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एक सेल प्रकार विशिष्ट पैमाने पर अरबीdopsis थैलियाना रूट विकास की जांच करने के लिए रिबोसोम एफ़िनिटी शुद्धि (ट्रैप) का अनुवाद
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) to Investigate Arabidopsis thaliana Root Development at a Cell Type-Specific Scale
DOI:

09:41 min

May 14, 2020

, ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:08Propagation and Sterilization
  • 01:36Plating
  • 02:20Tissue Treatment (Optional)
  • 02:51Harvesting
  • 03:39Tissue Grinding and Homogenization
  • 04:39Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing
  • 05:34Immunoprecipitation
  • 06:49Lab Supply Reconditioning
  • 07:38Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment
  • 08:47Conclusion

Summary

Automatic Translation

राइबोसोम आत्मीयता शुद्धिकरण (ट्रैप) का अनुवाद करने से अंगों और ऊतकों के न्यूनतम प्रसंस्करण के साथ विकासात्मक कार्यक्रमों को विच्छेदन करने की संभावना प्रदान होती है। प्रोटोकॉल एक हरे फ्लोरोसेंट प्रोटीन (GFP) लेबल राइबोसोमल उपइकाई के साथ लक्षित कोशिकाओं से उच्च गुणवत्ता वाले आरएनए पैदावार । डाउनस्ट्रीम विश्लेषण उपकरण, जैसे क्यूआरटी-पीसीआर या आरएनए-सीक्यू, ऊतक और सेल प्रकार-विशिष्ट अभिव्यक्ति प्रोफाइल को प्रकट करते हैं।

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