JoVE Science Education
Cell Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Cell Biology
Cell Cycle Analysis
  • 00:00Overview
  • 00:56Principle Behind Cell Cycle Analysis
  • 03:33Generalized Protocol for BrdU and PI Staining
  • 05:43Flow Cytometric Analysis
  • 07:26Applications
  • 09:07Summary

ניתוח מחזור תא

English

Share

Overview

מחזור התא מתייחס למערך האירועים שדרכם גדל תא, משכפל את הגנום שלו, ובסופו של דבר מתחלק לשני תאי בת בתהליך של מיטוזה. מכיוון שכמות הדנ”א בתא מראה שינויים אופייניים לאורך המחזור, ניתן להשתמש בטכניקות המכונות ניתוח מחזור התאים כדי להפריד אוכלוסיית תאים בהתאם לשלבים השונים של מחזור התאים בהם הם נמצאים, בהתבסס על תוכן ה- DNA המשתנה שלהם.

וידאו זה יכסה את העקרונות מאחורי ניתוח מחזור התא באמצעות מכתים DNA. אנו נסקור פרוטוקול כללי לביצוע הכתמים באמצעות ברומודוקסיורידין (BrdU, אנלוגי תימידין המשולב בגדילי DNA מסונתזים חדשים) ופרופידיום יודיד (PI, צבע DNA שמכתים את כל ה- DNA), ואחריו ניתוח של התאים המוכתמים עם ציטומטריית זרימה. במהלך ציטומטריית הזרימה, השעיית תא בודד של תאים בעלי תווית פלואורסצנטית מועברת דרך מכשיר עם קרן לייזר והפלואורסצנטיות של כל תא נקראת. לאחר מכן נדון כיצד לפרש נתונים ממגרשי פיזור ציטומטריים של זרימה, ולבסוף, נבחן כמה יישומים של טכניקה זו.

Procedure

מחזור התא מתייחס למערך התהליכים התאיים והביוכימיים המתרחשים בתוך תא המוביל לחלוקתו. תא עובר בשלבים שונים של המחזור, והזמן שנדרש להשלמת תהליך זה הוא כמעט קבוע עבור סוג תא. כל סטייה ממשך זמן זה מעידה על חלוקת תאים חריגה. לכן, ניתוח מחזור התא הופך להיות כלי שימושי מאוד עבור ביולוגים המעוניינים …

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Cell Cycle Analysis. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos