腰部後根神経節のアクセスと豚注入の椎
Summary
Intraganglionic 注入の腰部後根神経節 (DRG) へのアクセスを提供する豚の椎の手法について述べる。注入の進行状況を監視するには、術中と術後後 21 日を確認します。このプロトコルは、DRG の注入を含む今後の臨床研究に使用可能性があります。
Abstract
後根神経節 (DRG) は、頭の下のすべての第一次感覚ニューロンが含まれている明確な解剖学的構造です。この事実は、慢性的な痛みの治療を目的とした治療薬の注入の DRG の魅力的なターゲットを作る。小動物モデルにおける各 DRG を囲む椎体骨の外科的切除が含まれるために、DRG の注入を促進する椎弓切除術を使用されています。大型動物種、すなわち、豚の腰部後根神経節の intraganglionic 注射用手法を示す.椎は、DRG 標準脳神経外科技術・機器・材料の使用への直接アクセスを許可するように実行されます。椎弓切除術を介してより広範な骨削除と比べると、後根神経節での十分なアクセスを達成しながら脊髄の解剖学を節約するために椎弓切開術を実施します。DRG 注入の術中の進行状況は、非毒性の染料を使用して監視されます。術後 21 日に安楽死、次の注入の成功は 4′, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) intraganglionic 分布の組織によって決定されます。プロトコルを示す生物学上不活性溶液を注入しています。このメソッドは、DRG のターゲット治療解決に応用の将来的に臨床研究で可能性があります。我々 の方法論は、大型動物種で intraganglionic 小動物パラダイムの訳しをテストを容易する必要があります。さらに、このプロトコルは、これらの豚の DRG 注入の前臨床試験を計画の重要なリソースとして役立つかもしれない。
Introduction
後根神経節 (DRG) は、脊柱に沿って位置する解剖学的離散、神経のコレクションです。各 DRG には、特定の部位からのエンコードおよび中枢神経系 (CNS)、末梢刺激を中継する第一次感覚ニューロンが含まれています。たとえば、変形性関節症の痛みが始まるジョイント約に位置する苦痛の受容器は侵害刺激を認めるとき。このプロセスは侵害受容と呼ばれます。侵害刺激の長期的な意識は、慢性的な痛み1に します。
慢性の苦痛は頻繁に臨床研究2学科 intraganglionic 注入3など DRG に鎮痛薬のターゲットを絞った配信するための便利なメソッドを開発する 1 つの目標があります。ただし、DRG アクセスしにくい椎間孔4のボニーの範囲内に存在するため。いくつかのグループは正常に齧歯動物5,6,7,8,9,10で脊椎外科を使用してこの障害を克服しています。
クリニックで椎弓切除術は一般的な脊椎操作は、椎弓板、それにより脊柱管11を治療の外科的除去を指します。DRG の直接アクセスを余裕に外科的技術の取り込みが齧歯動物5,12で成功している、しかし、翻訳があります関連する構造体のサイズを考慮した非現実的な違いと方法に影響薬物動態学や技術的可能性13,14。たとえば、1 つの研究は、T10 は 3.0、7.0、およびラット、ブタと人間、それぞれ15の 8.2 mm で横脊髄直径を決定しました。したがって、大型動物は良い神経構造のおおよその人間寸法をモデル化します。
豚、Raoreらは複数の脊髄内注射16頚髄へのアクセスにマルチレベル椎弓切除術を使用しました。プロシージャ名は忍容性の段階に私主導臨床試験と同等の治療成績が文書化された17をしました。これらの結果は、技術的な可能性と人間の安全性の予測因子として臨床大動物モデルの継続的な使用をお勧めします。
日には、詳細な方法について手術適応と大型動物種の DRG の注入のために存在しません。この橋渡しのギャップを絞り込むには、DRG 露出豚椎注入のためのプロトコルを報告します。標準脳神経外科技術・機器・材料を用い、現代の手術の実際を模倣するように工夫しました。腰部後根神経節の水溶液を用いた intraganglionic 注射、術後 21 日目後組織を介して配信の成功を確認します。
Protocol
Representative Results
Discussion
我々 は後根神経節を介して椎と健康的な大型動物種における intraganglionic 注入の手術手技の方法を説明しようとする具体的には、豚。齧歯類で、同様の方法は詳細な12をされており、DRG を8,10やウイルスベクター 6,7,9,12従来の薬?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
研究は (A.S.B.) にシュルツ財団が支援を行った。
Materials
| Large humane animal sling | Britz & Company | 002539 | Modified to include abdominal aperture |
| Adhesive patient return electrode – 9 inch | Medtronic | E7506 | – |
| Ranger blood & fluid warming system | 3M | 24500 | – |
| Lactated Ringer's fluid | Hospira | 0409-7953-09 | – |
| Force air warming device | 3M | 77500 | – |
