Summary
نقدم هنا، وضع بروتوكول لاختبار الفوعة النباتية مع مسببات الأمراض النباتية رمادية ماجنابورثي. هذا التقرير سوف تسهم في فحص السلالات من الفطريات المعزولة على نطاق واسع وتكون بمثابة نقطة انطلاق ممتازة لفهم آليات مقاومة النباتات أثناء التربية الجزيئية.
Abstract
نباتات تمتلك نظاما قويا للدفاع عن نفسها ضد التهديدات المحتملة من الفطريات المسببة للأمراض. للنباتات زراعياً هاما، بيد التدابير الحالية لمكافحة مثل هذه الكائنات الممرضة أثبتت متحفظة جداً و، وبالتالي، لا بما فيه الكفاية فعالة، وأنها يمكن أن يحتمل أن تشكل المخاطر البيئية. ولذلك، من الضروري جداً تحديد العوامل المضيفة-مقاومة للمساعدة في مراقبة الأمراض النباتية بطبيعة الحال من خلال تحديد الجبلة الجرثومية مقاومة والعزل وتوصيف جينات مقاومة والتربية الجزيئية من أصناف مقاومة. وفي هذا الصدد، هناك حاجة إلى إنشاء أسلوب تطعيم دقيقة وسريعة وعلى نطاق واسع تولد وتطوير جينات مقاومة النبات. الأرز مسببات الأمراض الفطرية رمادية ماجنابورثي أسباب أعراض المرض شديدة الانفجار، وتسفر عن خسائر. في الآونة الأخيرة، برز رمادية م. ككائن نموذج لدراسة آليات التفاعلات مسببات الأمراض النباتية الفطرية. ومن ثم فنحن تقرير تطوير أسلوب اختبار الفوعة النباتية التي محددة رمادية م. يوفر هذا الأسلوب لتلقيح رذاذ مع تعليق كونديل وجرح التطعيم مع مكعبات الميسليوم أو قطرات من تعليق كونديل. الخطوة الرئيسية من طريقة التطعيم مما أدى إلى جرح يترك الأرز فصل جعل الجروح على أوراق النبات، الذي يتجنب أي التداخل الناجم عن مقاومة الاختراق المضيف. هذا الرش/إصابة البروتوكول يساهم فحص سريعة ودقيقة وواسعة النطاق السلالات المعزولة رمادية م . وهذا متكاملة وأسلوب الإصابة النبات المنتظمة سيكون بمثابة نقطة انطلاق ممتازة للحصول على منظور واسع من القضايا في أمراض النبات.
Introduction
انفجار الأرز، نجم عن رمادية م.، واحد من أخطر الأمراض لأصناف الأرز في العالم1،2. تتضمن عملية الذي يصيب رمادية م. النباتات المضيفة إنتاج كونيديا ومرفق السطحية، إنبات كونيديا وتشكيل أبريسوريوم، وتشكيل من اختراق الوتد والتمايز هيفا المعدية، وانتشار مرض 3-جميع هذه المراحل شائعة في العديد من سائر النباتات الفطريات المسببة للأمراض، وفي الواقع، فرض حصار أي مرحلة واحدة يمنع عدوى النباتات المضيفة. نظراً لأهميتها الاقتصادية والصوبه الوراثية، برز رمادية م. ككائن نموذج لدراسة الآليات من مسببات الأمراض النباتية الفطرية التفاعلات1،4. ولذلك، دراسة الأساس الجزيئي لهذه المراحل الإنمائية في رمادية م. سيساعد على توضيح الآليات الجزيئية الكامنة وراء القدرة الإمراضية الفطرية، وتحديد الجينات المستهدفة المرشحة للفحص وتصميم الرواية 5من مبيدات الفطريات.
وركزت التقارير الأخيرة بشأن الإصابة رمادية م. على الآليات الجزيئية لمراحل ما قبل الإيلاج، خاصة في كونيدييشن وتشكيل أبريسوريوم وأوتاد تغلغل و نمو المعدية3، 6-ولذلك، من الضروري وضع بروتوكول مفصلة لاختبار الإصابة رمادية م . وهنا، نقدم طريقة مفصلة لاختبار إصابة التي تستخدم فحوصات الإصابة بالرش بوساطة مع تعليق كونديل وتلقيح الجروح مع المقابس mycelial من م. رمادية. في هذا التقرير، يركز البروتوكول على ثقافة سلالات، إعداد الحل كونيدياتيون للرش، وتلقيح النباتات مع رمادية M.mycelial التوصيل بوساطة. يتم وصف هذه الخطوات بالتفصيل أدناه، وطريقة عرض تخطيطي عرض سير العمل الكامل للأسلوب وتظهر آفة نموذجية في الأرقام 1 و 2، على التوالي.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1-الرش التطعيم مع تعليق كونيديا رمادية م.
