Un modèle d’oreille de souris pour l’évaluation de la dermatite de contact allergique
Summary
Ici, nous décrivons les méthodes pour induire une dermatite de contact allergique dans les oreilles de souris par le 1-fluoro-2,4-dinitrobenzène (DNFB) et comment évaluer la gravité de la dermatite de contact allergique.
Abstract
La peau est la première ligne de défense du corps humain et l’un des organes les plus exposés aux produits chimiques environnementaux. La dermatite de contact allergique (DCA) est une maladie de la peau courante qui se manifeste par une éruption cutanée locale, une rougeur et des lésions cutanées. L’apparition et le développement de la DCA sont influencés par des facteurs génétiques et environnementaux. Bien que de nombreux chercheurs aient construit une série de modèles de DCA au cours des dernières années, les protocoles expérimentaux de ces modèles sont tous différents, ce qui rend difficile pour les lecteurs de bien les établir. Par conséquent, un modèle animal stable et efficace est d’une grande importance pour étudier plus avant la pathogenèse de la dermatite atopique. Dans cette étude, nous détaillons une méthode de modélisation utilisant le 1-fluoro-2,4-dinitrobenzène (DNFB) pour induire des symptômes de type DCA dans les oreilles des souris et décrivons plusieurs méthodes pour évaluer la gravité de la dermatite lors de la modélisation. Ce protocole expérimental a été appliqué avec succès dans certaines expériences et a un certain rôle promotionnel dans le domaine de la recherche sur la DCA.
Introduction
La dermatite de contact allergique (DCA) est une maladie de la peau courante qui se caractérise par des symptômes semblables à ceux de l’eczéma au site de contact, un œdème et un érythème dans les cas modérés, et des papules, de l’érosion, de l’exsudation ou même des cicatrices massives dans les cas graves1. Elle touche jusqu’à 20% de la population et peut toucher des personnes de tout âge2. La DCA survient souvent chez les personnes qui ont été exposées à des allergènes à plusieurs reprises et peut être causée par la réponse immunitaire de la personne à un ou plusieurs allergènes à la maison ou au travail3. L’hypersensibilité retardée de type IV est considérée comme le principal type de réponse immunitaire dans ACD4. Dans les zones de la peau qui ont été exposées à plusieurs reprises à des allergènes, les lymphocytes T mémoire circulants s’accumulent en grand nombre et induisent des réponses immunitaires et inflammatoires 3,5,6. Le but de ce travail est de proposer une technique de laboratoire fiable pour une étude plus approfondie des réponses immunologiques et inflammatoires dans le développement de la DCA.
L’apparition de la DCA est généralement due à une hypersensibilité de contact causée par une exposition répétée à des produits chimiques. De nombreux chercheurs ont développé divers modèles animaux de DCA chez des souris domestiques7,8, des cobayes 9,10 et d’autres animaux au cours des dernières décennies, afin de simuler l’apparition de la maladie. La plupart des méthodes expérimentales comportent deux étapes: la sensibilisation abdominale (induction) et l’apport de stimuli sur le dos ou le lobe de l’oreille (stimulation). Les substances chimiques couramment utilisées comprennent principalement le 1-fluoro-2,4-dinitrobenzène (DNFB)/1-chloro-2,4-dinitrobenzène (DNCB)8,9,11, l’oxazolone 12, l’urushiol 13, etc. Parmi eux, DNFB et DNCB sont les plus utilisés, signalés pour la première fois en octobre 195810. Le modèle de sensibilisation au nickel14 et le modèle de dermatite de contact photoallergique15 sont également fréquemment utilisés.
Nous présentons une méthode expérimentale pour construire le modèle ACD. Cette méthode est résumée et optimisée sur la base d’études antérieures et par comparaison avec de multiples expériences. Par rapport à d’autres modèles de DCA, ce modèle présente certains avantages, tels que de petites différences individuelles, de courtes périodes expérimentales, une petite quantité de stimulation chimique, etc. En outre, cette étude est applicable aux souris, qui sont non seulement économiques, mais ont également plus d’options pour l’élimination des gènes ou la préparation de souris transgéniques16. Nous décrivons également les différentes méthodes utilisées pour surveiller les progrès de la DCA dans l’expérience, telles que la mesure de l’épaisseur de l’oreille, l’utilisation du colorant bleu Evans pour mesurer l’exsudation inflammatoire, etc. Ce modèle peut non seulement analyser les oreilles, le sang, la rate et d’autres échantillons de souris par des moyens de laboratoire pour explorer la pathogenèse de la DCA, mais est également applicable pour l’évaluation préclinique de nouvelles méthodes thérapeutiques, ce qui a une certaine signification promotionnelle.
Protocol
Representative Results
Discussion
Le protocole décrit ici pour induire des symptômes semblables à ceux de la DCA dans les oreilles des souris peut être utilisé pour étudier la physiopathologie de la DCA et comme outil de dépistage pour le développement de nouveaux médicaments.
Il y a deux étapes clés pour établir un modèle de DCA : la sensibilisation initiale et la stimulation subséquente. L’abdomen est généralement le site de la sensibilisation initiale, mais le site de stimulation subséquente a été chois…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (NSFC) à N.-N. Y. (81904212); Projet scientifique et technologique de médecine traditionnelle chinoise du Jiangsu (YB201995); et le Projet spécial de financement pour les chercheurs postdoctoraux en Chine (2020T130562).
Materials
| 1-Fluoro-2,4-dinitrobenzene (DNFB) | Merck | 200-734-3 | 1-Fluoro-2,4-dinitrobenzene, ≥99% |
| Acetone | Sinopharm Chemical Reagent Co. LTD | 10000418 | ≥99.5% |
| Aluminum foil | Cleanwrap | CF-2 | |
| Evans blue dye | Solarbio | 314-13-6 | Dye content approx. 80% |
| Mouse fixator | ZHUYANBANG | GEGD-SM1830 | |
| Olive oil | Solarbio | 8001-25-0 | 500 ml |
| Pipet tip | Biofount | FT-200 | 10 – 200 μl |
| Pipettor | Eppendorf AG | 3123000250 | 20 – 200 μl |
| Razor blade | Shanghai Gillette Co. LTD | 74-S | |
| Vernier calipers | Delixi Electric | DECHOTVCS1200 |
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