^ساعة تمكن المجهر مضان حيوي داخلي من دوران الأوعية الدقيقة والضوئي السمي تحريض الجلطة دون إعداد مسبق الجراحية في السرير الاوعية الدموية الدقيقة فحصها. ولذلك، فإن أذن الفأر أصلع هو ممتاز في نموذج الجسم الحي لدراسة التفاعلات المعقدة خلال تشكيل خثرة الاوعية الدموية الدقيقة، وتطور الجلطة، والجلطات.

Abstract

مضاعفات الجلطات من أمراض الأوعية الدموية هي السبب واحد رئيسي للمراضة والوفيات في الدول الصناعية. بسبب التفاعلات المعقدة بين مكونات الدم الخلوية وغير الخلوية خلال تشكيل خثرة، دراسات موثوقة من علم وظائف الأعضاء والفيزيولوجيا المرضية لتجلط الدم لا يمكن إلا أن يؤديها في الجسم الحي. لذلك، تقدم هذه المقالة نموذج الأذن لدى الفئران أصلع وتركز على التحليل في الجسم الحي من دوران الأوعية الدقيقة، وتشكيل خثرة، وتطور الجلطة. باستخدام المجهر مضان حيوي داخلي والوريد (د) تطبيق الأصباغ الفلورية منها، تحليل المتكرر للدوران الأوعية الدقيقة في الأذن يمكن بسهولة أن يؤديها، دون الحاجة إلى إعداد الجراحية. وعلاوة على ذلك، وهذا النموذج يمكن تكييفها للدراسات في الجسم الحي من القضايا المختلفة، بما في ذلك التئام الجروح، وإصابة ضخه، أو الأوعية الدموية. وباختصار، فإن أذن الفئران أصلع هو النموذج المثالي للفي فيفدراسة س من دوران الأوعية الدقيقة الجلد في الظروف الفسيولوجية أو المرضية في جسم المريض ولتقييم رد فعلها على العلاجات الموضعية أو الجهازية مختلفة.

Introduction

والغرض من هذه المادة هو لوصف أسلوب intravital المجهري تطبيقها على صوان الماوس أصلع لالملاحظة المباشرة وتحليل دوران الأوعية الدقيقة، وتشكيل خثرة، وتطور الجلطة. مع معدل الإصابة من 1 في 1000، تخثر وريدي لا يزال سبب شائع للالاعتلال. على الرغم من أن التشخيص، واستراتيجيات الوقاية، والعلاج تم تطويرها في السنوات الأخيرة، وثلث من الخثار الوريدي يظهر كما الانسداد الرئوي ^1. تجلط الدم الشرياني يلعب دورا حاسما في أمراض القلب والشرايين، والتي هي السبب الأكثر شيوعا للوفاة في الدول الصناعية. وتشارك تجلط الدم الشرياني على أساس تمزق لويحات تصلب الشرايين في النوبات القلبية واحتشاء المساريقي، وسكتة. كل جراحة تكشف هياكل تحت البطانة لمكونات الدم، تغير ديناميات تدفق الدم، ويشل المريض. في جراحة endoprosthetic من الطرف السفلي، تي الجهازransplantation والجلطة جراحة رفرف هي أسباب كثرة حدوث مضاعفات. تخثر الاوعية الدموية الدقيقة على وجه الخصوص في كثير من الأحيان يسبب ضررا لا يمكن إصلاحه، وذلك بسبب عدم وجود أعراض سريرية. وبالمثل، تخثر الاوعية الدموية الدقيقة يلعب قاعدة مهمة في العديد من الأمراض، بما في ذلك فرفرية نقص الصفيحات الخثاري، وتعفن الدم، تخثر داخل الأوعية الدموية، متلازمة الفوسفولبيد، والقصور الوريدي المزمن وغيرها.

وقد وضعت العديد من الأدوية الجديدة لعلاج والوقاية من الجلطة في السنوات الأخيرة، ولكن الأدوية المضادة للصفيحات ومضادات التخثر لا يزال لديها آثار جانبية، مضادات نقص، وميزة آثار مدة طويلة. هذه العيوب تؤدي إلى مشاكل في مجال الرعاية الطبية الطارئة. وبالتالي، هناك حاجة إلى مزيد من الأبحاث لكشف العمليات المعقدة التي تحدث أثناء تخثر الدم، والتي بالكاد يمكن محاكاتها في المختبر.

