Summary

नॉनइनवेसिव माइक्रोडायलिसिस तकनीक के माध्यम से चूहे के दिल से गतिशील निरंतर रक्त निष्कर्षण

Published: September 13, 2022
doi:

Summary

वर्तमान प्रोटोकॉल माइक्रोडायलिसिस तकनीक का उपयोग करके चूहे के दिल के रक्त के वास्तविक समय और गतिशील संग्रह के लिए एक सरल और कुशल विधि का वर्णन करता है।

Abstract

हृदय रोगों और उनके संबंधित रोगों, जैसे मायोकार्डियल रोधगलन, अतालता, एथेरोस्क्लेरोसिस, कार्डियोजेनिक फुफ्फुसीय एडिमा, फुफ्फुसीय अन्त: शल्यता और सेरेब्रल एम्बोलिज्म को समझने में रक्त घटकों का गतिशील विश्लेषण बहुत महत्वपूर्ण है। इसी समय, विशिष्ट जातीय चिकित्सा चिकित्सा की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए जीवित चूहों में निरंतर हृदय रक्त नमूना तकनीक को तोड़ना जरूरी है। इस अध्ययन में, एक सटीक और गैर-आक्रामक शल्य चिकित्सा प्रक्रिया में चूहों की दाहिनी जुगुलर नस में एक रक्त माइक्रोडायलिसिस जांच प्रत्यारोपित की गई थी। कार्डियक रक्त के नमूने तब एक ऑनलाइन माइक्रोडायलिसिस नमूना संग्रह प्रणाली से जुड़कर 2.87 एनएल / मिनट से 2.98 एमएल / मिनट की दर से एकत्र किए गए थे। इससे भी अधिक महत्वपूर्ण रूप से, अधिग्रहित रक्त के नमूने अस्थायी रूप से 4 डिग्री सेल्सियस पर माइक्रोडायलिसिस कंटेनरों में संग्रहीत किए जा सकते हैं। चूहे के दिल से माइक्रोडायलिसिस-आधारित ऑनलाइन निरंतर रक्त संग्रह कार्यक्रम ने रक्त के नमूनों की गुणवत्ता की बहुत गारंटी दी है, प्रणालीगत कार्डियोवैस्कुलर रोगों पर शोध की वैज्ञानिक तर्कसंगतता को आगे बढ़ाया और मजबूत किया है और हेमेटोलॉजी के दृष्टिकोण से नृवंशविज्ञान चिकित्सा का मूल्यांकन किया है।

Introduction

जीवन की गति के त्वरण और मनोवैज्ञानिक दबाव में वृद्धि के साथ, हृदय रोग (सीवीडी) युवा, मध्यम आयु वर्ग और बुजुर्ग लोगों में होते हैं सीवीडी की रुग्णता और मृत्यु दर अधिक है, तीव्र शुरुआत, तेजी से प्रगति और बीमारी के एक लंबे कोर्स की विशेषताओं के साथ,जो रोगियों की सुरक्षा को गंभीरता से प्रभावित करते हैं। सीवीडी की घटना कुछ रक्त घटकों में परिवर्तन से निकटता से संबंधित हो सकती है, जैसे कोलेस्ट्रॉल, सीरम लिपिड, रक्त ग्लूकोज, मायोकार्डियल एंजाइम, और प्रोटीन काइनेज के 4,5,6। रोगी की प्रासंगिक स्थिति को नियमित रक्त परीक्षा वस्तुओं का विश्लेषण करके सबसे जल्दी प्रबंधित किया जा सकता है। इसलिए, रक्त के नमूनों की गुणवत्ता परीक्षण परिणामों की सटीकता निर्धारित करती है। हालांकि, रक्त संग्रह के लिए पारंपरिक तरीकों में कुछ अपरिहार्य कमियां हैं, जो प्रयोगात्मक परिणामों को गंभीरता से प्रभावित करती हैं, जैसे कि बड़े आघात क्षेत्र, छोटे रक्त संग्रह की मात्रा, ऑपरेटरों के लिए उच्च आवश्यकताएं, वास्तविक समय में दवापरिवर्तनों को प्रतिबिंबित करने में असमर्थता, बोझिल रक्त नमूना प्रथागत, प्रयोगात्मक जानवरों की बड़ी खपत, और पशु नैतिक आवश्यकताओं को पूरा करने में विफलता 7,8,9 . चिकित्सा प्रौद्योगिकी में निरंतर प्रगति के साथ, रक्त संग्रह की गुणवत्ता ने भी उच्च आवश्यकताओं को आगे बढ़ाया है। इसलिए, उपरोक्त कमियों को दूर करने के लिए एक नई रक्त नमूना तकनीक विकसित करना जरूरी है।

माइक्रोडायलिसिस डायलिसिससिद्धांतों 10 पर आधारित एक इनविवो सैंपलिंग तकनीक है। गैर-संतुलन स्थितियों के तहत, मापा जाने वाले यौगिकों को ऊतक से एकाग्रता ढाल के साथ ऊतक से डायलीसेट में एम्बेडेड माइक्रोडायलिसिस जांच में फैलाया और प्रसारित किया जाता है, जिसे डायलीसेट के साथ लगातार हटा दिया जाता है, जिससे जीवित ऊतक11,12 से नमूना लेने का उद्देश्य प्राप्त होता है। पारंपरिक नमूना विधियों की तुलना में, माइक्रोडायलिसिस तकनीक में निम्नलिखित पहलुओं 13,14,15 में शानदार फायदे हैं: रक्त में विभिन्न यौगिकों के परिवर्तनों की निरंतर वास्तविक समय ट्रैकिंग; नमूनाकरण के लिए कोई थकाऊ पूर्व-प्रसंस्करण की आवश्यकता नहीं होती है और वास्तव में नमूना स्थल पर लक्ष्य यौगिक की एकाग्रता का प्रतिनिधित्व कर सकता है; लक्ष्य यौगिकों के अवशोषित, वितरण, चयापचय, उत्सर्जन और विषाक्तता की जांच के लिए शरीर के विभिन्न हिस्सों में जांच प्रत्यारोपित की जा सकती है; अधिग्रहित नमूने में कोई जैविक मैक्रोमोलेक्यूल्स (>20 केडी) नहीं है। इसलिए, उच्च गुणवत्ता वाले रक्त के नमूने सीवीडी और जातीय चिकित्सा द्वारा इलाज किए गए तंत्र की बेहतर व्याख्या सुनिश्चित करते हैं।

माइक्रोडायलिसिस नमूना प्रणाली में आम तौर पर माइक्रो-इंजेक्शन पंप, कनेक्टिंग ट्यूब, पशु-मुक्त आंदोलन टैंक, माइक्रोडायलिसिस जांच और नमूना कलेक्टरशामिल होते हैं। माइक्रोडायलिसिस सिस्टम के डिवाइस के सबसे महत्वपूर्ण हिस्से के रूप में, सामान्य माइक्रोडायलिसिस जांच में संकेंद्रित जांच, लचीली जांच, रैखिक जांच और शंट जांच17 शामिल हैं। इनमें से, लचीली जांच नरम और गैर-धातु जांच हैं, जिनका उपयोग मुख्य रूप से रक्त वाहिकाओं और परिधीय ऊतकों जैसे हृदय, मांसपेशियों, त्वचा और जागृत और स्वतंत्र रूप से चलने वाले या एनेस्थेटाइज्ड जानवरों की वसा से नमूने एकत्र करने के लिए किया जाताहै। रक्त वाहिकाओं या ऊतकों के संपर्क में आने पर, जांच को लचीले ढंग से मोड़ा जा सकता है, जिससे जांच या नमूना स्थल को अपरिवर्तनीय क्षति से बचा जा सकता है। जांच प्रौद्योगिकी के निरंतर विकास के साथ, विभिन्न क्षेत्रों में माइक्रोडायलिसिस प्रौद्योगिकी का अनुप्रयोग भी गहरा हो रहा है। इस पेपर में, रक्त संग्रह के लिए डिज़ाइन की गई लचीली जांच के माध्यम से नॉनइनवेसिव माइक्रोडायलिसिस तकनीक द्वारा चूहे के दिल के रक्त को गतिशील रूप से और लगातार अधिग्रहित किया गया था।

