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Incorporation de ribonucléotide Experimentation : Strand spécifiques détection des ribonucléotides dans le génome de la levure et mutagénèse induite par la ribonucléotide de mesure
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Studying Ribonucleotide Incorporation: Strand-specific Detection of Ribonucleotides in the Yeast Genome and Measuring Ribonucleotide-induced Mutagenesis
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Incorporation de ribonucléotide Experimentation : Strand spécifiques détection des ribonucléotides dans le génome de la levure et mutagénèse induite par la ribonucléotide de mesure

DOI:
10.3791/58020-v

•

09:04 min

•

July 26, 2018

•

, ,
1Genome Integrity and Structural Biology Laboratory,National Institute of Environmental Health Sciences, NIH, DHHS

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:49Alkaline Hydrolysis of Genomic DNA
  • 02:36Strand specific Southern Blot: Transfer
  • 04:37Strand-specific Southern Blot: Hybridization
  • 06:48Results: Assessment of Ribonucleotide Incorporation into DNA
  • 08:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Ribonucléotides sont parmi les plus abondantes nucléotides non-canoniques incorporés dans le génome au cours de la réplication de l’ADN nucléaire eucaryote. Si pas correctement supprimé, ribonucléotides peuvent provoquer de mutagenèse et dommages à l’ADN. Nous présentons ici deux approches expérimentales qui sont utilisés pour évaluer l’abondance de l’incorporation de ribonucléotide dans l’ADN et de ses effets mutagènes.

Tags

Keywords: Ribonucleotide IncorporationStrand-specific DetectionYeast GenomeRibonucleotide-induced MutagenesisAlkaline Gel ElectrophoresisSouthern BlottingGenomic DNAPotassium HydroxideAlkaline DNA Loading BufferAgarose GelSodium HydroxideEDTADNA Size MarkerNeutralization BufferSYBR Gold StainUV TransilluminatorAlkaline Transfer BufferNylon MembraneCapillary Action

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