Summary

초음파에 쥐 실험 생식 조사에

Published: December 02, 2017
doi:

Summary

이 원고는 여성 쥐 생식 및 부인과 조사에 대 한 실험 모델을 설계 하에 수행 하는 초음파의 유틸리티를 설명 합니다. Ultrasonographic 평가 수행 하는 방법에 대 한 단계별 설명을 표시 됩니다.

Abstract

보조 생식 기술 개발, 인 간에 대 한 연구의 윤리적 한계 쥐 동물 모델 생식 의학에서 널리 사용 되어 왔습니다. 과거에는, 설치류에 생식 개발의 연구 조직 삭제의 일회성 조직학 검사에 기반 되었습니다. 최근, 고해상도 transabdominal 초음파의 발달로, 높은-품질 초음파 이제 생식 시스템을 공부 하는 새로운 방법을 수 있도록, 쥐의 생식 기관 평가를 수행할 수 있습니다. 이미지는 고해상도 ultrasonographic 시스템을 사용 하 여 얻은 했다. 부인과 초음파 28 8 주 오래 된 비 임신 쥐와 5 임신 Sprague-Dawley 쥐에서 수행 되었다. 우리는 생식 기관을 인식 하는 방법을 설명 하 고 전형적인 보기는 발 정기의 여러 단계에서 관련된 구조 주기. 컬러 플로우 도플러는 자 궁 동맥 혈 류를 측정 하 고 임신의 다른 단계 동안 자 궁 혈액 흐름 패턴 변화를 평가 하는 데 사용 되었다. 우리는 초음파 탐사 내부 생식 기관에 변화를 평가 하기 위한 유용한 방법 임을 증명 하고있다. 그것의 사용 의료 또는 수술 절차를 포함 하 여 추가 실험의 가능성을 제기 하 고 동물을 희생 하지 않고 내부 장기의 sonographic 변경 내용을 모니터링 하는 기능을 제공 합니다.

Introduction

쥐 동물 모델 생식 의학, 태아 난소 이식1,2등에서 널리 사용 되었습니다. 그러나, 과거에는, 설치류에 생식 개발의 연구 삭제 조직의 일회성 조직학 검사에 기반 하고있다 그리고 일상적인 생식 기관 변경의 종 적 연구 쥐3가능한 되지 않았습니다. 초음파 널리 이용 되는 인간의 보조 생식 기술에 30 년 동안, 하지만이 귀중 한 기술만 적용 된 쥐에 최근.

우리의 목표는 복제 및 산부인과 조사에 대 한 실험 모델을 디자인 하 고 있기 때문에 절차를 설명 Sprague-Dawley 쥐의 생식 기관 평가 위한 ultrasonographic 접근을 설정 했다 우리의 지식, 이 절차에 대 한 없음 현재 시각된 간행물을 확인 하 고 있습니다. 우리는 해부학과 고해상도 초음파를 사용 하 여 자 궁 동맥 혈액 흐름에 여성 쥐의 생식 시스템 및 현재 ultrasonographic 결과의 ultrasonographic 검사의 절차를 설명 합니다. 우리는 자궁내 막 두께, 난소의 형태와 자 궁 혈액 흐름에 중요 한 차이 평가 하기 위해 발 정기 주기의 여러 단계에서 endometrium, 난소 및 자 궁 동맥 혈 비 임신 동물에서의 특성을 모니터링 발 정기 주기, 여성에 게 유사한의 서로 다른 단계. 우리 70 MHz 주파수와 30 µ m. 의 해상도 수준 높은-품질 초음파 장비를 사용 우리의 다른 목표 임신 쥐의 자 궁 혈의 저항에 변화를 평가 했다. 이 기술은 동물을 희생 하지 않고 매일 변화 생식 기관에서의 연구에 대 한 수 있습니다.

쥐에 초음파를 이용 하 여에 몇 가지 기술적인 문제가 있다. 이러한 어려움을 포함: 쥐 endometrium 인간의 여성4보다 훨씬 얇은입니다. 쥐의 난소를 이미징에 어려움 두꺼운 피부와 가까운 완전 한 감쇄 초음파5의 결과, 쥐에 복 벽 근육에 기인 했다 및 자 궁 동맥은 훨씬 더 어려운 비 임신에서 찾을 수 쥐입니다. 절차, 많은 기술적인 문제를 해결 하는 우리 하 고 남아 있는 그 문제에 대 한 우리가 그들을 최소화 하는 방법을 보여줍니다.

Sonographic 변화 동물을 희생 하지 않고도 쥐의 생식 기관에서의 성공적인 모니터링 생식 의학의 미래 동물 모델 및 다른 수술 절차의 가능성을 열 것 이다.

Protocol

이 연구는 권장 사항 가이드 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 건강의 국가 학회 그리고에 도착에 따라에서 실시 됐다 (동물 연구: Vivo 실험에서 보고) 지침. 프로토콜 준수 지침 2010/63/EU 승인 번호 A13170404 (네오 1) 동물 실험에 대 한 라이센스를 받았다. 모든 실험 (RD 53/2013, EU 지침 63/2010) 동물의 윤리 치료에 대 한 국가 지침에 따라 유럽 연합 인증 실험실에서 수행 했다. 프로토콜은 무르시아의 대?…

Representative Results

아니 큰 차이가 antero 후부 자 궁 경적 직경 또는 두께 endometrium의 자 궁 경적 (표 1)의 두 측면을 확인 하 고 있었다. 그룹 2와 비교, 그룹 1에에서 평균 자궁내 막 두께 두꺼운, 하지만 더 중요 한 차이 (P > 0.05) (그림 3)의 두 그룹 사이 발견 했다. 그럼에도 불구 하 고, 우리 관련 endometrium 형태 (그림 2)에서 변경 된 발 정기 주기 근처 (8 중 28 쥐)?…

Discussion

프로시저 수정 및 쥐, 초음파를 사용 하 여 주기는 발 정기의 단계 모든 식별의 우리의 목표에도 불구 하 고 본이 연구에서는 데 필요한 문제 해결 우리는 어떤 중요 한 차이점을 찾을 수 없었습니다. 우리 가설 이러한 어려움 때문에 발 정기 주기 여성에서 주기 달리 쥐 몇 일 지속 될 수 있습니다. 우리는 어떤 차이 확인 하기 위해 정확 하 게 적절 한 시기에 모든 측정 한 했다입니다. 따라서, 우리…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 연구는 동물 실험 섹션의 무르시아 대학 및 산부인과 산부인과 부서 무르시아의 대학에 의해 지원 되었다. 우리 감사 모든 기술자를 무르시아의 대학, 동물 실험의 섹션 CEIB (센트로 실험 en Investigaciones Biomédicas)에서 작업 들이 프로젝트에 협력 해야 합니다.

Materials

Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
MX400 Transducter Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo Lab Software Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
HSD: Sprague Dawley SD Envigo, inc. Rat strain
Lubricating Gel General Supply
CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System Cibertec S.A  Anesthesia Machine
Ecogel 100 ultrasound gel Eco-Med Pharmaceuticals Inc.
Hair removal lotion (Nair)  General Supply
Isoflurane Esteve Veterinaria Inhalatory anesthesia
* Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package.

References

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Cite This Article
Wang, T., Oltra-Rodríguez, L., García-Carrillo, N., Nieto, A., Cao, Y., Sánchez-Ferrer, M. L. Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats. J. Vis. Exp. (130), e56038, doi:10.3791/56038 (2017).

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