فحص عدوى المبيضات الفموية في مرضى متلازمة سجوجرن الأولية
Summary
هنا ، نقدم بروتوكولا لفحص عدوى المبيضات عن طريق الفم في المرضى الذين يعانون من متلازمة سجوجرن الأولية ، والتي يمكن استخدامها للعلاج في الوقت المناسب ، وبعد ذلك ، تجنب المضاعفات ذات الصلة.
Abstract
متلازمة سجوجرن الأولية (pSS) هي أحد أمراض المناعة الذاتية التي تتميز بأعراض مثل جفاف الفم وجفاف العين وأعراض منهجية أخرى. بسبب نقص اللعاب الذي يعاني منه مرضى pSS ، غالبا ما يحدث دسباقتريوز الفم. المضاعفات الشائعة ل pSS هي عدوى المبيضات الفموية. في هذه المقالة ، يصف المؤلفون طرقا منهجية يمكنها تشخيص عدوى المبيضات الفموية بشكل فعال وتحديد سلالات المبيضات باستخدام اللعاب أو مسحات الغشاء المخاطي للفم أو غسول الفم من مرضى pSS. يتم استخدام أجار سكر العنب من Sabouraud (SDA) ، ومقايسة تكوين hyphal ، واختبار مسحة هيدروكسيد البوتاسيوم (KOH) ، ومقايسة تلطيخ الكالكوفلور الأبيض (CFW) لتشخيص عدوى المبيضات عن طريق الفم. يستخدم أجار تشخيص المبيضات لتحديد سلالات المبيضات . أخيرا ، يتم استخدام اختبار الحساسية للفطريات لتحديد العلاج المناسب للفطريات. يمكن أن تعزز هذه الطريقة الموحدة التشخيص والعلاج والبحث المستقبلي لعدوى المبيضات الفموية المرتبطة ب pSS. التشخيص المبكر ، باستخدام هذه الطريقة ، يمكن أن يمنع أيضا أي مضاعفات تنشأ بسبب التأخير في تلقي العلاج المناسب.
Introduction
المبيضات سببها المبيضات النيابة، والتي هي مسببات الأمراض الانتهازية. تشمل السلالات الشائعة المبيضات البيض ، المبيضات كروسي ، المبيضات غلابراتا ، المبيضات parapsilosis ، والمبيضات دبلينينسيس1. تشمل العدوى الانتهازية التي تسببها المبيضات التهابات المبيضات السطحية وداء المبيضات الغازي. داء المبيضات الغازية يحدث بشكل رئيسي في الأفراد الذين يعانون من نقص المناعة. على سبيل المثال ، في المرضى الذين يعانون من متلازمة نقص المناعة المكتسب (الإيدز) ، يمكن أن يهدد داء المبيضات الغازي بشكل كبير نوعية الحياة أو حتى العمرالافتراضي 2. عدوى المبيضات السطحية ، مثل داء المبيضات المخاطي الجلدي ، أكثر شيوعا في المرضى3.
داء المبيضات الفموي ، عدوى المبيضات السطحية ، هو العدوى الفطرية البشرية الأكثر شيوعا. المبيضات البيض هو متعايش طبيعي للفم. تم الإبلاغ عن أن معدل نقل المبيضات spp. يتراوح من 20٪ إلى 75٪ في عموم السكان دون أي أعراض4. يمكن أن يؤدي فرط نمو المبيضات إلى عدم الراحة المحلية لدى المرضى ، مثل تغير طعم الإحساس ، والإحساس بالحرقة في الفم ، وعسر البلع بسبب سوء التغذية ، وتأخر الشفاء ، والإقامة الطويلة في المستشفى. يمكن أن يؤدي داء المبيضات الفموي طويل الأمد إلى داء المبيضات الغازي الشديد ، مما يؤدي إلى مراضة ووفيات كبيرة5. داء المبيضات الفموي يمكن أن يزيد أيضا من خطر الإصابة بسرطان الفم5. ضعف وظيفة الغدد اللعابية هو من بين عوامل الخطر لداء المبيضات الفموي6. بدء العدوى هو التصاق المبيضات بجدران الخلايا الظهارية. ويلي ذلك انتشار وخيوط المبيضات وتشكيل ونضج الغشاء الحيوي7. من الصعب للغاية القضاء على الأغشية الحيوية وهي مقاومة للعلاج التقليدي المضاد للفطريات ، مما يجعل العلاج السريري تحديا لعدوى المبيضات الفموية المرتبطة بالأغشية الحيوية7.