-
الثقافة الفطرية ل M.grisea
- إعداد دقيق الشوفان الطماطم أجار (OTA) في مستنبت للسلالات الفطرية.
- وزن 30-50 غرام من دقيق الشوفان، هذا إضافة إلى 800 مل من الماء المقطر/منزوع (ddH2س) ويغلي الخليط لمدة 30 دقيقة في وعاء كهربائي.
- تصفية عصير الشوفان المغلي في كوب من خلال قطعة من الشاش.
- إضافة 150 مل من عصير الطماطم و 20 غراما من أجار إلى فيلتراتي في الكأس وإضافة ddH2س يصل إلى 1,000 مل.
-
تحضير المواد التجريبية
- نقع البذور حوالي 50 من الصنف الأرز (أرز) ليشيانجكسينتوان-هيجو (LTH) في ddH2س د 3 أو نقع بذور الشعير حوالي 50 (السيرة الذاتيةفولغاري شعير وعد الذهبي) في ddH2س لحوالي 1 د.
- التفاف بذور الأرز أو الشعير في شاش رطبة وتنبت لهم على ورق الترشيح رطبة في أطباق بتري حوالي 30 التي يبلغ قطرها 10 سم × 10 سم في 28 درجة مئوية. وقت إنبات بذور الأرز حوالي 2-3 د، ووقت إنبات بذور الشعير حوالي 2 د. الرطوبة النسبية في الدفيئة هو حوالي 70%.
- زرع شتلات الأرز أو الشعير في الأواني استخدام يعقم بوتينغ التربة والري وثم تغطيتها بطبقة من الفيرميكوليت.
- وضع النباتات في glasshouse مناسبة أو نمو مجلس الوزراء في 25 درجة مئوية لحوالي 1 ~ 2 أسابيع.
- قص 3 طبقات من ورق الترشيح في الدوائر مع مقص الجراحية المعقمة (يجب أن يكون كل دائرة قطرها 8 سم) ووضعها على لوحات بلاستيكية معقمة 100 مم.
- إضافة ddH2س لكل طبق نقع ورق الترشيح.
- تأكد من ورق الترشيح تماما الرطب ولكن إضافة لا مياه إضافية.
- إزالة أي فائض المياه مع مضخة فراغ.
- 2 مكان المسواك العقيمة إلى الطبق الثقافة لدعم الأرز/الشعير يترك؛ الفضاء المسواك ~ 2-3 سم عن بعضها البعض.
- جمع أوراق الأرز 2 أسابيع بعد بذر البذور أو أخذ أوراق الشعير د 7 بعد بذر البذور.
- استخدام 4-6 أوراق شتلات الأرز/الشعير، قص الجزء السفلي من الساق في ~ 5 سم من الأعلى وجمع الأوراق.
-
بروتوكول التطعيم رذاذ
- الثقافة السلالة الفطرية في لوحات أوتا في حاضنة ترموستاتي (25 درجة مئوية) عن د ~ 4.
- إضافة ~ 2 مل من ddH2س استخدام من 0.5-5 مل الماصة لكل لوح عمره 4 أيام.
- مع حلقة تطعيم، كشط mycelia سلالة البرية من نوع م. رمادية وسلالة متحولة إلى الحطام mycelia.
- جمع الحطام mycelia ونقلها إلى لوحة أوتا جديدة. أخذ الحطام mycelia وضربه الجافة في مقاعد البدلاء نظيفة.
- وتغطي اللوحة مع 3 طبقات من الشاش تأمين الرطوبة اللازمة لنمو كونيديا في دفيئة عند 25 درجة مئوية في اليوم (ح 14) و 23 درجة مئوية في الليل (ح 10) ح 24-48.
- إضافة 2 مل ddH2س لكل طبق وكشط في كونيديا برفق مع مسحات القطن المعقمة متبوعاً بترشيح من خلال طبقات 2 ورقة العدسة. احرص على عدم خدش سطح المتوسطة الثقافة.
