Summary

طرق لاختبار اضطراب الغدد الصماء في الميلانوجاستر Drosophila

Published: July 03, 2019
doi:

Summary

وتمثل المواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء مشكلة خطيرة بالنسبة للكائنات الحية والبيئات الطبيعية. Drosophila الميلانوغاستر يمثل نموذجا مثاليا لدراسة آثار EDC في الجسم الحي. هنا، نقدم أساليب للتحقيق في اضطراب الغدد الصماء في Drosophila، ومعالجة آثار EDC على الخصوبة والخصوبة وتوقيت النمو، وعمر الذبابة.

Abstract

في السنوات الأخيرة كانت هناك أدلة متزايدة على أن جميع الكائنات الحية والبيئة تتعرض للمواد الكيميائية الشبيهة بالهرمونات، والمعروفة باسم المواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء (EDCs). وقد تغير هذه المواد الكيميائية التوازن الطبيعي لأنظمة الغدد الصماء وتؤدي إلى آثار ضارة، فضلا عن زيادة عدد الاضطرابات الهرمونية في السكان أو اضطراب النمو وانخفاض التكاثر في أنواع الحياة البرية. وبالنسبة لبعض مراكز إدوْن، هناك آثار صحية موثقة وقيود على استخدامها. ومع ذلك، بالنسبة لمعظمهم، لا يوجد حتى الآن أي دليل علمي بهذا المعنى. من أجل التحقق من آثار الغدد الصماء المحتملة للمادة الكيميائية في الكائن الحي الكامل، ونحن بحاجة لاختباره في نظم النموذج المناسب، وكذلك في ذبابة الفاكهة، Drosophila الميلانوجاستر. هنا نبلغ مفصلة في بروتوكولات الجسم الحي لدراسة اضطراب الغدد الصماء في Drosophila, معالجة آثار EDC على الخصوبة / الخصوبة, توقيت النمو, وعمر الذبابة. في السنوات القليلة الماضية، استخدمنا هذه الصفات الحياة Drosophila للتحقيق في آثار التعرض ل17-α-ethinylestradiol (EE2)، بيسفينول A (BPA)، وبيسفينول التركيز البؤري التلقائي (BPA F). وإجمالاً، غطت هذه الفحوصات جميع مراحل حياة دروسوفيلا وجعلت من الممكن تقييم اضطراب الغدد الصماء في جميع العمليات التي يتم بوساطتها الهرمونات. وكانت اختبارات الخصوبة/الخصوبة وأوقات النمو مفيدة لقياس تأثير التكافؤ في الأداء على الأداء التناسلي للذبابة وعلى مراحل النمو، على التوالي. وأخيراً، انطوى التقييم العمري على التعرض المزمن للكبار للأشخاص البالغين وقياس نجاتهم. ومع ذلك، يمكن أيضا أن تتأثر هذه الصفات الحياة من قبل العديد من العوامل التجريبية التي كان لا بد من السيطرة عليها بعناية. لذلك، في هذا العمل، نقترح سلسلة من الإجراءات التي قمنا بتحسينها للنتيجة الصحيحة لهذه الاختبارات. وتسمح هذه الأساليب للعلماء بتحديد اضطراب الغدد الصماء لأي من مركبات نقص التغذية أو لخليط من مختلف مركبات التغذية المنسّكة في دروسسوفيلا، وإن كان من الضروري تحديد آلية الغدد الصماء المسؤولة عن هذا التأثير، إلى مزيد من المقالات.

