Summary
Цель этой статьи заключается в обеспечить грунт для разработки и использования модели кролика карцинома VX2 рака печени.
Abstract
Кролик VX2 опухоли является модель животных, обычно используемых для трансляционного исследования относительно гепатоцеллюлярной карциномой (HCC) в области интервенционной радиологии. Эта модель использует анапластическая плоскоклеточный рак, легко и надежно передаются в скелетных мышцах доноров кроликов для возможного урожая и аллотрансплантата имплантации в печени наивно получателей. Эта опухоль трансплантата быстро перерастает в печени получателей кроликов в ангиографически идентифицируемой опухоли, характеризуется некротические ядро, окруженный жизнеспособной гиперва капсулу. Физический размер кролика анатомии является достаточным для облегчения сосудистой инструментирования позволяет для приложения и тестирование различных лечебных методов. Несмотря на эти преимущества существует нехватка технических ресурсов в качестве конкретной ссылки для исследователей, работающих с моделью. Здесь мы представляем всеобъемлющий план визуальные для технических аспектов развития, роста, размножения и ангиографические использование кролик VX2 опухоли модели для начинающих и опытных исследователей, так.
Introduction
Кролик VX2 опухоли модель играет роль в экспериментальной онкологии с момента ее разработки в 1935 году1,2. Эта опухоль является вирус индуцированной анапластическая плоскоклеточный рак характеризуется hypervascularity, быстрый рост и легко распространение в скелетных мышцах3,4. В то время как кролик VX2 опухоли модель использовалась для изучения множества рака5,6,,78; в центре внимания этого документа является рак печени9.
Цель метода, описанного – представить модель для первичного рака печени, или гепатоцеллюлярной карциномой (HCC), который может использоваться интервенционных радиологов для трансляционного исследования. Он может использоваться для фармакокинетические исследования, терапевтические исследования и абляционного метод тестирования10,11,12,13,14,15.
Метод, изложенных в настоящем документе дает несколько преимуществ над другими моделями в той же сфере таких грызунов модели, как крыс, мышей и сурки или больших моделей, как приматов16. Одним из основных преимуществ является быстрое и надежное опухолевого роста, который позволяет исследователям установить линию Активные опухоли в течение месяца первого задние конечности распространения17. Кроме того эта опухоль имеет простой сонографические видимости и гиперва периферии, которая позволяет для лечения локорегионарных transarterial и абляционного лечения. Наконец и самое главное размер кролика сосудистую позволяет целесообразно и технически легко использования сосудистых инструментария18.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Следующий протокол следует всех требований и руководящих принципов, утвержденных в университете штата Иллинойс - Чикаго. Он был рассмотрен и одобрен местный институциональный уход животных и использование Комитета до выполнения.
1. VX2 Задних конечностей опухоли
- Закупать VX2 опухолевых клеток линии от национального института отдела от рака лечения диагноз рака и лечения опухоли/мобильные линии репозитория.
Примечание: В настоящее время, заказать каталог можно найти в следующей ссылке: https://dtp.cancer.gov/repositories/. - Подготовить суспензию клеток для инъекций, место замороженные среднего образца и метилцеллюлоза VX2 в теплой воде до тех пор, пока они растаяло.
- Аспирационная 0.5\u20121 мл суспензии талой клеток и равным объемом талой метилцеллюлоза среды в 5-мл шприц.
Примечание: Это может помочь использовать 21 или 22 G иглы для аспирационная суспензию клеток и больше иглы для аспирационная метилцеллюлоза среднего. Место шприцы на льду.
- Аспирационная 0.5\u20121 мл суспензии талой клеток и равным объемом талой метилцеллюлоза среды в 5-мл шприц.
- Подготовьте задних конечностей опухоли доноров кролик для модифицирования суспензии клеток, начиная с седативный эффект, используя acepromazine 1 мг/кг и бупренорфина 0,02 мг/кг внутримышечно с учетом. Бриться сайт прививка (задние конечности) с Клипперс и чистого побрился с агентом на основе спирт или йод.
