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Metodi di trasferimento di energia di risonanza a singola molecola per l'analisi in tempo reale della risoluzione dello svincolo di Holliday da gen1
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Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer Methods for Real-Time Investigation of the Holliday Junction Resolution by GEN1
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Metodi di trasferimento di energia di risonanza a singola molecola per l'analisi in tempo reale della risoluzione dello svincolo di Holliday da gen1

DOI:
10.3791/60045-v

•

11:27 min

•

September 18, 2019

•

, , , , , , , ,
1Laboratory of DNA Replication and Recombination, Biological and Environmental Sciences and Engineering Division (BESE),King Abdullah University of Science and Technology (KAUST)

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:22Flow Cell Preparation
  • 03:01Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer (smFRET) Experiments
  • 06:25Sm-FRET Data Analysis
  • 07:10Two-Color Alternating Excitation (ALEX) FRET Experiment and Analysis
  • 08:24Results: Representative Real-Time HJ Resolution Investigation
  • 10:13Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Presentato qui è un protocollo per l'esecuzione di trasferimento di energia di risonanza monomolecola di Fàrster per studiare la risoluzione HJ. L'eccitazione alternata a due colori viene utilizzata per determinare le costanti di dissociazione. Il time lapse a colori singolo smFRET viene quindi applicato nei saggi di scissione in tempo reale per ottenere la distribuzione del tempo di dimora prima della risoluzione HJ.

Tags

Single-moleculeFörster Resonance Energy Transfer (FRET)Holliday JunctionGEN1Real-time InvestigationEnzymatic SystemsSingle-molecule MethodsBiomolecular InteractionsOptical And Force MeasurementsSingle-channel Flow CellQuartz SlideDouble Adhesive SheetPolytetrafluoroethylene TweezersPolyethylene TubingEpoxy GlueAvidinPBS

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