متلازمة سجوجرن الأولية (pSS) هي أحد أمراض المناعة الذاتية التي تتميز بجفاف الفم وجفاف العين وأعراض منهجية أخرى8. جفاف الفم هو أكثر أعراض pSS شيوعا. اللعاب له وظائف فسيولوجية مهمة مضادة للفطريات. من ناحية ، يمكن أن يخفف وينظف الفم وبعد ذلك يزيل الكائنات الحية من الغشاء المخاطي. من ناحية أخرى ، يحتوي اللعاب على بروتينات مضادة للميكروبات ، مثل اللاكتوفيرين ، سيالوبيروكسيديز ، الليزوزيم ، الببتيدات الغنية بالهيستيدين ، والأجسام المضادة المضادة المضادة للفحم ، والتي يمكن أن تتفاعل مع الغشاء المخاطي للفم وتمنع فرط نمو المبيضات6. قد يؤدي انخفاض تدفق اللعاب إلى تعريض مرضى pSS لداء المبيضات الفموي. وجدت دراسة مقطعية قائمة على الملاحظة أجريت على 61 مريضا من مرضى pSS أن 13.1٪ من مرضى pSS قدموا علامات فموية لداء المبيضات ووحدة تشكيل المستعمرة (CFU) / مل من المبيضات البيض تم العثور عليها بشكل كبير وسلبي مع مستويات اللعاب الكامل غير المحفز (UWS) واللعاب الكامل المحفز (SWS) 9.
يمكن للطرق المقدمة في هذه المخطوطة تحديد عدوى المبيضات الفموية بناء على السمات المورفولوجية المميزة (على سبيل المثال ، خلايا الخيوط والخميرة) في اللطاخة المباشرة أو بعد زراعة10. يعتمد تحديد سلالة المبيضات باستخدام أجار تشخيص المبيضات على تكوين مستعمرات ملونة مختلفة ذات مورفولوجيا متنوعة ، والتي تنتج عن انقسام ركائز كروموجينية بواسطة إنزيمات خاصة بالأنواع11. في هذه المخطوطة ، يتم تقديم طرق منهجية للكشف عن عدوى المبيضات الفموية ، بما في ذلك زراعة المبيضات الفموية التقليدية والفحص السريع عن طريق اختبار مسحة هيدروكسيد البوتاسيوم (KOH) ومقايسة تلطيخ الكالكوفلور الأبيض (CFW)10. بالإضافة إلى ذلك ، تم تقديم اختبار الحساسية للفطريات ، والذي يمكن أن يوجه علاج عدوى المبيضات عن طريق الفم السريري. في الحالات الفعلية ، ليس من الضروري تنفيذ جميع الأساليب المقدمة في هذه المخطوطة. يمكن اختيار طريقة (طرق) الكشف عن المبيضات عن طريق الفم وفقا للغرض. إن فحص عدوى المبيضات الفموية وتحديد سلالات المبيضات في مرضى pSS لا يفيد علاج المرض فحسب ، بل يساعد أيضا في تقييم توصيف داء المبيضات الفموي وملامح الأنواع.
Protocol
Representative Results
Discussion
في المخطوطة الحالية ، نقدم سلسلة من الطرق المنهجية والبسيطة والممكنة للكشف عن عدوى المبيضات الفموية ، وتحديد سلالات المبيضات ، واختبار الحساسية المضادة للفطريات للأدوية شائعة الاستخدام في المرضى الذين يعانون من pSS.
في الإعدادات العملية ، ليست كل الطرق المقدمة ف?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم دعم هذا البحث من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82201084) ، ومؤسسة علوم ما بعد الدكتوراه الصينية (2022M722232) ، ومؤسسة بكين لأبحاث ما بعد الدكتوراه (2023-ZZ-020) ، ومشروع مياوبو لمستشفى بكين تيانتان ، وجامعة العاصمة الطبية (2023MP10) وصندوق البحوث العامة ، مجلس هونغ كونغ لمنح البحوث (27111820 و 17116521).
Materials
| 0.22 µm Syringe Filter | MERCK | SLGV004SL | |
| 1.5 mL Centrifuge Tube | axygen | MCT-150-C-S | |
| 10 cm Microbiological Culture Dishes | Jet Bio-Filtration Co. Ltd | TCD000100 | |
| 15 mL Centrifuge Tube | Jet Bio-Filtration Co., Ltd | CFT011150 | |
| 50 mL Centrifuge Tube | Corning | 430290 | |
| 96-well Microplates | Corning | 3599 | |
| API 0.85% NaCl ampule | BIOMERIEUX | 20070 | |
| Calcofluor White Stain | Sigma-Aldrich | 18909-100ML-F | |
| CHROMagar Candida | CHROMagar | P002860 | Candida diagnostic agar |
| D(+)-Glucose Monohydrate | Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd | 10010518 | |
| Fetal Bovine Serum | Gibco | 26170035 | |
| McFarland Standards Kit | BIOMERIEUX | 70900 | |
| Nunc precision molded loops | ThermoFisher Scientific | 254399 | |
| Phosphate Buffered Saline | Gibco | C10010500BT | |
| Potassium Hydroxide | Aladdin | P112284-500g | |
| PowerSoil DNA Isolation Kit | MO BIO | 12888-50 | |
| RPMI 1640 Medium | Gibco | 11875119 | |
| Sabourand's Agar Medium | Solarbio | S9710 | |
| Yeast Nitrogen Base Without Amino acids | Solarbio | Y8040 | |
| Yeast-like Fungal Susceptibility Kit (Microdilution) | BIOMERIEUX | 14204 |
References
- Wang, X., et al. Microbiota dysbiosis in primary Sjögren’s syndrome and the ameliorative effect of hydroxychloroquine. Cell Rep. 40 (11), 111352 (2022).
