Этот протокол описывает этапы создания модели кролика с двумя переваренными эластазой аневризмами с различной гемодинамикой (пень и бифуркационное созвездие). Это позволяет тестировать новые эндоваскулярные устройства при аневризмах с различной ангиоархитектурой и гемодинамическими условиями в пределах одного животного.
Доклинические модели животных с гемодинамическими, морфологическими и гистологическими характеристиками, близкими к внутричерепным аневризмам человека, играют ключевую роль в понимании патофизиологических процессов, разработке и тестировании новых терапевтических стратегий. Это исследование направлено на описание новой модели аневризмы кролика, которая позволяет создавать две переваренные эластазой мешковидные аневризмы с различными гемодинамическими условиями у одного и того же животного.
Пять самок новозеландских белых кроликов со средним весом 4,0 (± 0,3) кг и средним возрастом 25 (±5) недель подверглись микрохирургическому образованию культи и бифуркации аневризмы. Одна аневризма (культя) была создана воздействием правой общей сонной артерии (CCA) в ее начале в брахиоцефальном стволе. Временный зажим был применен в начале ОАС, а другой – на 2 см выше. Этот сегмент обрабатывали местной инъекцией 100 Ед эластазы в течение 20 мин. Вторая аневризма (бифуркация) была создана путем зашивания обработанного эластазой артериального мешочка в сквозной анастомоз правого CCA к левому CCA. Проходимость контролировалась флуоресцентной ангиографией сразу после создания.
Средняя продолжительность операции составила 221 мин. Создание двух аневризм у одного и того же животного было успешным у всех кроликов без осложнений. Все аневризмы были запатентованы сразу после операции, за исключением одной бифуркационной аневризмы, которая показала экстремальную тканевую реакцию из-за инкубации эластазы и немедленного внутрипросветного тромбоза. Во время операции не наблюдалось никакой смертности и до одного месяца наблюдения. Заболеваемость ограничивалась транзиторным вестибулярным синдромом (один кролик), который выздоравливал спонтанно в течение одного дня.
Здесь впервые продемонстрирована целесообразность создания двуханевризмной модели кролика с гемодинамическими характеристиками культи и бифуркации и сильно дегенерированными условиями стенки. Данная модель позволяет изучать естественное течение и потенциальные стратегии лечения на основе биологии аневризмы в различных условиях течения.
Внутричерепная аневризма – тяжелое состояние с летальностью после разрыва, достигающей 50% и длительной инвалидностью у 10-20% больных1. В последнее десятилетие наблюдается быстрое развитие вариантов эндоваскулярного лечения, но в то же время увеличивается частота рецидивов с повторным сканированием до 33% аневризмы после свертывания 2,3. Для лучшего понимания патофизиологии, лежащей в основе окклюзии и реканализации аневризмы, а также для разработки и тестирования новых эндоваскулярных устройств, в настоящее время существует потребность в надежных доклинических моделях, гемодинамические, морфологические и гистологические характеристики которых имитируют характеристики внутричерепных аневризм человека 4,5,6 . На сегодняшний день не существует определенной модели в качестве стандарта для доклинических испытаний, и исследователям доступен большой спектр видов и методов 7,8.
Тем не менее, кролик представляет особый интерес из-за размера и гемодинамического сходства между его шейными артериями и сосудами головного мозга человека, а также его сходных профилей свертывания и тромболиза. Несколько моделей с переваренными эластазой мешковидными аневризмами на общих сонных артериях (CCA) показали качественное и количественное сходство с внутричерепными аневризмами человека с точки зрения условий потока, геометрических особенностей и характеристик стенок 9,10,11,12. Это исследование направлено на описание метода создания новой модели аневризмы кролика как с культей, так и с бифуркационными аневризмами, переваренными эластазой, у одного и того же животного. Хирургические методы вдохновлены методами Hoh et al.13 и Wanderer et al.14 с небольшими изменениями, чтобы обеспечить хорошую стандартизацию и воспроизводимость и обеспечить низкую смертность и заболеваемость.