Примечание: Мелоксикам может быть предоставлена в дозе 0,2 мг/кг подкожно анальгезии. Кролик очень трудно бриться. Рекомендуется, что исследователь выполнить несколько проходов, сначала упором на очистка основную часть мех и затем нажав Клипперс против кожи и идет вразрез с зерном. - Прикрепить 16 G иглу в шприц 5 мл, содержащего суспензию клеток и вставляют 1 мл взвеси живот мышцы задние конечности кролика доноров, примерно 1 см в глубину. Убедитесь в том охранять седалищного нерва, запущенные в паз ощутима вдоль правой бедренной кости.
Примечание: Свежие VX2 успешно прививает 88% испытуемых, в то время как замороженные и талой VX2 только успешных 33% время19.
Предупреждение: Опухоль VX2 будут расти быстро. Побочные эффекты, которые могут быть отмечены как прогрессирует опухоли являются: увеличение частоты дыхания, вялость, снижение бдительности или поведенческие изменения (например, необычная агрессивность). Следовательно рекомендации являются внимательно следить за животными и планировать опухоли урожай в течение двух недель после вакцинации.
2. VX2 Задних конечностей опухолевого роста и сбора урожая
Примечание: При условии успешной прививки, должно быть ощутима конкреций опухоли (3\u20124 см) в месте инъекции в течение 2 недель. Обычно этот конкреций будет ощутима около 1 недели; Однако лучше пусть опухоли расти для достаточно ткани коллекции. Как правило этот конкреций будет твердо и вулканизированных повышенных над уровнем данных мышц. Если
- Ощупывайте области привитых на 2 недели от прививки. Если не рост опухоли обнаружены на 2 недели, снова выполните шаг 1. Смотрите Рисунок 1.
Примечание: Наличие опухоли могут также оценить через УЗИ. Хотя не было никаких исследований оценить разницу в метриках роста опухоли при наследовании из замороженных запасов по сравнению с свежие фондовой, он был наш опыт, что замороженные запасов опухоль растет чуть медленнее и будет обнаружить после его свежие фондовой борьбе с часть. Несмотря на это либо метод должен принести заготовки опухоли на 2 недели. - Подготовьте доноров задних конечностей опухоли опухоль урожая. Анестезировать кролика с кетамином и 5 мг/кг Ксилазина 45 мг/кг. Усыпить внутривенного (IV) доза Пентобарбитал натрия, более 390 мг/кг.
- После того, как были умерщвлены кролика, начните уборки опухоли, удалив кожной и подкожной ткани вышележащих опухоли конкреций с помощью скальпеля с какой размер лезвия, исследователь считает нужным. Смотрите Рисунок 2.
- После того, как была обнаружена опухоль конкреций в пределах мышц задних конечностей, удалите опухоль комплектно с использованием широкой криволинейных поля. Для этого, вырезать тендиноза крепления на концах проксимальных и дистальных мышцы, а затем след лезвие скальпеля вдоль основной кости. Пополам explanted образца, подвергая опухолью капсулы и некротические ядро. Смотрите Рисунок 3.
Примечание: VX2 опухоль имеет весьма некротические ядро. Не забудьте использовать защиты надлежащего глаз и других средств индивидуальной защиты при уборке опухоли, поскольку любое повреждение капсулы опухоли может привести к высокого давления отстрела некротические мусора. - Аккуратно почистить некротические ядро с тупым предметом (например щипцы, hemostats), чтобы очистить опухоли. Это должно позволить для лучшей визуализации опухолью капсулы и точки перехода между капсулой и прилегающих мышц. Смотрите Рисунок 4.
- Из этого примера, урожай несколько кусков опухоли около 1\u20122 мм3 и немедленно хранить их в чашку, содержащие комнатной температуре стерильного физиологического раствора.
Примечание: Эти опухоли образцов будет использоваться для последующих внутрипеченочных имплантации. - Поместите оставшиеся опухоли в стерильных Петри и купаться с среднего Дульбекко изменение орла (DMEM). Если этот образец хранится холодная на льду, она может быть сохранена для обработки до 2\u20123 ч позже.
