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Métodos de transferencia de energía por resonancia de una sola molécula para la investigación en tiempo real de la resolución de Holliday Junction por GEN1
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer Methods for Real-Time Investigation of the Holliday Junction Resolution by GEN1
DOI:

11:27 min

September 18, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:22Flow Cell Preparation
  • 03:01Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer (smFRET) Experiments
  • 06:25Sm-FRET Data Analysis
  • 07:10Two-Color Alternating Excitation (ALEX) FRET Experiment and Analysis
  • 08:24Results: Representative Real-Time HJ Resolution Investigation
  • 10:13Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aquí se presenta un protocolo para la realización de la transferencia de energía de resonancia de una sola molécula de la resonancia de la unidad para estudiar la resolución hj. La excitación alterna de dos colores se utiliza para determinar las constantes de disociación. El smFRET de lapso de tiempo de un solo color se aplica en ensayos de escisión en tiempo real para obtener la distribución del tiempo de permanencia antes de la resolución de HJ.

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