Наиболее распространенная методика создания аневризмы предполагает создание аневризмы культи в начале правого ОАС, либо открытым, либо эндоваскулярным методом. Модель была подтверждена как стабильная нерастущая аневризма, которая остается открытой со временем20,21<…
The authors have nothing to disclose.
Авторы благодарят профессора Ханса Рудольфа Видмера, доктора Луку Ремонду и профессора Хавьера Фандино за их научную поддержку и технический вклад в эту работу. Отдельное спасибо Ольгице Беслак за ее советы во время процедур и Кей Неттельбек за его помощь. Кроме того, мы благодарим Даниэлу Касони DVM, доктора философии и ветеринара. Луизана Гарсия, д-р Алессандра Бергадано и д-р Карлотта Детто за их специализированную ветеринарную поддержку.
4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP292ZH | |
4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP304H | |
6-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
9-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
Adrenaline | Amino AG | 1445419 | any generic |
Amiodarone | Helvepharm AG | 5078567 | any generic |
Anesthesia machine | Dräger | any other | |
Aspirin | Sanofi-Aventis (Suisse) SA | 622693 | any generic |
Atropine | Labatec Pharma SA | 6577083 | any generic |
Bandpass filter blue | Thorlabs | FD1B | any other |
Bandpass filter green | Thorlabs | FGV9 | any other |
Biemer vessel clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FD560R | any other |
Bipolar forceps | any other | ||
Bispectral index (neonatal) | any other | ||
Blood pressure cuff (neonatal) | any other | ||
Bycilces spotlight | any other | ||
Clamoxyl | GlaxoSmithKline AG | 758808 | any generic |
Dexmedetomidine | Ever Pharma | 136740-1 | any generic |
Elastase | Sigma Aldrich | E7885 | |
Electrocardiogram electrodes | |||
Ephedrine | Amino AG | 1435734 | |
Esmolol | OrPha Swiss GmbH | 3284044 | |
Fentanyl (intravenous use) | Janssen-Cilag AG | 98683 | |
Fentanyl (transdermal) | Mepha Pharma AG | 4008286 | |
Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | |
Fragmin | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 1906725 | |
Heating pad or heating forced-air warming system | |||
Isotonic sodium chloride solution (0.9%) | Fresenius KABI | 336769 | |
Ketamine | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 342261 | |
lid retractor | Approach | ||
Lidocaine | Streuli Pharma AG | 747466 | |
Longuettes | |||
Metacam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | Medication |
Methadone | Streuli Pharma AG | 1084546 | Sedaton |
Micro-forceps curved | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-015-15 | |
Micro-forceps straight 2x | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-010-15 | |
Microscissors | Ulrich Swiss , Switzerland | U52-327-15 | |
Midazolam | Accord Healthcare AG | 7752484 | |
Needle 23 G | arteriotomy | ||
Needle holder | |||
O2-Face mask | |||
Operation microscope | Wild Heerbrugg | ||
Papaverin | Bichsel | topical application | |
Povidone iodine | Mundipharma Medical Company | any generic | |
Prilocaine-lidocaine creme | Emla | ||
Propofol | B. Braun Medical AG, Switzerland | General anesthesia | |
Pulse oxymeter | |||
Rectal temperature probe (neonatal) | |||
Ringer Lactate | Bioren Sintetica SA | Infusion | |
Ropivacain | Aspen Pharma Schweiz GmbH | 1882249 | Local anesthesia |
Scalpell | Swann-Morton | 210 | |
Small animal shaver | |||
Soft tissue forceps | |||
Soft tissue spreader | |||
Stainless steel sponge bowls | |||
Sterile micro swabs | |||
Stethoscope | |||
Surgery drape | |||
Surgical scissors | |||
Syringes 1 mL, 2 mL, and 5 mL | |||
Tris-Buffer | Sigma Aldrich | 93302 | Elastase solution |
Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
Vein and arterial catheter 22 G | |||
vessel loop | Approach | ||
video camera or smartphone | |||
Vitarubin | Streuli Pharma AG | 6847559 | |
Yasargil titan standard clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T |