3. печени опухоли имплантация через лапаротомия
- Подготовка получателей кролик лапаротомии. Анестезировать получателя использованием кетамина 45 мг/кг и 5 мг/кг Ксилазина кролика для индукции, следуют интубации и техническое обслуживание с 1% - 3% изофлюрановая как необходимо. Когда наркоз кролика, брить хирургической сайта с помощью стрижки. Чистота области разреза с помощью трех экземплярах мыть с скраб Бетадин, 70% этанола раствор и Бетадин-раствор и драпировка живота в стерильные хирургические моды.
- С помощью #15-лезвие, инициировать лапаротомия, делая небольшой надрез вниз вертикальной средней линии через кожу кролика, начиная от мечевидного отростка. Это должно быть легко пальпируется и стремится быть примерно размер американский Пенни. Смотрите Рисунок 5.
- Отражать кожи и идентифицировать linea alba. Это должно быть Светоотражающий белая полоса ткани, книзу путешествия в средней линии. Для обхода использовать тупой рассечение linea alba и разоблачить брюшины. Смотрите Рисунок 6.
Примечание: Брюшины легко определить, поскольку он будет непосредственно вышележащих кишечника, который можно увидеть перемещение с дыханием.
Предупреждение: Брюшины клонит быть сторонником основной кишечника из-за поверхностного натяжения. Использование тупой травмы вскрыть linea alba помогает рассеять риск перфорации кишечника базовой. - После того, как подвергается брюшины, тщательно анализировать через него вступить в брюшной полости. Печень, теперь могут быть определены. Лучше перемещаться пространства в брюшной полости, расширьте срединной линии разреза 1\u20122 см книзу через кожи, мышц и брюшины.
Примечание: Расширение срединной линии разреза можно легко и безопасно сделать вставив тщательно изогнутые кровоостанавливающий перитонеального пространства с изогнутой кончиком, поверхностно, обращенной к брюшине. Затем откройте зажим слегка и использовать лезвие милый ткани между двумя ветвями кровоостанавливающий. - Определите левой доли печени, для того чтобы выбрать сайт для имплантации опухоли. Левой доли infero латеральнее медиального лепесток, который сидит в средней линии.
- Прежде чем пытаться привлечь печени из перитонеального пространства, место сухой кусок Марли на нижней аспект разрез.
Примечание: Марля обеспечит адэрентных поверхность заложить печени, чтобы предотвратить его от втягивания обратно в брюшную полость. - С помощью атравматической щипцами или кусок влажной марлевой пальцы, тщательно обратить левой доли печени из брюшной полости через разрез и заложить его на сухой марлей, ранее. Смотрите Рисунок 7.
Предупреждение: Печени капсулы чувствительны и могут легко разрыва. Важно, чтобы быть нежным, при обработке этого органа для предотвращения капсульной кровоточить, печени синяков или возможного hemoperitoneum.
Примечание: Обычно, печень будет объявить себя визуально войдя перитонеального пространства; Однако если растянутый живот кролика, печени может быть толкнул краниально Долой. Если это так, осторожно поднимите брюшной стенки с помощью тупого зонда. В этом случае печени, как правило, придерживаться вентральной аспект диафрагмы из-за поверхностного натяжения так тщательно отдельный печени с помощью тупого зонда, и его следует отсоединить. Затем используйте атравматической щипцы для вытянуть печени. - На данный момент подготовить опухолевой ткани для имплантации и поместите кусок влажной марлевой печени, чтобы защитить его.
- Выберите фрагмент3 мм 1\u20122 опухолевой ткани, который был создан во время шага 2.6 для имплантации в печени. Смотрите Рисунок 8.
- С помощью #11-лезвие, проколы тканей печени под углом 45°, делая глубокий карман 0,5 см, стараясь не проникают в спинной печени капсулы. Оставьте лезвие на месте после делать прокол. Смотрите Рисунок 9.
