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Méthodes de transfert d'énergie par résonance à molécule unique pour l'étude en temps réel de la résolution de jonction Holliday par GEN1
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Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer Methods for Real-Time Investigation of the Holliday Junction Resolution by GEN1
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Méthodes de transfert d'énergie par résonance à molécule unique pour l'étude en temps réel de la résolution de jonction Holliday par GEN1

DOI:
10.3791/60045-v

•

11:27 min

•

September 18, 2019

•

, , , , , , , ,
1Laboratory of DNA Replication and Recombination, Biological and Environmental Sciences and Engineering Division (BESE),King Abdullah University of Science and Technology (KAUST)

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:22Flow Cell Preparation
  • 03:01Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer (smFRET) Experiments
  • 06:25Sm-FRET Data Analysis
  • 07:10Two-Color Alternating Excitation (ALEX) FRET Experiment and Analysis
  • 08:24Results: Representative Real-Time HJ Resolution Investigation
  • 10:13Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Présenté ici est un protocole pour effectuer un transfert d'énergie de résonance de résonance de F'rster à l'étude de la résolution de HJ. L'excitation alternée bicolore est utilisée pour déterminer les constantes de dissociation. Un seul temps de temps smFRET est ensuite appliqué dans les essais de clivage en temps réel pour obtenir la distribution de temps d'arrêt avant la résolution HJ.

Tags

Single-moleculeFörster Resonance Energy Transfer (FRET)Holliday JunctionGEN1Real-time InvestigationEnzymatic SystemsSingle-molecule MethodsBiomolecular InteractionsOptical And Force MeasurementsSingle-channel Flow CellQuartz SlideDouble Adhesive SheetPolytetrafluoroethylene TweezersPolyethylene TubingEpoxy GlueAvidinPBS

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