Journal
/
Biochemistry
/
En Western Blotting-protokollen for et lille antal hæmatopoietisk stamceller
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
A Western Blotting Protocol for Small Numbers of Hematopoietic Stem Cells

En Western Blotting-protokollen for et lille antal hæmatopoietisk stamceller

DOI:
10.3791/56855-v

•

08:45 min

•

August 22, 2018

•

, ,
1Division of Experimental Hematology,Cincinnati Children’s Hospital Medical Center, 2Department of Cell and Developmental Biology, Abramson Family Cancer Research Institute,Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, 3Department of Obstetrics and Gynecology, Southwest Hospital,Third Military Medical University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:48Sample Preparation
  • 04:20Electrophoresis, Transfer, and Block
  • 05:30Antibody Labeling and Detection
  • 06:09Results: Use of Optimized Western Blotting Technique to Analyze Small Numbers of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells
  • 07:56Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

En standard Western blotting protokol var optimeret til at analysere så få som 500 hæmatopoietisk stamceller eller stamceller. Optimering indebærer omhyggelig håndtering af cell sample, begrænse overførsler mellem rør og direkte lysing celler i Laemmli prøvebuffer.

Tags

Western BlottingHematopoietic Stem CellsProtein AnalysisCell SortingProtein QuantificationLow Cell NumberCell LysisSample PreparationCentrifugationPhosphatase InhibitorsProtease InhibitorsLaemmli Buffer

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Brug Stillads Liposomer at Rekonstituer Lipid-proksimal protein-protein interaktioner<em> In vitro</em

SorLA og CLC: CLF-1-afhængig Nedregulering af CNTFRa som demonstreret ved Western blotting, Inhibering af lysosomale enzymer, og Immunocytokemi

Antistatiske Microgravimetry at studere bindende dynamikken i Phospholipid bindende Protein Annexin A2 til fast-understøttet Lipid dobbeltlag ved hjælp af et Quartz Resonator

Robust sammenligning af Protein niveauer på tværs af væv og udvikling ved hjælp af standardiserede kvantitative Western Blotting

En semi-High-gennemløb tilpasning af NADH-koblede ATPase assay til screening små molekyle hæmmere

En hurtigt forøget Tethered-Svømning Maximal protokol for cardiorespiratory vurdering af svømmere

A High-Throughput Enzyme-Coupled Activity Assay to Probe Small Molecule Interaction with the dNTPase SAMHD1

Udvikling af en Lateral Flow immunokromatisk strimmel til hurtig og kvantitativ påvisning af små molekyleforbindelser

Generering af selvopsamlende menneskehjerteorganoider afledt af pluripotente stamceller

Syntese af Masarimycin, en lille molekylehæmmer af grampositiv bakterievækst

Read Article