- Аккуратно поднимите лезвие в вентральной направлении, чтобы создать небольшой карман в печени кровати. Возьмите кусок опухоли с помощью щипцов, поместите кусок опухоли в этом кармане и затем удалите лезвие.
Примечание: Лезвия могут быть удалены перед установкой часть опухоли, однако, печень будет кровоточить и это может заслонить прокол сайт, что делает его трудно определить.
Предупреждение: Не забудьте свести к минимуму контакт опухоли с другими структурами для предотвращения непреднамеренного опухоли посева. Это можно также избежать путем отмены любых инструментов, используемых для оказания помощи после имплантации. - На данный момент Поместите кусок гемостаза агента, такие как Гель-пена, опухоли карман для содействия гемостаза и предотвращения выброса части опухоли.
- Возвращение печени в живот, после подтверждения гемостаз.
- Закройте брюшной стенки с 3-0 полидиоксанон шов на конус иглы с помощью простой непрерывный стежок и закрыть кожи с 4-0 полиглактин 910 швы на игле резки с помощью непрерывной subcuticular стежка.
Предупреждение: При закрытии брюшной стенки, заботиться чтобы не повредить сальника или других структур кишечника в шов броска.
Примечание: Хотя эта опухоль займет по меньшей мере 2 недели, чтобы окончательно рентгенологически идентифицироваться, достигает размера 1.5\u20122 см в диаметре в 3 недели роста. Будьте осторожны, чтобы не позволить печени опухоли расти последних недель 3.5\u20124, поскольку опухоль будет формировать экзофитный массы и активно распространяются локально.
4. VX2 Опухоли подвеска подготовка
- Место стрейнер 40 мкм в горловину трубки 50 мл конические пропилена. С помощью опухоль из шага 2.7, используйте #15-лезвие для царапать поверхность опухоли для сбора жизнеспособных опухоли и поместить эти соскобы в сетчатый фильтр.
- Вымойте соскобы жизнеспособных опухоли через сито с помощью DMEM и затем центрифуга пропилена трубки при 1600 об/мин за 8 мин.
- После завершения центрифуги, удалить супернатант и отменить его. Затем добавьте метилцеллюлоза оставшийся блок клеток в объемном соотношении 1:1.
- Inject Эта подвеска в задние конечности кролика доноров следующие шаги 1.3\u20121.4. Поместите оставшиеся подвеска в 1 мл аликвоты в криогенных трубы и заморозить их в жидком азоте для последующего использования.
5. Ангиографическая использование VX2 опухоли печени
- Подготовьте кролика, как описано в пункте 3.1.
- Ощупывайте бедренной паз в пах. Когда была обнаружена паз, сделайте 2\u20123 см линейный разрез вдоль паза. Смотрите Рисунок 10.
- Использование тупой рассечение, найдите и изолировать бедренной комплект, содержащий бедренной вены, артерии и нервов. Смотрите Рисунок 11.
- Опять же используйте тупой рассечение отделить бедренной артерии от остальной части структур в пакете и изолировать артерии на вершине дескриптор скальпель. Смотрите Рисунок 12.
- С 3-французский интродьюсер комплект используйте метод Seldinger для получения доступа с помощью иглы. Вставьте проволочного проводника и извлеките иглу для продвижения оболочка 3-Французский в сосуд. Смотрите Рисунок 13.
Предостережение: Избегайте использования чрезмерной силы в продвижении оболочка 3-французский, как это может привести к перерезка бедренной артерии. - Под руководством рентгеноскопические и с помощью катетера, проволочного проводника и йогексол контраст агента, выберите для брюшнополостной ствол — обычно находится на уровне T12 — и затем продвигать катетер в левой печёночной артерии через общего печени и надлежащего печеночной.
- На данный момент Администрирование агента выбора через катетер. Как только агент администрируется, удалите катетер.
- С помощью 3-0 Шелковый шов, перевязать бедренная артерия пометив проксимальный и дистальный центры в точку вставки оболочки. Не забудьте затянуть узел проксимальнее ножны, как он снимается для предотвращения кровотечения.