- نقل تعليق كونيديا في أنبوب 50 مل جديدة مع 100 1,000 ميليلتر ماصة.
- أجهزة الطرد المركزي لمدة 5 دقائق على الأقل من 5,000 ز x عند 25 درجة مئوية.
- إزالة المادة طافية وريسوسبيند بيليه لإعطاء 2 × 104 كونيديا كل مل في نسبة 0.025% (v/v) الحل توين-20. الحل توين-20 عادة حوالي 10-20 مل.
- من أجل تعليق بوغ في بخاخ باليد.
- التعقيم حوالي 10 مل تعليق كونديل على أوراق الأرز شتلات الأرز منذ 2 أسابيع أو الشعير يترك شتلات الشعير عمره 7 أيام واحتضانها لهم عند 25 درجة مئوية في غرفة مظلمة، والرطبة ل ~ 24 h. رذاذ محطات التحكم مع 0.025% (v/v) الحل توين-20.
- نقل الأوراق إلى غرفة رطبة أخرى تحت ضوء الفلورسنت عند 25 درجة مئوية كبيرة ح 12.
- تسجيل أعراض المرض في 5 د بعد التلقيح. فحص ريش المريضة الأرز/الشعير ~ 6 سم في الطول. التقييم القياسية وفقا لنظام التسجيل لمقاومة الانفجار من الدولي بحوث المعهد (الأرز). وترد تفاصيل نظام التهديف لمقاومة الانفجار في الجدول 1.
- تصوير أوراق لتقييم عدوى السلالات المختبرة. وقيمت العدوى بالعدد الآفات الواحدة 3.6 سم2.
2-إصابة التطعيم مع مكعبات الميسليوم أو قطرات من كونديل تعليق رمادية م.
- استخدام إبرة تشريحية، كشط ثلاثة الجروح طويلة 2-3 سم في الأوردة الرئيسية من أوراق منفصلة الأرز/الشعير؛ الحرص على عدم اختراق الأوراق.
- وضع أوراق كشط على المسواك والرش 0.02% (v/v) الحل توين-20 على يترك تشكل طبقة من قطرات.
- قطع المكونات mycelial 0.5 × 0.5 سم لكل سلالة رمادية م. (السلالات البرية من نوع، متحولة، تكملة، أو غيرها من سلالات الاختبار) من صفيحة أوتا.
- وضع المقابس mycelial أو يترك 25 ميليلتر قطرات من تعليق كونيديال على الجرحى واحتضان أوراق عند 25 درجة مئوية في دائرة رطبة د 3-8.
- دراسة الآفات في د 5-7 بعد التطعيم. طريقة الفحص هو نفسه كما كان في طريقة التطعيم رذاذ (راجع الخطوة 1.3.13).
- فحص ريش المريضة الأرز/الشعير ~ 6 سم في الطول وصورة فوتوغرافية لهم لتقييم عدوى السلالات المختبرة. وقيمت العدوى بالعدد الآفات الواحدة 3.6 سم2.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
العمل كله للأسلوب الذي يظهر في الشكل 1. وأجريت فحوصات الإصابة بالنبات على شتلات الأرز عرضه عمرها 14 يوم (cvساتيفا O. CO-39) أو يترك عرضه عمره 7 أيام الشعير (السيرة الذاتيةفولغاري حاء وعد الذهبي)7،،من89. لاختبار لعدوى على أوراق الأرز، وأعدت تعليق كونديل (1.0 × 105 جراثيم مليلتر) من سلالة البرية من نوع رمادية م. P131 وسلالة متحولة الحذف Com1 وثم رش مانعات نبات 14-اليوم-القديم عرضه أول أكسيد الكربون-39 الشتلات، الذي أبقى ثم في غرفة رطبة لمد 510. تلقيح P131 CO-39 يترك عرض الآفات قوية نموذجية للانفجار الأرز، ولكن يترك تلقيح Com1 أظهرت عيوب العدوى واضحة ولا يمكن الحصول على عدوى كامل (الشكل 2أ). سلالة البرية من نوع P131 من سلالة التي حصلت عليها أنت-ليانغ "بينغ" في عام 198818. وحصل المسخ فارغة MoKMT2H (ΔMoKMT2H) بتساو وآخرون في المختبر لدينا استخدام هدف جينات استبدال استراتيجية11. تم عزل المسخ Com1 حسب يانغ et al. ، في مختبر لك-ليانغ "بينغ"10.