| Duraprep solution with applicator, 26 ml (0.7% iodine povacrylex, 74% isopropyl alcohol | 3M | 8630 | – |
| Sterile disposable surgical towels | Medline | MDT2168286 | – |
| Ioban 2 incise drape | 3M | 6651EZSB | – |
| Disposable suction canister and tubing | Medline | DYND44703H | – |
| Button switch electrosurgical monopolar pencil | Medtronic | E2450H | – |
| Fine smooth straight bipolar electrosurgical forceps, 4 1/2 inch | Bovie | A826 | – |
| #15 blade | Miltex | 4-315 | – |
| #11 blade | Miltex | 4-311 | – |
| 4×4 surgical gauze | Dynarex | 3262 | – |
| Weitlaner self-retaining retractor, 8 inch | Miltex | 11-618 | – |
| Meyerding self-retaining retractor, 1×2 3/8 inch | Sklar | 42-2078 | – |
| Gelpi self-retaining retractor, 7 inch | Sklar | 60-6570 | – |
| Freer elevator, 5 mm | Medline | MDS4641518F | – |
| Bone wax | Ethicon | W31G | – |
| Spurling intervertebral disc rongeur, 3 mm | Sklar | 42-2852 | – |
| Spurling 45-degree, up-biting Kerrison rongeur, 2 mm | Medline | MDS4052802 | – |
| Leksell angled rongeur, 2 mm | Sklar | 40-4097 | – |
| Gelfoam, size 50 | Pfizer | AZL32301 | – |
| Cottonoid patty | Medtronic | 8004007 | – |
| Frazier suction tip, 6 Fr | Sklar | 50-2006 | – |
| Frazier suction tip, 10 Fr | Sklar | 50-2010 | – |
| Dandy blunt right angle nerve hook | Medline | MDS4005220 | – |
| Nylon suture, 6-0 | Ethicon | 697G | – |
| Castroviejo smooth micro needle holder | Medline | MDG2428614 | – |
| 22 gauge Quinke point spinal needle | Halyard Health | 18397 | – |
| 32 gauge CED needle with locking Luer hub | See comments | n/a | As in: Pleticha, J., Maus, T.P., Christner, J.A., Marsh, M.P., Lee, K.H., Hooten, W.M., Beutler, A.S. Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans. Technical note. J Neurosurg. 121(4), 851-8 (2014). |
| Polyethylene tubing, 5 feet | Scientific Commodities | BB31695-PE/05 | – |
| Monoject syringe, 3 ml | Kendall | SY15352 | – |
| NanoJet syringe pump | Chemyx | 10050 | – |
| DAPI | Sigma-Aldrich | D9542 | – |
| Fast Green FCF | Sigma-Aldrich | F7252 | – |
| Bulb irrigation syringe | Medline | DYND20125 | – |
| Fine-toothed Adson forceps | Medline | MDS1000212 | – |
| Vicryl suture, 0 | Ethicon | J603H | – |
| Vicryl suture, 2-0 | Ethicon | J317H | – |
| Needle counter | Medline | NC20FBRGS | – |
| Steri-strip skin closure, 1/2×4 inch | 3M | R1547 | – |
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