- Закройте пах разрез с 4-0 полиглактин 910 швы на игле резки с помощью subcuticular стежка.
- Поддерживать стандартные послеоперационного ухода и монитор животных восстановления. Выполняют эвтаназии и necropsy, при необходимости, с использованием стандартных методов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Глядя на Рисунок 1, становится ясно, что quadricep кролика расширяется. Кроме того несколько небольших дискретных конкреций, обычно корреляция с ростом опухоли через фасции, видны. При пальпации вводят конечности должны появиться чем не вводили конечности. Если исследователь требует более точные гарантии присутствия опухоли, УЗИ может использоваться для идентификации опухоли, встроенные в мышцах. Если опухоль не обнаруживается, Задние конечности должны быть повторно вводят с суспензию клеток опухоли.
Для того, чтобы подтвердить успешное сосудистого доступа, крови, возвращение в оболочке наблюдается на стремление как показано на рисунке 13D. Если сосудистого доступа была неудачной, попытка аспирации выход воздуха в оболочке или представляют значительное сопротивление, когда потянув поршень шприца.
Для роста опухоли печени, существует два способа для подтверждения успешного распространения: ангиографически и на вскрытие. На ангиографию выявление опухоли может возникнуть сразу же как в случае Рисунок 14А , где опухоль привлекает кровоснабжение непосредственно из общей печёночной артерии. Он также может занять некоторое время в тех случаях, когда опухоль боковой как в случае 14D рис. Если опухоль не легко видимой после инъекции контраст в общей печеночной артерии, исследователь следует попытаться придать контраст в левой и правой печёночной артерии для того, чтобы улучшить шансы подсветка опухоли. Он также может помочь искать аберрантных артерии, боково путешествие к дистальной край печени, как показано на рисунке 14C. На вскрытие опухоли должны быть легко видны, как Рисунок 15Б (Сравните выяснить 15A).
Рисунок 1: задние конечности кролика. Бритая кролик задние конечности с массового показателем роста опухоли. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2: подвергаются задних конечностей. Же конечности как показано на рисунке1 с вышележащих кожи отражение, показывая большой площади hypervascularity и обесцвечивание отличаются от окружающих мышц, представляющий расположение опухоли (белая пунктирная линия). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3: Опухоль удалена целиком и пополам. (A) комплектноудалены опухоли и прилегающих мышц. (B) опухоль была пополам раскрыть его капсульной стены (стрелки) и некротические ядро. Опухолевого процесса можно увидеть в половинки, а также некоторые некротические мусора. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 4: опухоль капсулу. Стрелки обозначают часть опухоли (T), который очерчена от прилегающих мышц (М), опухоли капсула (пунктирной белой линии). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 5: подвергаются мечевидного отростка. Кожи и основные мышцы были отражены для визуализации мечевидного отростка (черная стрелка) и кишечника (белая стрелка). Белая звезда обозначает направление черепа. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 6: Linea alba. Вышележащих кожи и фасции были отражены для визуализации linea alba (черная стрелка) в краниально к хвостовой направлении. Этот район является аваскулярный и обеспечивает свободный доступ к потери крови перитонеального пространства. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 7: печени вне брюшины. Это изображение показывает лепесток печени, которое было аккуратно извлечены из перитонеального пространства и размещены на кусок Марли. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 8: после обработки опухоли кусок для имплантации. Кусочек опухоли, обработанных до соответствующего размера для имплантации укладывать кончик из #11-лезвие для масштаба. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 9: создание карман в печени для опухоли имплантация. #11-лезвие вставляется на соответствующую глубину в извлеченной доле печени. Это создаст соответствующего размера, pocked для имплантации опухоли кусок на рисунке 8. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 10: бедренная groove и первоначальный разрез. (A) пальпацию задние конечности позволяет для визуализации бедренной паза (белая пунктирная линия). (B) первоначальный разрез в задних конечностей, вдоль бедренной groove. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 11: выявление бедренной расслоение. Тупой рассечение первоначального разреза показывает бедренной вены (черная стрелка). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 12: рассечение бедренной расслоение и изоляции бедренной артерии. (A) рассечение бедренной пучка позволяет нам различать индивидуально (слева направо) бедренной вены (FV), бедренной артерии (FA) и бедренного нерва (FN). (B) бедренная артерия, изолированные на дескриптор скальпель. Обратите внимание на столбец крови, позволяя различия от бедренного нерва. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 13: сосудистого доступа. (A) проволочного проводника (G) выдвигается в бедренной артерии (ФА) через иглу доступа (N), который ранее был вставлен в бедренной артерии. (B) платье (S) и расширитель (D) являются передовыми над проволочного проводника (G) в бедренной артерии (ФА). (C) платье (S) и расширитель развиты полностью в бедренной артерии (ФА) до оболочка хаб. (D) оболочка крепится с шелком после того, как были удалены расширитель и проволочного проводника. Стремление дает крови (черная стрелка) в оболочке. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 14: ангиографические томография печени опухоли. (A) катетера (белая стрелка) доставки контраст непосредственно в артерии, кормления опухоли (белая звезда). (B) катетера (белая стрелка) доставки контраст в дистальной левая печеночная артерия и умеренным контрастом поглощения боковых опухоли (белая звезда). (C) далее контраст инъекции в опухоль от B, демонстрируя аберрантных артерии (белая линия) путешествие из катетера (белая стрелка) в опухоль (белая звезда). (D) опухоль от B после дальнейших контраст поглощения. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 15: кролик печени. (A) печень здоровой кролик показаны левой доли медиальной (белая звезда), обволакивающие левой боковых лепестков (Черная звезда). (B) кролик печени с полностью развитой опухоли печени (белая стрелка). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Первым важным шагом в методологии VX2 опухоли является успешное распространение опухоли в задние конечности кролика доноров. Обратитесь к первый абзац в разделе «Представитель результатов» для получения дополнительной информации об этом шаге.
Следующим важнейшим шагом является обеспечение того, что капсула жизнеспособных опухоли должным образом определены. Не только это будет необходимо для подготовки подвеска опухоли, но это также важно для выбора и создания кусочки опухоли печени имплантации. Демаркация между жизнеспособных опухоли и окружающих тканей мышц помечается на рисунке 4. Если образец неправильно ткани царапины во время подготовки подвеска, удастся распространения последующих задних конечностей. Если это происходит во время печеночная имплантации, рост опухоли в печени не произойдет. Это не будет очевидным до ангиографии.
Во время процесса печеночная имплантации следует позаботиться при приближении к левой доли печени. Зачастую если печень является очевидной при вводе брюшины, это на самом деле медиальной лепесток печени, что операторы наблюдения. Имплантация в медиальной лепесток печени представляет несколько вопросов для ангиографического использования. Во-первых, медиальной лоб анатомические взаимоотношения с позвоночника. Медиальной лоб опухоли часто быть запутывание позвоночника на рентгеноскопии, затрудняет лечение опухоли и подтверждение. Кроме того гастродуоденальная артерии ассоциируется чаще с сосудистую поставок медиальной лоб. Это увеличивает риск непромысловых эмболизации кишечник и может потенциально привести к ишемии кишечника/миокарда и возможной смерти животного. Как отмечалось ранее, это не будет квалифицироваться как провал; Однако это требуют больше ухода во время визуализации и лечения.
Последний важный шаг является успешной и стабильной бедренной артерии доступа. Как видно на рисунке 12, бедренная артерия должна быть изолированы на вершине дескриптор лезвие скальпеля. Хотя это делается главным образом разрешить исследователь более точно выполнять технику Seldinger20, она должна поддерживаться на протяжении всей процедуры. Это потому, что удаление скальпелем ручка после того, как оболочка была введена может вызвать непреднамеренные движения оболочки в сосудистую, ведущих к оболочка окклюзии и возможного повреждения сосудистую и окружающие структуры. Если оболочка становится выбили во время процедуры, применять давление в бедренной groove, проксимальной сайт доступ для того, чтобы остановить кровотечение и артерии затем может быть лигируют. Не пытайтесь вставить в ножнах. Исследователь может попытаться получить доступ из контралатеральной бедренной артерии.