Protocol

पशु प्रोटोकॉल को चेंगदू यूनिवर्सिटी ऑफ ट्रेडिशनल चाइनीज मेडिसिन (रिकॉर्ड संख्या: 2021-11) की प्रशासनिक समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है। निर्दिष्ट रोगज़नक़-मुक्त नर स्प्राग डॉवले (एसडी) चूहों (8-10 सप्ताह, 2…

Representative Results

वर्तमान प्रोटोकॉल ने माइक्रोडायलिसिस उपकरण में निर्धारित नमूना मापदंडों के अनुसार जागरूक चूहों से कार्डियक रक्त प्राप्त करने की अनुमति दी। सामान्य रक्त के नमूने चमकीले लाल होने चाहिए, जबकि हाइपोक्…

Discussion

सीवीडी चीन में धीरे-धीरे बढ़ती घटनाओं के साथ क्लीनिकों में एक आम पुरानी बीमारी है, और शुरुआत की उम्र कम हो जाती है, जिससे अधिकांश रोगियों की चिंता और आतंकहोता है 20,21। दुनिया में मृत?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (82104533), चीन पोस्टडॉक्टरल साइंस फाउंडेशन (2020एम683273), सिचुआन प्रांत के विज्ञान और प्रौद्योगिकी विभाग (2021वाईजे0175) और सिचुआन प्रांतीय विज्ञान और प्रौद्योगिकी योजना (2022वाईएफएस0438) की प्रमुख आर एंड डी परियोजना द्वारा समर्थित किया गया था। इस बीच, लेखक ट्राई-एंजेल्स डी एंड एच ट्रेडिंग पीटीई में एक वरिष्ठ उपकरण इंजीनियर श्री युनचेंग होंग को धन्यवाद देना चाहते हैं। लिमिटेड (सिंगापुर शहर, सिंगापुर), माइक्रोडायलिसिस तकनीकों के लिए तकनीकी सेवाएं प्रदान करने के लिए।

Materials

Animal anesthesia system Rayward Life Technology Co., Ltd R500IE
Animal temperature maintainer Rayward Life Technology Co., Ltd 69020
Blood microdialysis probe  CMA Microdialysis AB T55347
Catheter  CMA Microdialysis AB T55347
Citrate Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd 251275
Electric shaver Rayward Life Technology Co., Ltd CP-5200
Fep tubing  CMA Microdialysis AB 3409501
Free movement tank for animals  CMA Microdialysis AB CMA120
Glucose Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd G8270
Hemostatic forceps Rayward Life Technology Co., Ltd F21020-16
Isofluran Rayward Life Technology Co., Ltd R510-22
Micro scissors Beyotime Biotechnology Co., Ltd FS221
Microdialysis collection tube  CMA Microdialysis AB 7431100
Microdialysis collector  CMA Microdialysis AB CMA4004
Microdialysis in vitro stand  CMA Microdialysis AB CMA130
Microdialysis microinjection pump  CMA Microdialysis AB 788130
Microdialysis syringe (1.0 mL)  CMA Microdialysis AB 8309020
Microdialysis tubing adapter  CMA Microdialysis AB 3409500
Microporous filter membrane Merck Millipore Ltd. R0DB36622
Non-absorbable surgical sutures Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd S19004
Operating table Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd 30153
Ophthalmic forceps Rayward Life Technology Co., Ltd F12016-15
Sodium citrate Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd 1613859
Sprague Dawley  (SD) rats Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd SYXK(Equation 1)2019-049
Surgical scissors Rayward Life Technology Co., Ltd S14014-15
Surgical scissors Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd BY-103
Syringe needle  CMA Microdialysis AB T55347
Ultrasonic cleaner Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd KMH1-240W8101

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Hou, Y., Bai, J., Zhang, Y., Meng, X., Zhang, S., Wang, X. Dynamic Continuous Blood Extraction from Rat Heart via Noninvasive Microdialysis Technique. J. Vis. Exp. (187), e64531, doi:10.3791/64531 (2022).

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