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Misurazione delle proteine ​​plasmatiche Tariffe endocitico membrana da biotinilazione reversibile
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Biology
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JoVE Journal Biology
Measuring Plasma Membrane Protein Endocytic Rates by Reversible Biotinylation
DOI:

11:32 min

December 23, 2009

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Chapters

  • 00:00Title
  • 00:56Introduction
  • 01:20Cell Culture and Solution Preparation
  • 03:37Biotinylation, Quenching and Internalization of Proteins
  • 07:30Protein Assay, Affinity Chromatography and SDS-Page Analysis of Proteins
  • 09:49Dopamine Transporter Internalization
  • 11:02Conclusion

Summary

Automatic Translation

Endocitosi regolata regola i livelli di superficie cellulare espressione della maggior parte delle proteine ​​di membrana. Qui utilizziamo riducibili, reagenti biotinilazione impermeant membrana per misurare la velocità endocitico del trasportatore della dopamina (DAT), una proteina di membrana politopica. Il metodo favorisce un approccio diretto per misurare il tasso endocitico della maggior parte delle proteine ​​di membrana plasmatica.

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