Introduction

وقد تم إطلاق الأنشطة البشرية في البيئة كمية هائلة من المواد الكيميائية، التي تمثل مشكلة خطيرة للكائنات الحية والنظم الإيكولوجية الطبيعية1. ومن بين هذه الملوثات، يقدر أن نحو 000 1 مادة كيميائية مختلفة قد تغير التوازن الطبيعي لنظم الغدد الصماء؛ وفقا لهذه الخاصية، وهي تصنف على أنها المواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء (EDCs). على وجه التحديد، استنادا إلى تعريف حديث من قبل جمعية الغدد الصماء، وEDCs هي “مادة كيميائية خارجية، أو خليط من المواد الكيميائية، التي يمكن أن تتداخل مع أي جانب من جوانب العمل الهرموني”2. على مدى العقود الثلاثة الماضية، كان هناك أدلة علمية متزايدة على أن EDCs يمكن أن تؤثر على تكاثر وتطوير الحيوانات والنباتات3،4،5،6،7، 8. وعلاوة على ذلك، كان التعرض EDC يرتبط بزيادة انتشار بعض الأمراض البشرية، بما في ذلك السرطان والسمنة والسكري وأمراض الغدة الدرقية، والاضطرابات السلوكية9،10،11.

الآليات العامة لـ EDC

بسبب خصائصها الجزيئية، والممارسات غير القانونية يتصرفمثل الهرمونات أو السلائف هرمون 3، 10,11,12. في هذا المعنى, أنها يمكن ربط مستقبلات هرمون وتعطيل نظم الغدد الصماء إما عن طريق محاكاة النشاط الهرموني أو عن طريق منع الهرمونات الذاتية ملزمة. في الحالة الأولى, بعد ملزمة لمستقبلات, أنها يمكن تفعيلها كما يفعل هرمونها الطبيعي. في الحالة الأخرى، وملزمة من EDC إلى مستقبلات يمنع الربط من هرمونها الطبيعي، وبالتالي يتم حظر مستقبلات ولم يعد يمكن تفعيلها، حتى في وجود هرمونها الطبيعي3. ونتيجة لذلك، يمكن أن تؤثر على العديد من العمليات، مثل التوليف، وإفراز، والنقل، والتمثيل الغذائي، أو العمل المحيطي للهرمونات الذاتية المسؤولة عن الحفاظ على التوازن، والتكاثر، والتنمية، و / أو سلوك الكائن الحي. والربط بين المستقبلات ليس هو السبيل الوحيد للعمل الذي تم وصفه حتى الآن بالنسبة للمراكز المعنية بمكافحة الفلور والألغام. ومن الواضح الآن أنها يمكن أن تعمل أيضا عن طريق تجنيد coactivators أو corepressors في مسارات الأنزيمية أو عن طريق تعديل علامات جينية تحرير التعبير الجينيالجيني 10،11،12،13 ،14، مع عواقب ليس فقط للجيل الحالي ولكن أيضا لصحة الأجيال القادمة8.

هرمونات الدروفيلا

وقد تم دراسة الآثار المحتملة لنخبة من المركبات المنتَجة للمواد الضارة بالحيوانات البرية على نطاق واسع، سواء في أنواع الأحياء البرية أو في عدة نظم نموذجية تكون فيها آليات الغدد الصماء معروفة جيداً إلى حد معقول. أما بالنسبة لللافقاريات، فقد تم وصف نظم الغدد الصماء التي تؤثر على النمو والتنمية والتكاثر على نطاق واسع في الحشرات لعدة أسباب، بما في ذلك استخدامها على نطاق واسع في مجال البحوث البيولوجية، وأهميتها الاقتصادية، و أخيرا تطوير المبيدات الحشرية قادرة على التدخل على وجه التحديد مع نظام هرمون الآفات.

