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Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Isolamento de células-tronco a partir de culturas esferóides tridimensionais

DOI:
10.3791/60357-v

•

09:06 min

•

December 13, 2019

•

, , , ,
1Department of Urology, College of Medicine,University of Illinois at Chicago, 2Department of Pathology, College of Medicine,University of Illinois at Chicago, 3University of Illinois Cancer Center, College of Medicine,University of Illinois at Chicago

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:16Culture and Maintenance of HPrEC Cells in 2D
  • 02:30Labeling HPrEC with BrdU, CFSE, or Far Red Pro-dyes
  • 03:24Prostasphere Formation in the 3D Basement Membrane Culture System
  • 04:27Isolation of the CFSE Label-retaining Prostate Stem Cells by FACS Sorting
  • 06:45Results: Evaluation of the Sphere Based Label-retaining Assay
  • 08:03Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Usando células epitelia de próstata primárias humanas, relatamos um novo método livre de biomarcadores de caracterização funcional de células semelhantes a troncos por um ensaio de retenção de rótulos à base de esferóides. Um protocolo passo a passo é descrito para a rotulagem de células BrdU, CFSE ou Far Red 2D; formação tridimensional de esferóides; identificação de células-tronco de retenção de rótulos por imunocitoquímica; e isolamento pela FACS.

Tags

Stem CellsSpheroid CultureLabel-retention AssayCFSEFar RedProstate CancerEpithelial Cells3D CultureCell IsolationTherapeutic ResistanceCancer Stem Cells

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