تم اكتشاف أصلع SKH1-HR ^ساعة الماوس 1926 في حديقة للحيوانات في لندن.بسبب وجود خلل الجينات على الكروموسوم 14، يفقد الحيوان الفراء، بعد يوم بعد الولادة 10. وهذا يجعل من صوان-أوعية دموية جيدة للوصول إلى intravital المجهري للأوعية الدموية. متوسط ​​سمك الأذن هو 300 ميكرون. وهو يتألف من طبقتين من الأدمة، والتي تكون مفصولة الغضروف. على الجانب الظهري محدب من الغضروف، 3 الحزم الوعائية تدخل شحمة الأذن. أقواس الأوعية الدموية قمي ويحول القاعدية ربط الحزم الثلاث. والأوردة لها بأقطار تتراوح بين 200 ميكرون (القاعدية) و 10 ميكرون (القمي). الشعيرات الدموية إغلاق مزجها، تحيط الشعر فارغة بصيلات ^2. تشريح أصلع SKH1-HR ^ساعة الماوس يجعل من صوان نموذج قوي وفعال من حيث التكلفة للأبحاث تجلط الدم.

Protocol

أجريت جميع التجارب في الجسم الحي (7221.3-1-006 / 15) وفقا للتشريع الألماني على حماية الحيوانات ودليل المعاهد الوطنية للصحة للرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (معهد الثروة الحيوانية مختبر، المجلس الوطني للبحوث). 1. مسك العام للحيوا…

Representative Results

آثار القنب العلاج على تكون الخثرات على حقن 0.05 مل من FITC-ديكستران، خثرة الضوئي السمي تحريض يؤدي إلى آفة البطانية وتشكيل المكونات الصفائح الدموية الجداري (الشكلان 2 و 3). في هذه الد…

Discussion

هناك العديد من الخطوات الهامة لنجاح تحريض خثرة في شحمة الأذن من الفئران ^ساعة SKH1-HR. استكشاف الأخطاء وإصلاحها، يشار إلى الخطوات كل من بروتوكول بين قوسين.

شروط الفحص مثالية في الحيوانات الصغيرة في سن 4-6 أسابيع ومع التقرن المنخ?…

Materials

SKH-1/hr mice	Charles River	477	can be purchased from other vendors
standard laboratory food	ssniff Spezialdiaeten	V1594-0	can be purchased from other vendors
operation stereomicroscope	Leica	M651/M655	can be purchased from other vendors
intravital microscope	Zeiss	Axiotech Vario 100	can be purchased from other vendors
objective (20x/0.95)	Zeiss	20x/0,50 W; Plan-NEOFLUAR	can be purchased from other vendors
objective (63x/0.95)	Zeiss	63x/0,95 W; ACHROPLAN	can be purchased from other vendors
black and white CCD-camera	Pieper	FK 6990 IQ-S	can be purchased from other vendors
DVD-recorder	Panasonic	DMR-EX99V	can be purchased from other vendors
sodium chloride	Braun	5/12612055/1011	can be purchased from other vendors
Ketamine 10%	Bela pharm	F3901-6	can be purchased from other vendors
Xylazine 2%	Bayer	6293841.00.00	can be purchased from other vendors
FITC-dextran 5%	Sigma	46945-100MG-F	can be purchased from other vendors
dexapanthenol 5% eye ointment	Bayer	6029009.00.00	can be purchased from other vendors
formaldehyde 4%	Sigma	HT501128-4L	can be purchased from other vendors
DMSO	Sigma	472301	can be purchased from other vendors
coverslips 5 x 5 x 1 mm	Menzel	L4339	can be purchased from other vendors
plasters	Leukosilk	4683400	can be purchased from other vendors
centrifuge	Beckman Coulter	CLGS 15	can be purchased from other vendors
hematology analyzer	Sysmex	KX-21 A6980	can be purchased from other vendors
EDTA-blood tube	Sarstedt	201,341	can be purchased from other vendors
cotton swabs	Sanyo	604-A-1	can be purchased from other vendors
infrared light	Beurer	5/13855	can be purchased from other vendors
single use synringe	Braun	2020-08	can be purchased from other vendors
insulin syringe	Braun	9161502	can be purchased from other vendors
disposable hypodermic needles	Braun	465 7640	can be purchased from other vendors
end-to-end capillary	Sarstedt	19,447	can be purchased from other vendors
heating plate	Klaus Effenberg	OP-T 185/03	can be purchased from other vendors
scissors 14,5 cm	Aesculap	BC259R	can be purchased from other vendors
needle Holder	Aesculap	BM081R	can be purchased from other vendors
microforceps	Aesculap	BD331R	can be purchased from other vendors
microscissors	Aesculap	OC496R	can be purchased from other vendors
scalpel 21	Dahlhausen	11.000.00.511	can be purchased from other vendors
Prolene 7-0	Ethicon	XNEH7470	can be purchased from other vendors
Prolene 6-0	Ethicon	XN8706.P33	can be purchased from other vendors
electrocautery	Servoprax	H40140	can be purchased from other vendors
acrylglass pad			integrated heating, 0,5 cm high plane