Платформа VX2 надежную модель во время текущего использования для трансляционного исследования относительно КЦУК, он имеет соответствующие недостатки. Основной недостаток этой модели является, что ее состояние болезни не имитировать что человека КЦУК. Опухоли индуцированные патологически не похож на человека КЦУК не является не цирротической печени Паренхиматозный микроокружения. Кроме того опухоль VX2 показывает существенные внутренние некроза, который исключает эту модель от использования для исследования эффективности лечения. Некоторые альтернативные модели включают в себя грызунов модели таких мышей, крыс и сурки или больше животных моделей, таких как свиньи и приматов. 16 , 21 все эти альтернативы предоставляют различные преимущества и недостатки; Однако по мнению авторов, ангиографические использования и эффективность затрат, для VX2 кролика остается доминирующим.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Работа, изображенные в этом докладе было поддержано исследовательский грант от ООО Guerbet.
Acknowledgments
Мы хотели бы признать ветеринарного персонала в университете Иллинойс - Чикаго, биологических ресурсов лаборатории.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| MethoCult (Methycellulose) | Stemcell Technologies | M3134 | |
| VX2 Cell Line | NCI | VX-2 | |
| 5 mL Syringe | BD | 309646 | |
| 16 G Needle | BD | 305197 | |
| 22 G Needle | BD | 305155 | |
| Hair Clippers | Wahl | 41870-0438 | |
| Foam Insulated Box | Mr. Box Online | 10 x 10 x 4 | |
| Acepromazine | Henry Schein | 003845 | |
| Buprenorphine | Par | 42023-179-05 | |
| Meloxicam | Henry Schein | 049755 | |
| Alcohol Pads | Covidien | 5033 | |
| Ketamine | Henry Schein | 056344 | |
| Xylazine | Akorn | 59399-110-20 | |
| Pentobarbital (Fatal-Plus) | Vortech | 9373 | |
| Sterile Petri Dish | Thermo Fisher | 172931 | |
| DMEM | Gibco | 11965092 | |
| Saline | Baxter | 2F7124 | |
| 15-Blade | Steris | 02-050-015 | |
| Scalpel Handle x 2 | Steris | 22-2381 | |
| Curved Hemostat | WPI | 501288 | |
| Atraumatic Forceps | Sklar | 52-5077 | |
| Gauze | Medline | NON21430LF | |
| 11-Blade | Steris | 02-050-011 | |
| Surgicel | Ethicon | 1951 | |
| 3-0 PDS / Taper | Ethicon | Z305H | |
| 4 - 0 Vicryl / Cutting | Ethicon | J392H | |
| 40 μm strainer | BD | 352340 | |
| 50 mL conical tube | Thermo Fisher | 339652 | |
| plastic pipette | Thomas Scientific | HS206371B | |
| Centrifuge | Sorvall | 75004240 | |
| 1.40 mL Tubes (Internal Thread) | Micronic | MP32131-Z20 | |
| 3-F VSI Micro-HV Introducer Kit | Vascular Solutions | Custom Order (P15180391) | |
| .018 45° angle glidewire | Terumo | RG*GA1818SA | |
| Direxion bern-shape microcatheter | Boston Scientific | M001195230 | |
| Omnipaque | GE | Y510 |
References
- Rous, P., Beard, J. W. The Progression To Carcinoma of Virus-Induced Rabbit Papillomas (Shope). The Journal of Experimental Medicine. 62 (4), 523-548 (1935).
- Kidd, J. G., Rous, P. A transplantable rabbit carcinoma originating in a virus-induced papilloma and containing the virus in masked or altered form. The Journal of Experimental Medicine. 71 (6), 813-838 (1940).