للتحقق من ما إذا كان ΔMoKMT2H رمادية م. يمكن أن تصيب الخلايا المضيفة عن طريق الجروح، تآكل أوراق الأرز البرية من نوع تم تلقيح النباتات مع المقابس mycelial من ΔMoKMT2H عن طريق أسلوب الرش أو الأسلوب مما أسفر عن إصابة11. وكشفت الأوراق التي تم تلقيح رذاذ مع ΔMoKMT2H لا عيوب واضحة في العدوى ΔMoKMT2H مقارنة مع سلالة P131/البرية من نوع؛ ومع ذلك، لوحظت عيوب واضحة ليترك تلقيح مع ΔMoKMT2H عن طريق الجروح (الشكل 2أ). كذلك اختبار الإصابة النبات بأوراق الشعير، صحية أو يترك الجرحى (cv وعد الذهبي) تم تلقيح مع قطرات كونديل أو المقابس mycelial، على التوالي، من Com1 أو ΔMoKMT2Hأو P131. في 5 د بعد التطعيم، آفات الأرز النموذجية الانفجار تماما وضعت على أوراق تلقيح مع ΔMoKMT2H أو سلالة P131، بينما تم العثور على آفات أصغر حجماً وأقل على أوراق تلقيح مع المسخ Com1 (الشكل 2 ب).
الشكل 1 : مخطط يوضح الإصابة بالنبات. كانت نامي بذور النباتات في التربة في الأواني البلاستيكية (50 مم2 × 50 مم العميق، مع وجود ثقب صرف) وهما بذور كل وعاء، وكانت تزرع الشتلات في دفيئة. كانت تزرع في الثقافة والتطعيم للفطريات الانفجار رمادية م. على ألواح أوتا. كونيديا رش طريقة التطعيم، علقت في نسبة 0.02% (v/v) الحل توين-20 تعليق كونيديا وعلى رش النباتات الأرز/الشعير. لطريقة التطعيم خدش، أوراق نبات الأرز كشط/الشعير على ألواح البلاستيك وتلقيح ثم سد mycelial أو تعليق كونيديا. وبعد ذلك، كانت جميع أوراق النباتات المعالجة مثقف الظلام ح 24 ومثقف الضوء على ح 12. وأخيراً، تم تسجيل عدد المستعمرات داخل وحدات من 3.6 سم2 . الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2: Com1 و MoKMT2H المطلوبة لتكوين كونيديوم والقدرة الإمراضية على أوراق الأرز. (أ) يظهر هذا الفريق يترك تلقيح الأرز عبر الرذاذ كونيديا (يسار) أو التوصيل ميسيليال (يمين) مع كونيديا من P131 البرية من نوع رمادية م. متحولة Com1أو ΔMoKMT2H. ولوحظت أوراق نموذجية د 7 بعد التلقيح بوساطة التوصيل mycelial، التي أجريت على أوراق الأرز الحبيبات. ولوحظ آفات نموذجية 5 د بعد التلقيح بوساطة التوصيل ميسيليال. الشعير (ب) يترك تم تلقيح عن طريق كونيديا الرذاذ (يسار) أو التوصيل ميسيليال (يمين). كعنصر تحكم معاملة صورية، تم رش نفس الحجم من 0.025% (v/v) الحل توين-20. لتلقيح الجرح، تم تعديل هذا رقم P131 من تساو et al. 11- MoKMT2H في الفطريات أسكوميسيتي هو هومولوج فنية من Ash1، الذي تورط في H3K4 و H3K36 مثلايشن11. الشريط = 1 سم. كانت طفرات Δcom1 إلى حد كبير في الفوعة على شتلات الأرز والشعير10. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
| مقياس | الوصف |
| 1 | بقع بني صغيرة من حجم النقطة رقم pin |
| 2 | مدور قليلاً ممدود، نخرية الرمادي بقع صغيرة، حوالي 1-2 مم في القطر، مع فارق بني متميزة. وتوجد الآفات معظمها على الأوراق العلوية |
| 3 | نوع الآفة هو نفسه كما هو الحال في 2، ولكن عددا كبيرا من الآفة على أوراق ثيوبير |
| 4 | انفجار عرضه نموذجية آفات، 3 مم أو أطول، إصابة أقل من 4% من منطقة ثيليف |
| 5 | انفجار عرضه نموذجية آفات، 3 مم أو أطول، إصابة أقل من 4-10 في المائة منطقة نبات |
| 6 | انفجار عرضه نموذجية آفات، 3 مم أو أطول، إصابة أقل من 11-25 في المائة منطقة نبات |
| 7 | انفجار عرضه نموذجية آفات، 3 مم أو أطول، إصابة أقل من 26-50% منطقة نبات |
| 8 | انفجار عرضه نموذجية آفات، 3 مم أو أطول، إصابة أقل من 51-75% منطقة ليف، العديد من أوراق الشجر الميت |