- Humphrey, S. P., Williamson, R. T. A review of saliva: normal composition, flow, and function. J Prosthet Dent. 85 (2), 162-169 (2001).
- Marsh, P. D., Do, T., Beighton, D., Devine, D. A. Influence of saliva on the oral microbiota. Periodontol 2000. 70 (1), 80-92 (2016).
- Vila, T., Rizk, A. M., Sultan, A. S., Jabra-Rizk, M. A. The power of saliva: Antimicrobial and beyond. PLoS Pathog. 15 (11), e1008058 (2019).
- Serrano, J., et al. Risk factors related to oral candidiasis in patients with primary Sjögren’s syndrome. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 25 (5), e700-e705 (2020).
- Napeñas, J. J., Rouleau, T. S. Oral complications of Sjögren’s syndrome. Oral Maxillofac Surg Clin North Am. 26 (1), 55-62 (2014).
- Mathews, S. A., Kurien, B. T., Scofield, R. H. Oral manifestations of Sjögren’s syndrome. J Dent Res. 87 (4), 308-318 (2008).
- Leung, K. C. M., McMillan, A. S., Cheung, B. P. K., Leung, W. K. Sjögren’s syndrome sufferers have increased oral yeast levels despite regular dental care. Oral Dis. 14 (2), 163-173 (2008).
- Lundstrom, I. M., Lindstrom, F. D. Subjective and clinical oral symptoms in patients with primary Sjögren’s syndrome. Clin Exp Rheumatol. 13 (6), 725-731 (1995).
- Alam, M. Z., et al. Candida identification: a journey from conventional to molecular methods in medical mycology. World J Microbiol Biotechnol. 30 (5), 1437-1451 (2014).
- Bauters, T. G., Nelis, H. J. Comparison of chromogenic and fluorogenic membrane filtration methods for detection of four Candida species. J Clin Microbiol. 40 (5), 1838-1839 (2002).
- Soto-Rojas, A. E., Villa, A. R., Sifuentes-Osornio, J., Alarcón-Segovia, D., Kraus, A. Oral candidiasis and Sjögren’s syndrome. J Rheumatol. 25 (5), 911-915 (1998).
- Gilchrist, J. E., Campbell, J. E., Donnelly, C. B., Peeler, J. T., Delaney, J. M. Spiral plate method for bacterial determination. Appl Microbiol. 25 (2), 244-252 (1973).
- Biomerieux. ATB FUNGUS 3 Sensitivity test for yeast-like fungi. REF 14204. Biomerieux. , (2014).
- Zhang, L., et al. The widely used ATB FUNGUS 3 automated readings in China and its misleading high MICs of Candida spp. to Azoles: Challenges for developing countries’ clinical microbiology labs. PLoS One. 9 (12), e114004 (2014).
- Hu, L., Zhou, P., Zhao, W., Hua, H., Yan, Z. Fluorescence staining vs. routine KOH smear for rapid diagnosis of oral candidiasis-A diagnostic test. Oral Dis. 26 (5), 941-947 (2020).
- Samaranayake, L. P. Candida krusei infections and fluconazole therapy. Hong Kong Med J. 3 (3), 312-314 (1997).
- Lee, Y., Puumala, E., Robbins, N., Cowen, L. E. Antifungal drug resistance: Molecular mechanisms in Candida albicans and beyond. Chem Rev. 121 (6), 3390-3411 (2021).
- Rihab, B., Lina, E. H., Noémie, S. T., Jean, S., Marjolaine, G. The experience of dry mouth and screening for Sjogren’s syndrome by the dentist: patient-reported experiences. BMC Oral Health. 23 (1), 1010 (2023).
- Panpetch, W., et al. Oral Candida administration in a Clostridium difficile mouse model worsens disease severity but is attenuated by Bifidobacterium. PLoS One. 14 (1), e210798 (2019).
- Alwaily, E. R., Abood, M. S., Al Uobody, R. M. Diagnosis of oral candidiasis in patients under 12 years: 18S rRNA as a marker of molecular characterization of Candida tropicalis. Arch Razi Inst. 78 (1), 475-483 (2023).
- Chen, C. L., et al. Candida infection as an early sign of subsequent Sjögren’s syndrome: A population-based matched cohort study. Front Med (Lausanne). 8, 796324 (2022).
