A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:06Introduction
- 01:51BiFC Calibration
- 03:04Plating and Transfection of Cells
- 04:37Imaging Cells
- 07:08Monitoring SH3 Interactions of ITSN
- 08:13Conclusion
La localizzazione subcellulare delle proteine è importante nel determinare la regolazione spazio-temporale di segnalazione cellulare. Qui, descriviamo biomolecolare complementazione fluorescenza (BiFC) come un metodo semplice per il monitoraggio delle interazioni spaziali delle proteine all'interno della cellula.
Tags
Bimolecular Fluorescence ComplementationSubcellular DistributionSignaling ComplexesImmunoprecipitationSpatial LocalizationBiFCProtein ComplexesFluororescent ProteinAmino-terminalCarboxy-terminalProtein FusionInteractionReconstitutionFluorophoreLimitationTransient InteractionsWeak InteractionsKinetic AnalysisComplex DynamicsFlourophore MaturationReal Time InteractionsProtein Fragment Complementation AssayReporter ProteinsGreen Fluorescent Protein VariantsDihydrofolate ReductaseB-lactamaseLuciferaseProtein:protein InteractionsFluorescence Co-localizationFörster Resonance Energy Transfer (FRET)