| 9 | انفجار عرضه نموذجية آفات، 3 مم أو أطول، وإصابة أكثر من 75% من مساحة ورقة |
الجدول 1: نظام لتسجيل النقاط لمقاومة الانفجار. ويستشهد الجدول من الدولي بحوث المعهد (الأرز).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
جينات مقاومة الأمراض النباتية دوراً أساسيا في منع العدوى بمسببات الأمراض، بما فيها مسببات الأمراض الفطرية1،12. انفجار الأرز قد استخدمت كنموذج لفهم طبيعة الهياكل السكانية الممرض وتحديد جينات مقاومة النبات4. ولذلك، من الضروري دراسة مقاومة المرض الوراثي والأنماط الجينية أفيرولينسي من الأصناف الرئيسية من النباتات الزراعية على نطاق واسع تحديد النباتات المقاومة للأمراض التي يمكن أن تزرع باستمرار. وعلاوة على ذلك، تتطلب مزايا الأنماط الجينية أفيرولينسي من مسببات الأمراض في مجال التوزيع الرشيد الوراثية مقاومة مختلفة للمضيف أصناف12،13. ومع ذلك، أساليب التلقيح الحالية عادة تتداخل مع الفحص للمقاومة والممرض تحديد14،15،،من1617.
وهنا نقدم طريقة سريعة ودقيقة لاختبار الإصابة بالنبات. هذا الأسلوب من التطعيم مناسبة لتحديد النباتات مقاومة أثناء تربية المحاكمات والنمط الظاهري للسكان ذرية أثناء استنساخ جينات مقاومة. هنا، قمنا بإنشاء طريقة لتطعيم النبات الجرحى لا يترك رمادية م. لمقاومة المضيف يلعب دوراً رئيسيا في منع انتشار الممرض، يترك هذه في المختبر الطريقة التي أنتجت الجروح على الأرز تم اختبارها وتلقيح الانفجار الأرز على الجرح، ومريحة لخلق إصابة مباشرة في يترك دون الحاجة إلى اختراق البشرة أوراق والجدار خلية البشرة. وعلاوة على ذلك، يعد هذا الأسلوب تلقيح مناسبة للإعمار أوراق مختلفة. نتائج التلقيح مستقرة ودقيقة. يمكن استخدام أسلوب جرح التطعيم التطعيم مع ميسيليا لتحديد الأمراض التي تسببها السلالات الفطرية التي تنتج كميات قليلة فقط من كونيديا.
هذا البروتوكول سيسهم في زيادة فهمنا للآليات المسببة للأمراض التي يتم الحفاظ عليها في الفطريات، فضلا عن العوامل الخاصة بالعوامل الممرضة التي تسمح بنوع من الفطريات لمقاومة وقمع الحصانة الفطرية المضيف13. ومع ذلك، تطعيم الجرح لا ينطبق عند محاولة تحديد معدل conidial الغزو والتوسع ميسيليا. ولكن في الدولة الطبيعية، وطريقة التطعيم رذاذ يمكن أن تعكس على نحو أفضل الحالة المرضية التي تحدثها الممرض. من السهل أن تعمل طريقة التطعيم الرذاذ ويساعد على تحسين كفاءة العمل. مجتمعة، هذه النتائج تشير إلى أسلوب تطعيم دقيقة وثابتة ضرورية لفحص النبات الجينات المقاومة وتحديد القدرة الإمراضية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
أيد هذا العمل مشروع البحث العلمي الخاص لجامعة بكين للزراعة (YQ201603) والمشروع العلمي "اللجنة بكين التعليمية" (KM201610020005).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Filter paper | GE Healthcare brand(Sweden) | 10311387 | |
| 50-mL tube | CORNING(Amercia) | 430290 | |
| Centrifuge | Eppendorf(Amercia) | 5804R | |
| Culture dish | Thermofisher(Amercia) | 150326 | |
| 0.5-5 mL pipette | Eppendorf | 4920000105 | |
| 100-1000uL pipette | Eppendorf | 4920000083 | |
| Vacuum pump | Leybold | D25B | |
| Dissection needle | FST | 26000-35 | |
| Incubator | MEMMERT | PYX313 | |
| Inoculation ring | Greiner Bio One | 731175 |
References
- Li, W. T., et al. A natural allele of a transcription factor in rice confers broad-spectrum blast resistance. Cell. 170 (1), 114-126 (2017).
