Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Verbeterde olieterugwinning met behulp van een combinatie van biosurfactanten

5.6K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/63207

⸱

3 juni 2022

 ,  ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

We illustreren de methoden die betrokken zijn bij het screenen en identificeren van de biosurfactant producerende microben. Methoden voor chromatografische karakterisering en chemische identificatie van de biosurfactanten, het bepalen van de industriële toepasbaarheid van de biosurfactant bij het verbeteren van de resterende olieterugwinning worden ook gepresenteerd.

Samenvatting

Biosurfactanten zijn oppervlakteactieve verbindingen die in staat zijn om de oppervlaktespanning tussen twee fasen van verschillende polariteiten te verminderen. Biosurfactanten zijn in opkomst als veelbelovende alternatieven voor chemische oppervlakteactieve stoffen vanwege minder toxiciteit, hoge biologische afbreekbaarheid, milieucompatibiliteit en tolerantie voor extreme omgevingsomstandigheden. Hier illustreren we de methoden die worden gebruikt voor het screenen van microben die biosurfactanten kunnen produceren. De biosurfactant producerende microben werden geïdentificeerd met behulp van drop collapse, olie verspreiden en emulsie index assays. De productie van biosurfactanten werd gevalideerd door de vermindering van de oppervlaktespanning van de media als gevolg van de groei van de microbiële elementen te bepalen. We beschrijven ook de methoden die betrokken zijn bij de karakterisering en identificatie van biosurfactanten. Dunnelaagchromatografie van de geëxtraheerde biosurfactant gevolgd door differentiële kleuring van de platen werd uitgevoerd om de aard van de biosurfactant te bepalen. LCMS, 1H NMR en FT-IR werden gebruikt om de biosurfactant chemisch te identificeren. We illustreren verder de methoden om de toepassing van de combinatie van geproduceerde biosurfactanten te evalueren voor het verbeteren van de restolieterugwinning in een gesimuleerde zandpakketkolom.

Inleiding

Biosurfactanten zijn de amfipathische oppervlakte-actieve moleculen geproduceerd door micro-organismen die het vermogen hebben om het oppervlak en de interfaciale spanning tussen twee fasen1 te verminderen. Een typische biosurfactant bevat een hydrofiel deel dat meestal bestaat uit een suikergroep of een peptideketen of hydrofiel aminozuur en een hydrofoob deel dat bestaat uit een verzadigde of onverzadigde vetzuurketen2. Vanwege hun amfipathische aard assembleren biosurfactanten zich op het grensvlak tussen de twee fasen en verminderen ze de interfaciale spanning aan de grens, wat de verspreiding van de ene fase in de a....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. Groei van microbiële stammen

  1. Weeg 2 g Luria Bouillonpoeder af en voeg toe aan 50 ml gedestilleerd water in een erlenmeyer van 250 ml. Meng de inhoud totdat het poeder volledig is opgelost en vul het volume aan tot 100 ml met gedestilleerd water.
  2. Bereid op dezelfde manier nog twee kolven van 100 ml Luria Bouillon en plaats wattenstaafjes op de hals van de kolven.
  3. Bedek de katoenen pluggen met aluminiumfolie en autoclaaf de kolven gedurende 15 minuten bij 121 °C en 15 psi om de media te steriliseren.
  4. Laat na het autoclaveren de media afkoelen tot kamertemperatuur.
  5. Kies voor de bereiding van de primair....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Drie bacteriestammen (Rhodococcus sp. IITD102, Lysinibacillus sp. IITD104 en Paenibacillus sp. IITD108) werden gescreend op de productie van biosurfactanten door verschillende assays, waaronder drop collapse assay, oil displacement assay, emulsion index assay en surface tension reduction. Celvrije supernatanten van alle drie de bacteriestammen en een oplossing van chemische oppervlakteactieve stof resulteerden in een druppelinstorting en werden daarom positief gescoord voor de aanwezigheid van .......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Biosurfactanten zijn een van de meest veelzijdige groep biologisch actieve componenten die aantrekkelijke alternatieven worden voor chemische oppervlakteactieve stoffen. Ze hebben een breed scala aan toepassingen in tal van industrieën, zoals wasmiddelen, verven, cosmetica, voedsel, farmaceutica, landbouw, aardolie en waterbehandeling vanwege hun betere bevochtigbaarheid, lagere CMC, gediversifieerde structuur en milieuvriendelijkheid18. Dit heeft geleid tot een toegenomen interesse in het ontdekk.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren geen belangenconflicten te hebben.

Dankbetuigingen

De auteurs willen het Department of Biotechnology, Government of India, bedanken voor de financiële steun.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1 ml pipetteEppendorf, DuitslandG54412G
1H NMRBruker Avance AV-III type spectrometer, VS
20 ul pipetteThermo scientific, VSH69820
AutoclaafJAISBO, IndiaSer nr 5923Jain Scientific
Blauwe vlambranderRocker scientific, Taiwandragon 200
ButanolGLR inovations, IndiaGLR09.022930
C18 kolomAgilent Technologies, VS770995-902
CentrifugeEppendorf, Duitsland5810R
ChloroformMerck, India1.94506.2521
Chloroform-dSRL, India57034
Falcon tubesTarsons, India546041Polypropyleen gesteriliseerd met straling
FT-IRThermo Fisher Scientific, VS Nicolet iS50
ZuigkapKhera, India47408Aangepast
Glazuur azijnzuurMerck, India1.93002
GlaskralenMerck, India104014
GlasplatenPolar industrial Corporation, VSBlue Star75 mm * 25 mm
GlaspluisMerk, India104086
ZoutzuurMerck, India1003170510
IncubatorThermo Scientific, VSMaxQ600Slingerincubator
IncubatorKhera, IndiaSunbim
Jodium gesublimeerdMerck, India231-442-4 gesublimeerde korrels
K12 –Kruss tensiometerKruss Scientific, DuitslandK100
Laminaire luchtstroomkastThermo Scientific, China1300 Series A2
LCMSAgilent Technologies, VS1260 Infinity II
Luria BrothHIMEDIA, IndiaM575-500GPoeder
MethanolMerck, India107018
NinhydrineTitan Biotech Limited, India1608
p- anisaldehydeSigma, VS204-602-6
PetrischaalTarsons, India460090-90 MMPolypropyleen gesteriliseerd met straling
SaponineMerck, India232-462-6
NatriumchlorideMerck, India231-598-3
TestbuizenBorosil, India9800U06Glasbuizen
TLC platenMerck, India1055540007
VortexGeNei, India2006114318
WaterbadJulabo, IndiaSW21C

Referenties

  1. Desai, J. D., Banat, I. M. Microbial production of surfactants and their commercial potential. Microbiology and Molecular Biology Reviews. 61 (1), 47-64 (1997).
  2. Banat, I. M. Biosurfactants pr....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Productie van biosurfactantenverlaging van de oppervlaktespanningmicrobiële screeningdrop collapse-assayolie-uitspreidingsassayemulsie-index assaydunne-laagchromatografieidentificatie van rhamnolipidenzandpakkolom