פרוטוקול זה מתאר את השלבים ליצירת מודל ארנב עם שתי מפרצות מעוכלות באלסטאז עם המודינמיקה שונה (קבוצת הכוכבים גדם וביפורקציה). זה מאפשר בדיקה של התקנים אנדווסקולריים חדשניים במפרצות עם אנגיוארכיטקטורה שונה ותנאים המודינמיים בתוך חיה אחת.
מודלים פרה-קליניים של בעלי חיים עם מאפיינים המודינמיים, מורפולוגיים והיסטולוגיים הקרובים למפרצות תוך גולגולתיות אנושיות ממלאים תפקיד מפתח בהבנת התהליכים הפתופיזיולוגיים ובפיתוח ובדיקה של אסטרטגיות טיפוליות חדשות. מחקר זה נועד לתאר מודל חדש של מפרצת ארנב המאפשר יצירת שתי מפרצות סקולריות מעוכלות באלסטאז עם תנאים המודינמיים שונים בתוך אותה חיה.
חמש נקבות ארנבות לבנות מניו זילנד במשקל ממוצע של 4.0 (± 0.3) ק”ג וגיל ממוצע של 25 (±5) שבועות עברו יצירת גדם מיקרו-כירורגי ומפרצת ביפורקציה. מפרצת אחת (גדם) נוצרה על ידי חשיפה לעורק הצוואר המשותף הימני (CCA) במקורו בגזע הברכיוצפלי. קליפ זמני הוחל במקור CCA ועוד אחד, 2 ס”מ מעל. קטע זה טופל בזריקה מקומית של 100 U של אלסטאז למשך 20 דקות. מפרצת שנייה (bifurcation) נוצרה על ידי תפירת שקיק עורקי שטופל באלסטאז לתוך האנסטומוזיס מקצה לצד של CCA הימני ל-CCA השמאלי. הפטריות נשלטה על ידי אנגיוגרפיה פלואורסצנטית מיד לאחר הבריאה.
משך הניתוח הממוצע היה 221 דק׳. יצירת שתי מפרצות באותה חיה הצליחה בכל הארנבונים ללא סיבוך. כל המפרצות נרשמו כפטנט מיד לאחר הניתוח למעט מפרצת ביפורקציה אחת, שהראתה תגובה רקמתית קיצונית עקב דגירה של אלסטאז ופקקת אינטראלומינלית מיידית. לא נצפתה תמותה במהלך הניתוח ומעקב של עד חודש. התחלואה הוגבלה לתסמונת שיווי משקל חולפת (ארנב אחד), שהתאוששה באופן ספונטני תוך יום אחד.
הודגם כאן לראשונה היתכנות של יצירת מודל ארנב שתי מפרצת עם מאפיינים המודינמיים של גדם וביפורקציה ותנאי קיר מנוונים מאוד. מודל זה מאפשר לחקור את הקורס הטבעי ואסטרטגיות טיפול פוטנציאליות על בסיס ביולוגיה של מפרצת בתנאי זרימה שונים.
מפרצת תוך גולגולתית היא מצב חמור עם שיעור תמותה לאחר קרע המגיע ל -50% ונכות ארוכת טווח אצל 10-20% מהחולים1. בעשור האחרון חלה התפתחות מהירה של אפשרויות טיפול אנדווסקולריות, אך יחד עם זאת, גם קצב הולך וגדל של הישנות עם עד 33% של recanalization מפרצת לאחר סליל 2,3. כדי להבין טוב יותר את הפתופיזיולוגיה העומדת בבסיס חסימה של מפרצת ו recanalization, כמו גם לפיתוח ובדיקה של התקנים אנדווסקולריים חדשים, יש כיום צורך במודלים פרה-קליניים אמינים אשר המאפיינים ההמודינמיים, המורפולוגיים וההיסטולוגיים שלהם מחקים את אלה של מפרצות תוך גולגולתיות אנושיות 4,5,6 . נכון להיום, אין מודל מוגדר כסטנדרט לניסויים פרה-קליניים, ומגוון גדול של מינים וטכניקות זמינים לחוקרים 7,8.
עם זאת, הארנב הוא מין בעל עניין מיוחד בשל גודלו ודמיון המודינמי בין עורקי הצוואר שלו לבין כלי הדם המוחיים האנושיים, כמו גם פרופילי הקרישה והתרומבוליזה הדומים שלו. מספר דגמים עם מפרצות סקולריות מעוכלות באלסטאז בעורקי הצוואר המשותפים (CCAs) הראו דמיון איכותי וכמותי עם מפרצות תוך גולגולתיות אנושיות במונחים של תנאי זרימה, תכונות גיאומטריות ומאפייני דופן 9,10,11,12. מחקר זה נועד לתאר טכניקה ליצירת מודל חדש של מפרצת ארנבת עם מפרצות מעוכלות בגדם ובשני אלסטאז דו-ספרתיים באותה חיה. הטכניקות הכירורגיות שואבות השראה מאלו של Hoh et al.13 ו- Wanderer et al.14 עם שינויים קלים כדי לספק סטנדרטיזציה טובה ושכפול ולהבטיח תמותה ותחלואה נמוכות.