- Galasko, C. S. B., Muckle, D. S.
- Maruyama, H., et al. Sonographic shift of hypervascular liver tumor on blood pool harmonic images with definity: Time-related changes of contrast-enhanced appearance in rabbit VX2 tumor under extra-low acoustic power. European Journal of Radiology. 56 (1), 60-65 (2005).
- Horkan, C., et al. Radiofrequency Ablation: Effect of Pharmacologic Modulation of Hepatic and Renal Blood Flow on Coagulation Diameter in a VX2 Tumor Model. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 15 (3), 269-274 (2004).
- Bimonte, S., et al. Induction of VX2 para-renal carcinoma in rabbits: generation of animal model for loco-regional treatments of solid tumors. Infectious Agents and Cancer. 11 (1), 1-8 (2016).
- Goldberg, S. N., Gazelle, G. S., Compton, C. C., Mueller, P. R., McLoud, T. C. Radio-frequency tissue ablation of VX2 tumor nodules in the rabbit lung. Academic Radiology. 3 (11), 929-935 (1996).
- Rhee, T. K., et al. Rabbit VX2 Tumors as an Animal Model of Uterine Fibroids and for Uterine Artery Embolization. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 18 (3), 411-418 (2007).
- Parvinian, A., Casadaban, L. C., Gaba, R. C. Development, growth, propagation, and angiographic utilization of the rabbit VX2 model of liver cancer: A pictorial primer and "how to" guide. Diagnostic and Interventional Radiology. 20 (4), 335-340 (2014).
- Xia, X., et al. Intra-arterial interleukin-12 gene delivery combined with chemoembolization: Anti-tumor effect in a rabbit hepatocellular carcinoma (HCC) model. Acta Radiologica. 54 (6), 684-689 (2013).
- Gaba, R. C., et al. Ethiodized oil uptake does not predict doxorubicin drug delivery after chemoembolization in VX2 liver tumors. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 23 (2), 265-273 (2012).
- Choi, Y. H., et al. Novel Intraarterial Therapy for Liver Cancer Using Ethylbromopyruvate Dissolved in an Iodized Oil. Academic Radiology. 18 (4), 471-478 (2011).
- Ma, H. L., Xu, Y. F., Qi, X. R., Maitani, Y., Nagai, T. Superparamagnetic iron oxide nanoparticles stabilized by alginate: Pharmacokinetics, tissue distribution, and applications in detecting liver cancers. International Journal of Pharmaceutics. 354 (1-2), 217-226 (2008).
- Wang, D., et al. Liver tumors: Monitoring embolization in rabbits with VX2 tumors -Transcatheter intraarterial first-pass perfusion MR imaging. Radiology. 245 (1), 130-139 (2007).
- Bimonte, S., et al. Radio-frequency ablation-based studies on VX2rabbit models for HCC treatment. Infectious Agents and Cancer. 11 (1), (2016).
- Gaba, R., Obeid, M., Khabbaz, R., Garcia, K., Schachtschneider, K. Translational Animal Models for Liver Cancer. American Journal of Interventional Radiology. 2 (2), 1-8 (2018).
- Kuszyk, B. S., et al. Local tumor recurrence following hepatic cryoablation: radiologic-histopathologic correlation in a rabbit model. Radiology. 217 (2), 477-486 (2000).
- Geschwind, J., et al. Chemoembolization of Liver Tumor in a Rabbit Model Assessment of Tumor Cell Death with Diffusion-Weighted MR Imaging and Histologic Analysis. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 11 (10), 1245-1255 (2000).
- Virmani, S., et al. Comparison of Two Different Methods for Inoculating VX2 Tumors in Rabbit Livers and Hind Limbs. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 19 (6), 931-936 (2008).
- Seldinger, S. I. Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography: A new technique. Acta Radiologica. 49 (SUPPL 434), 47-52 (2008).
- Schook, L. B., et al. A genetic porcine model of cancer. PLoS One. 10 (7), e0128864 (2015).