- Chi, M. H., Park, S. Y., Kim, S., Lee, Y. H. A novel pathogenicity gene is required in the rice blast fungus to suppress the basal defenses of the host. PLoS Pathogens. 5 (4), 1000401 (2009).
- Jia, Y., Valent, B., Lee, F. N. Determination of host responses to Magnaporthe grisea.on detached rice leaves using a spot inoculation method. Plant Disease. 87 (2), 129-133 (2003).
- Ebbole, D. J. Magnaporthe as a model for understanding host-pathogen interactions. Annual Review of Phytopathology. 45, 437-456 (2007).
- Hamer, J. E., Talbot, N. J. Infection-related development in the rice blast fungus Magnaporthe grisea. Current Opinion in Microbiology. 1 (6), 693-697 (1998).
- Howard, R. J., Valent, B. Breaking and entering: host penetration by the fungal rice blast pathogen Magnaporthe grisea. Annual Review of Microbiology. 50, 491-512 (1996).
- Chen, X. L., et al. N-Glycosylation of Effector Proteins by an α-1,3- Mannosyltransferase Is Required for the Rice Blast Fungus to Evade Host Innate Immunity. The Plant Cell. 26 (3), 1360-1376 (2014).
- Zhang, Y., et al. M.ARG1, MoARG5,6 and MoARG7 involved in arginine biosynthesis are essential for growth, conidiogenesis, sexual reproduction, and pathogenicity in Magnaporthe oryzae. Microbiological Research. 180, 11-22 (2015).
- Du, Y. X., et al. A serine/threonine-protein phosphatase PP2A catalytic subunit is essential for asexual development and plant infection in Magnaporthe oryzae. Current Genetics. 59 (1-2), 33-41 (2013).
- Yang, J., et al. A novel protein com1 is required for normal conidium morphology and full virulence in Magnaporthe oryzae. Molecular Plant-Microbe Interactions. 23 (1), 112-123 (2010).
- Cao, Z. J., et al. An ash1-like protein MoKMT2H null mutant is delayed for conidium germination and pathogenesis in Magnaporthe oryzae. BioMed Research International. 2016, 1575430 (2016).
- Bryan, G. T., et al. A single amino acid difference distinguishes resistant and susceptible alleles of the rice blast resistance gene Pi-ta. The Plant Cell. 12 (11), 2033-2045 (2000).
- Zhou, J. M. Plant pathology: a life and death struggle in rice blast disease. Current Biology. 26 (18), 843-845 (2016).
- Guo, M., et al. MoGrr1, a novel F-box protein, is involved in conidiogenesis and cell wall integrity and is critical for the full virulence of Magnaporthe oryzae. Applied Microbiology and Biotechnology. 99 (19), 8075-8088 (2015).
- Talbot, N. J. On the trail of a cereal killer: Exploring the biology of Magnaporthe grisea. Annual Review of Microbiology. 57, 177-202 (2009).
- Wilson, R. A., Talbot, N. J. Under pressure: investigating the biology of plant infection by Magnaporthe oryzae. Nature Reviews Microbiology. 7, 185-195 (2009).
- Jia, Y. L., Lee, F. N., McClung, A. Determination of Resistance Spectra of the Pi-ta and Pi-k Genes to U.S. Races of Magnaporthe oryzae Causing Rice Blast in a Recombinant Inbred Line Population. Plant Disease. 93, 639-644 (2009).
- Peng, Y. L., Shishiyama, J. Temporal sequence of cytological events in rice leaves infected with Pyricularia oryzae. Canadian Journal of Botany. 66 (4), 730-735 (1988).