הטכניקה הנפוצה ביותר ליצירת מפרצת כוללת יצירת מפרצת גדם במקור של CCA הימני, או באמצעות שיטה פתוחה או אנדווסקולרית. המודל אומת כמפרצת יציבה שאינה צומחת ונשארת פתוחה עם הזמן20,21. הטכניקה השנייה האפשרית כוללת יצירה מיקרו-כירורגית של מפרצת ביפורקציה עורקית על יד?…
The authors have nothing to disclose.
המחברים מודים לפרופ’ הנס רודולף וידמר, לד”ר לוקה רמונדה ולפרופ’ חוויאר פנדינו על תמיכתם המדעית ותרומתם הטכנית לעבודה זו. תודה מיוחדת לאולג’יקה בסלק על עצתה במהלך ההליכים ולקיי נטלבק על עזרתו. יתר על כן, אנו מודים לדניאלה קזוני DVM, PhD ו- med. וטרינר. לואיסנה גרסיה, PD ד”ר אלסנדרה ברגדאנו וד”ר קרלוטה דטוטו על תמיכתם הווטרינרית המסורה.
4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP292ZH | |
4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP304H | |
6-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
9-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
Adrenaline | Amino AG | 1445419 | any generic |
Amiodarone | Helvepharm AG | 5078567 | any generic |
Anesthesia machine | Dräger | any other | |
Aspirin | Sanofi-Aventis (Suisse) SA | 622693 | any generic |
Atropine | Labatec Pharma SA | 6577083 | any generic |
Bandpass filter blue | Thorlabs | FD1B | any other |
Bandpass filter green | Thorlabs | FGV9 | any other |
Biemer vessel clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FD560R | any other |
Bipolar forceps | any other | ||
Bispectral index (neonatal) | any other | ||
Blood pressure cuff (neonatal) | any other | ||
Bycilces spotlight | any other | ||
Clamoxyl | GlaxoSmithKline AG | 758808 | any generic |
Dexmedetomidine | Ever Pharma | 136740-1 | any generic |
Elastase | Sigma Aldrich | E7885 | |
Electrocardiogram electrodes | |||
Ephedrine | Amino AG | 1435734 | |
Esmolol | OrPha Swiss GmbH | 3284044 | |
Fentanyl (intravenous use) | Janssen-Cilag AG | 98683 | |
Fentanyl (transdermal) | Mepha Pharma AG | 4008286 | |
Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | |
Fragmin | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 1906725 | |
Heating pad or heating forced-air warming system | |||
Isotonic sodium chloride solution (0.9%) | Fresenius KABI | 336769 | |
Ketamine | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 342261 | |
lid retractor | Approach | ||
Lidocaine | Streuli Pharma AG | 747466 | |
Longuettes | |||
Metacam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | Medication |
Methadone | Streuli Pharma AG | 1084546 | Sedaton |
Micro-forceps curved | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-015-15 | |
Micro-forceps straight 2x | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-010-15 | |
Microscissors | Ulrich Swiss , Switzerland | U52-327-15 | |
Midazolam | Accord Healthcare AG | 7752484 | |
Needle 23 G | arteriotomy | ||
Needle holder | |||
O2-Face mask | |||
Operation microscope | Wild Heerbrugg | ||
Papaverin | Bichsel | topical application | |
Povidone iodine | Mundipharma Medical Company | any generic | |
Prilocaine-lidocaine creme | Emla | ||
Propofol | B. Braun Medical AG, Switzerland | General anesthesia | |
Pulse oxymeter | |||
Rectal temperature probe (neonatal) | |||
Ringer Lactate | Bioren Sintetica SA | Infusion | |
Ropivacain | Aspen Pharma Schweiz GmbH | 1882249 | Local anesthesia |
Scalpell | Swann-Morton | 210 | |
Small animal shaver | |||
Soft tissue forceps | |||
Soft tissue spreader | |||
Stainless steel sponge bowls | |||
Sterile micro swabs | |||
Stethoscope | |||
Surgery drape | |||
Surgical scissors | |||
Syringes 1 mL, 2 mL, and 5 mL | |||
Tris-Buffer | Sigma Aldrich | 93302 | Elastase solution |
Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
Vein and arterial catheter 22 G | |||
vessel loop | Approach | ||
video camera or smartphone | |||
Vitarubin | Streuli Pharma AG | 6847559 | |
Yasargil titan standard clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T |