على وجه الخصوص ، بين الحشرات ، ثبت أن ذبابة الفاكهة D. melanogaster نظام نموذجي قوي جدا لتقييم الآثار المحتملة لالغدد الصماء من EDCs. في D. الميلانوجاستر, وكذلك في الفقاريات, الهرمونات تلعب دورا هاما طوال دورة الحياة بأكملها. في هذا الكائن الحي، وهناك ثلاثة نظم الهرمونية الرئيسية، والتي تنطوي على هرمون الستيرويد 20-هيدروكسيكديسون (20E)15،16، وهرمون الأحداث sesquiterpenoid (JH)17، والببتيدات العصبية والببتيد / البروتين الهرمونات18. تتكون هذه المجموعة الثالثة من العديد من الببتيدات التي تم اكتشافها في الآونة الأخيرة ولكن تشارك بوضوح في مجموعة كبيرة من العمليات الفسيولوجية والسلوكية، مثل طول العمر، التوازن، التمثيل الغذائي، والإنجاب، والذاكرة، والتحكم في الحركة. 20E هو متجانسة لهرمونات الستيرويد المشتقة من الكولسترول مثل استراديول, في حين JH تشترك في بعض أوجه التشابه مع حمض الريتينويك; كلاهما الهرمونات المعروفة في Drosophila19,20. توازنها أمر حيوي في تنسيق الصهر والتحوّل، وكذلك في السيطرة على العديد من العمليات ما بعد النمو، مثل التكاثر، والعمر، والسلوك21،وبالتالي توفير إمكانيات مختلفة لاختبار الغدد الصماء اضطراب في Drosophila. وعلاوة على ذلك، فإن هرمونات الإيكوستيرويد وJHs هي الأهداف الرئيسية لما يسمى بالمبيدات الحشرية من الجيل الثالث، والتي تم تطويرها للتدخل في العمليات التنموية والإنجابية بوساطة الغدد الصماء في الحشرات. وطريقة عمل هذه المواد الكيميائية من الناهض أو الخصم معروفة جيدا، وبالتالي يمكن أن تكون بمثابة معايير مرجعية لتقييم آثار الـ EDCs المحتملة على نمو الحشرات وتكاثرها وتطويرها22. على سبيل المثال ، الميثوبرين ، الذي تم استخدامه على نطاق واسع في السيطرة على البعوض والحشرات المائية الأخرى23،24، يعمل كناهض JH وتقوّق نسخ الجينات الناجم عن 20E والتحوّل.

بالإضافة إلى الهرمونات, مستقبلات النووية (NR) الأسرة الفائقة في Drosophila هو أيضا معروفة جيدا; وهو يتألف من 18 عوامل النسخ المحفوظة تطوريا المشاركة في السيطرة على مسارات النمو المعتمدة على هرمون، فضلا عن التكاثر وعلم وظائف الأعضاء25. هذه الهرمونات NRs تنتمي إلى جميع الأنواع الفرعية NR ستة, بما في ذلك تلك التي تشارك في الإرسال العصبي26, اثنان لحمض الريتينويك روبية, وتلك لNRs الستيرويد التي, في الفقاريات, تمثل واحدة من الأهداف الأساسية لـ EDCs27.

Drosophila كنظام نموذجي لدراسة EDCs

وفي الوقت الراهن، تقوم عدة وكالات بيئية في جميع أنحاء العالم، على أساس الخصائص الجزيئية، بإسناد إمكانية التدخل في نظم الغدد الصماء إلى مختلف المواد الكيميائية من صنع الإنسان. ونظرا لأن هذه المراكز هي مشكلة عالمية وشاملة بالنسبة للبيئة وللكائنات الحية، فإن الهدف العام للبحوث في هذا المجال هو تخفيف عبء الأمراض التي تتحملها، فضلا عن حماية الكائنات الحية من آثارها الضارة. من أجل تعميق فهم الآثار المحتملة لالغدد الصماء من مادة كيميائية، فمن الضروري لاختباره في الجسم الحي. ولهذه الغاية، يمثل د. ميلانوجاستر نظاماً نموذجياً صالحاً. وحتى الآن، استخدمت ذبابة الفاكهة على نطاق واسع في نموذج الحي الحي لتقييم آثار العديد من الـEDCs البيئية؛ وقد أفيد أن التعرض للعديد من مركبات الميتاليك الهيدرولية، مثل ثنائي بوتيل الفثالات (DBP)28، البيسفينول A (BPA)، 4-nonylphenol (4-NP)، 4-tert-octylphenol (4-tert-OP)29، ميثيل بارابين (MP)30، إيثيل بارابين (EP)31، 32، bis-(2-ethylhexyl) الفثالات (DEHP)33، و 17-α-ethinylestradiol (EE2)34، يؤثر على وظائف التمثيل الغذائي والغدد الصماء كما هو الحال في نماذج الفقاريات. وقد أدت عدة أسباب إلى استخدامه كنموذج في هذا المجال من البحث. بالإضافة إلى المعرفة الممتازة بنظم الغدد الصماء، تشمل المزايا الأخرى دورة حياتها القصيرة، والتكلفة المنخفضة، والجينوم القابل للنبض بسهولة، وتاريخ طويل من البحث، والعديد من الإمكانيات التقنية (انظر موقع FlyBase على الويب، http://flybase.org/). كما يوفر د. ميلانوجاستر نموذجاً قوياً لدراسة الآثار عبر الأجيال والاستجابات السكانية للعوامل البيئية8 بسهولة، ويتجنب القضايا الأخلاقية ذات الصلة بالدراسات الحية في الحيوانات الأعلى. وبالإضافة إلى ذلك، فإن ذبابة الفاكهة تشترك في درجة عالية من الحفاظ على الجينات مع البشر مما قد يجعل من الممكن لفحوصات Drosophila EDC للمساعدة في التنبؤ أو اقتراح الآثار المحتملة لهذه المواد الكيميائية على صحة الإنسان. وإلى جانب توسيع نطاق فهم الآثار على صحة الإنسان، يمكن أن تساعد Drosophila في تقييم مخاطر التعرض لـ EDC للبيئة، مثل فقدان التنوع البيولوجي والتدهور البيئي. وأخيراً، فإن ذبابة الفاكهة توفر ميزة إضافية تتمثل في استخدامها في المختبرات، حيث يمكن إبقاء العوامل التي يحتمل أن تؤثر على تطورها وتكاثرها وعمرها تحت السيطرة من أجل عزو أي اختلاف إلى المادة التي يتعين اختبارها.

