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ウイルス様粒子(「ナノブレード」)を介した不死化細胞および初代細胞におけるCas9/sgRNAリボヌクレオタンパク質複合体の送達
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Delivery of the Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex in Immortalized and Primary Cells via Virus-like Particles (“Nanoblades”)
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ウイルス様粒子(「ナノブレード」)を介した不死化細胞および初代細胞におけるCas9/sgRNAリボヌクレオタンパク質複合体の送達

DOI:
10.3791/62245-v

•

09:23 min

•

March 31, 2021

•

, , ,
1LBMC, Laboratoire de Biologie et Modélisation de la Cellule Univ Lyon, ENS de Lyon, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR 5239, INSERM, U1210, Lyon, 69007, France, 2CIRI, Centre International de Recherche en Infectiologie Univ Lyon, Inserm, U1111, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR5308, ENS de Lyon, F-69007, Lyon, France

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:56Nanoblade Preparation
  • 02:45Concentration of Nanoblades on a Sucrose-Cushion
  • 04:16Monitoring Cas9 Loading Within Nanoblades and Transduction of Cells
  • 06:24Results: Characterization of Nanoblades
  • 08:29Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

我々は、Cas9/シングルガイドRNA(sgRNA)リボヌクレオタンパク質複合体をウイルス様粒子内にロードするためのシンプルで安価なプロトコルを開発しました。「ナノブレード」と呼ばれるこれらの粒子は、不死化および初代細胞ならびにインビボでCas9/sgRNA複合体の効率的な送達を可能にする。

Tags

Keywords: Cas9SgRNARibonucleoproteinVirus-like ParticlesNanobladesGenome EditingHEK 293T CellsTransfectionUltracentrifugationSucrose Gradient

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