Analyse du cycle cellulaire

Cycle cellulaire désigne l’ensemble des événements à travers lequel une cellule grandit, réplique son génome et finalement se divise en deux cellules filles à travers le processus de la mitose. Parce que la quantité d’ADN dans une cellule montre des changements caractéristiques pendant tout le cycle, techniques connues comme l’analyse du cycle cellulaire peut être utilisé pour séparer une population de cellules selon les différentes phases du cycle cellulaire, dans qu’ils sont, basé sur leur teneur en ADN variable.

Cette vidéo couvre les principes qui sous-tendent l’analyse du cycle cellulaire par coloration à l’ADN. Nous passerons en revue un protocole généralisé pour effectuer ces taches à l’aide de bromodéoxyuridine (BrdU, une thymidine analogique qui est incorporé dans les brins d’ADN nouvellement synthétisés) et l’iodure de propidium (PI, un colorant ADN ADN toutes les taches), suivie de l’analyse des cellules colorées par cytométrie en flux. Au cours de la cytométrie en flux, une suspension monocellulaire fluorescent étiquetés cellules est passée à travers un instrument avec un faisceau laser et la fluorescence de chaque cellule est lu. Nous discuterons ensuite comment interpréter les données de diagrammes de dispersion de cytométrie en flux et enfin, Regardez quelques applications de cette technique.