مع هذا في الاعتبار، قمنا بتحسين اختبارات اللياقة البدنية بسيطة وقوية لتحديد آثار EDC على بعض الصفات الهرمونية Drosophila، مثل الخصوبة / الخصوبة، وتوقيت النمو، وعمر الكبار. وقد استخدمت هذه الاختبارات على نطاق واسع لبعض EDCs23،24،25،26،27. على وجه الخصوص, لقد استخدمنا البروتوكولات التالية لتقييم آثار التعرض لهرمون الاستروجين الاصطناعية EE234 وBPA وإلى التركيز البؤري التلقائي البيسفينول (BPA F) (بيانات غير منشورة). ويمكن تعديل هذه البروتوكولات بسهولة للتحقيق في آثار EDC معينة في وقت واحد، فضلا عن الآثار مجتمعة من EDCs متعددة في D. melanogaster.

Protocol

1. إعداد الطعام لمخزون صيانة وليرقات حالة نموّ, إستعمال [كرنميل] متوسّطة يحتوي 3% مسحوق خميرة, 10% [سكروس], 9% [بركوكد] دقيق الذرة, 0.4% [أغر], بعد ذلك يدعى [كورنميل] وسط ([كم]). ضع 30 غرام من الخميرة في 100 مل من ماء الصنبور، واتركه يغلي لمدة 15 دقيقة. بشكل منفصل، اخلطي جيداً 90 غرام…

Representative Results

في هذا القسم، يتم الإبلاغ عن الخطوات الرئيسية للبروتوكولات المذكورة أعلاه في شكل مخططات مبسطة. وبالنظر إلى أن الذباب تميل إلى تجنب المركبات غير مستساغة, أول شيء القيام به هو أن نحسب طعم EDC مختارة. ويمكن القيام بذلك عن طريق خلط تلوين الطعام (على سبيل المثال، أحمر الغذاء صبغ رقم 40)35</…

Discussion

وقد استخدمت ذبابة الفاكهة D. melanogaster على نطاق واسع كنظام نموذج في الجسم الحي للتحقيق في الآثار المحتملة للنظم البيئية مثل DBP28،BPA، 4-NP، 4-tert-OP29،MP30،EP31، 32،DEHP33،وEE234. وقد أدت عدة أسباب استخدامه ك…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

ويشكر المؤلفون أوسورسولينا بيتيلو على الدعم التقني. ويشكر المؤلفان الدكتورة مارياروساريا أليتا (CNR) على الدعم الببليوغرافي. ويشكر المؤلفون الدكتور غوستافو داميانو ميتا على تقديمهم إلى عالم مركز إدو. ويشكر المؤلفان لايكا ميكروسيستمز وباسكوال رومانو على مساعدتهما. تم دعم هذا البحث من قبل مشروع PON03PE_00110_1. “Sviluppo di nanotecnologie Orientate alla Rigenerazione e Ricostruzione Tissutale, Implantologia e Sensoristica in Odontoiatria/oculistica” acronimo “SORRISO”; الالتزام: PO FESR 2014-2020 كامبانيا; مشروع PO FESR كامبانيا 2007-2013 “NANOTECNOLOGIE بير IL RILASCIO CONTROLLATO DI MOLECOLE النانوتكنولوجي الحيوي ATTIVE.

Materials

17α-Ethinylestradiol Sigma E4876-1G
Agar for Drosophila medium BIOSIGMA 789148
Bisphenol A Sigma 239658-50G
Bisphenol AF Sigma 90477-100MG
Cornmeal CA' BIANCA
Diethyl ether Sigma
Drosophila Vials BIOSIGMA 789008 25×95 mm
Drosophila Vials BIOSIGMA 789009 29×95 mm
Drosophila Vials Kaltek 187 22X63
Embryo collection cage Crafts Plexiglass cylinder (12,5 x7 cm) with an open end and the other end closed by a rectangular base in which a slot allows the insertion of special trays for laying
Ethanol FLUKA 2860
Etherizer Crafts cylindrical glass container with a cotton plug
Glass Bottle 250mL Bottles
Glass Vials Microtech ST 10024 FLAT BOTTOM TUBE 100X24
Hand blender Pimmy Ariete food processor
Instant Success yeast ESKA Powdered yeast
Laying tray Crafts plexiglass trays (11 x 2,6 cm) in wich to pour medium for laying
Methyl4-hydroxybenzoate SIGMA H5501
Petri Dish Falcon 351016 60×5
Red dye no. 40 SIGMA 16035
Stereomicroscope with LED lights Leica S4E
Sucrose HIMEDIA MB025
Tomato sauce Cirio

References

  1. Kareiva, P. M., Marvier, M., Kareiva, P. M., Marvier, M. Managing fresh water for people and nature. Conservation Science: Balancing the Needs of People and Nature. , 460-509 (2011).
  2. Zoeller, R. T., et al. Endocrine-disrupting chemicals and public health protection: a statement of principles from The Endocrine Society. Endocrinology. 153 (9), 4097-4110 (2012).
  3. Guillette, J., Gunderson, M. P. Alterations in development of reproductive and endocrine systems of wildlife populations exposed to endocrine-disrupting contaminants. Reproduction. 122, 857-864 (2001).
  4. Guillette, L. J. Endocrine disrupting contaminants-beyond the dogma. Environmental Health Perspectives. 114, 9-12 (2006).
  5. Liao, C. S., Yen, J. H., Wang, Y. S. Growth inhibition in Chinese cabbage (Brassica rapa var. chinensis) growth exposed to di-n-butyl phthalate. Journal of Hazardous Materials. 163, 625-631 (2009).
  6. Qiu, Z., Wang, L., Zhou, Q. Effects of Bisphenol A on growth, photosynthesis and chlorophyll fluorescence in above-ground organs of soybean seedlings. Chemosphere. 90, 1274-1280 (2013).
  7. Wang, S., et al. Effects of Bisphenol A, an environmental endocrine disruptor, on the endogenous hormones of plants. Environmental Science and Pollution Research. 22, 17653-17662 (2015).
  8. Quesada-Calderón, S., et al. The multigenerational effects of water contamination and endocrine disrupting chemicals on the fitness of Drosophila melanogaster. Ecology and Evolution. 7, 6519-6526 (2017).
  9. Bergman, A., Heindel, J., Jobling, S., Kidd, K., Zoeller, R. . The State of the Science of Endocrine Disrupting Chemicals – 2012. , (2013).
  10. Bachega, T. A. S. S., Verreschi, I. T., Frade, E. M. C., D’Abronzo, F. H., Lazaretti-Castro, M. The environmental endocrine disruptors must receive the attention of Brazilian endocrinologists. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia. 55, 175-176 (2011).
  11. Schug, T. T., Janesick, A., Blumberg, B., Heindel, J. J. Endocrine disrupting chemicals and disease susceptibility. Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. 127, 204-215 (2011).
  12. Lee, S. B., Choi, J. Effects of Bisphenol A and Ethynyl estradiol exposure on enzyme activities, growth and development in the fourth instar larvae of Chironomus riparius (Diptera, Chironomidae). Ecotoxicology and Environmental Safety. 68, 84-90 (2007).
  13. Vos, J. G., et al. Health effects of endocrine-disrupting chemicals on wildlife, with special reference to the European situation. Critical Reviews in Toxicology. 20, 71-133 (2000).
  14. Costa, E. M. F., Spritzer, P. M., Hohl, A., Bachega, T. A. S. S. Effects of endocrine disruptors in the development of the female reproductive tract. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia. 58 (2), 153-161 (2014).
  15. Thummel, C. S. From embryogenesis to metamorphosis: the regulation and function of Drosophila nuclear receptor superfamily members. Cell. 83, 871-877 (1995).
  16. Schwedes, C. C., Carney, G. E. Ecdysone signaling in adult Drosophila melanogaster. Journal of Insect Physiology. 58, 293-302 (2012).
  17. Flatt, T., Kawecki, T. J. Pleiotropic effects of methoprene-tolerant (Met), a gene involved in juvenile hormone metabolism, on life history traits in Drosophila melanogaster. Genetica. 122, 141-160 (2004).
  18. Nassel, D. R., Winther, A. M. E. Drosophila neuropeptides in regulation of physiology and behavior. Progress in Neurobiology. 92, 42-104 (2010).
  19. Truman, J. W., Riddiford, L. M. Endocrine insights into the evolution of metamorphosis in insects. Annual Review of Entomology. 47, 467-500 (2002).
  20. Gáliková, M., Klepsatel, P., Senti, G., Flatt, T. Steroid hormone regulation of C. elegans and Drosophila aging and life history. Experimental Gerontology. 46, 141-147 (2011).
  21. Kozlova, T., Thummel, C. S. Steroid regulation of postembryonic development and reproduction in Drosophila. Trends in Endocrinology & Metabolism. 11, 276-280 (2000).
  22. Weltje, L., Matthiessen, P. Techniques for Measuring Endocrine Disruption in Insects. Endocrine Disrupters: Hazard Testing and Assessment Methods. , 100-115 (2013).
  23. Zou, Z., et al. Juvenile hormone and its receptor, methoprene-tolerant, control the dynamics of mosquito gene expression. Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (24), E2173-E2181 (2013).
  24. Zhao, W. L., et al. Methoprene-tolerant 1 regulates gene transcription to maintain insect larval status. Journal of Molecular Endocrinology. 53 (1), 93-104 (2014).
  25. Mangelsdorf, D. J., et al. The nuclear receptor superfamily: the second decade. Cell. 83, 835-839 (1995).
  26. Riddiford, L. M., Bate, M., Martinez Arias, A. Hormones and Drosophila development. The Development of Drosophila melanogaster. , 899-939 (1993).
  27. Watts, M. M., Pascoe, D., Carroll, K. Chronic exposure to 17a-ethinylestradiol and bisphenol A-effects on development and reproduction in the freshwater invertebrate Chironomus riparius (Diptera: chironomidae). Aquatic Toxicology. 55, 113-124 (2001).
  28. Atli, E. The effects of dibutyl phthalate (DBP) on the development and fecundity of Drosophila melanogaster. Drosophila Information Service. 93, 164-171 (2010).
  29. Atli, E. The effects of three selected endocrine disrupting chemicals on the fecundity of fruit fly, Drosophila melanogaster. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology. 9, 433-437 (2013).
  30. Gu, W., Xie, D. J., Hou, X. W. Toxicity and estrogen effects of methylparaben on Drosophila melanogaster. Food Science. 30, 252-254 (2009).
  31. Liu, T., Li, Y., Zhao, X., Zhang, M., Gu, W. Ethylparaben affects lifespan, fecundity, and the expression levels of ERR, EcR and YPR in Drosophila melanogaster. Journal of Insect Physiology. 71, 1-7 (2014).
  32. Chen, Q., Pan, C., Li, Y., Zhang, M., Gu, W. The Combined Effect of Methyl- and Ethyl-Paraben on Lifespan and Preadult Development Period of Drosophila melanogaster (Diptera: Drosophilidae). Journal of Insect Science. 16 (1), 1-8 (2016).
  33. Cao, H., Wiemerslage, L., Marttila, P. S., Williams, M. J., Schioth, H. B. Bis-(2-ethylhexyl) Phthalate Increases Insulin Expression and Lipid Levels in Drosophila melanogaster. Basic & Clinical Pharmacology & Toxicology. 119, 309-316 (2016).
  34. Bovier, T. F., Rossi, S., Mita, D. G., Digilio, F. A. Effects of the synthetic estrogen 17-α-ethinylestradiol on Drosophila T melanogaster: Dose and gender dependence. Ecotoxicology and Environmental Safety. 162, 625-632 (2018).
  35. Tanimura, T., Isono, K., Takamura, T., Shimada, I. Genetic dimorphism in the taste sensitivity to trehalose in Drosophila melanogaster. Journal of Comparative Physiology. 147, 433-437 (1982).
  36. Vandenberg, L. N., et al. Hormones and endocrine-disrupting chemicals: low-dose effects and non- monotonic dose responses. Endocrine Reviews. 33, 378-455 (2012).
  37. Abolaji, A. O., Kamdem, J. P., Farombi, E. O., Rocha, J. B. T. Mini Review: Drosophila melanogaster as a Promising Model Organism in Toxicological Studies. Archives of Basic and Applied. 1, 33-38 (2013).
  38. Yesilada, E. Genotoxic Activity of Vinasse and Its Effect on Fecundity and Longevity of Drosophila melanogaster. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology. 63, 560-566 (1999).
  39. Atli, E., Ünlü, H. The effects of microwave frequency electromagnetic fields on the fecundity of Drosophila melanogaster. Turkish Journal of Biology. 31, 1-5 (2007).
  40. Flatt, T., Tu, M., Tatar, M. Hormonal pleiotropy and the juvenile hormone regulation of Drosophila development and life history. BioEssays. 27, 999-1010 (2005).
  41. Rand, M. D., Montgomery, S. L., Prince, L., Vorojeikina, D. Developmental Toxicity Assays Using the Drosophila Model. Current Protocols in Toxicology. 59, 1-27 (2015).
  42. Fletcher, J. C., Burtis, K. C., Hogness, D. S., Thummel, C. S. The Drosophila E74 gene is required for metamorphosis and plays a role in the polytene chromosome puffing response to ecdysone. Development. 121, 1455-1465 (1995).
  43. Giordano, E., Peluso, I., Senger, S., Furia, M. minifly, A Drosophila Gene Required for Ribosome Biogenesis. The Journal of Cell Biology. 144 (6), 1123-1133 (1999).
  44. Tower, J., Arbeitman, M. The genetics of gender and life span. The Journal of Biology. 8, 38 (2009).
  45. Digilio, F. A., et al. Quality-based model for Life Sciences research guidelines. Accreditation and Quality Assurance. 21, 221-230 (2016).
  46. Sorensen, J. G., Loeschcke, V. Larval crowding in Drosophila melanogaster induces Hsp70 expression, and leads to increased adult longevity and adult thermal stress resistance. Journal of Insect Physiology. 47, 1301-1307 (2001).
  47. Linford, N. J., Bilgir, C., Ro, J., Pletcher, S. D. Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster. Journal of Visualized Experiments. (71), e50068 (2013).
  48. Weltje He, Y., Jasper, H. Studying aging in Drosophila. Methods. 68, 129-133 (2014).

Play Video

Cite This Article
Bovier, T. F., Cavaliere, D., Colombo, M., Peluso, G., Giordano, E., Digilio, F. A. Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (149), e59535, doi:10.3791/59535 (2019).

View Video