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2D- und 3D-humaninduzierte pluripotente Stammzell-basierte Modelle zur Sezierung der primären Ciliumbeteiligung während der neokortikalen Entwicklung
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1Imagine Institute, INSERM UMR 1163,Université de Paris, 2Imagine Institute, iPSC Core Facility, INSERM UMR U1163,Université de Paris, 3Necker Bio-image Analysis platform of the SFR Necker, 4Imagine Institute, Cell Imaging Platform, INSERM-US24-CNRS UMS 3633 Structure Fédérative de Recherche Necker, INSERM UMR U1163,Université de Paris, 5Fédération de Génétique, Hôpital Necker-Enfants Malades,Assistance Publique Hôpitaux de Paris, 6Pediatric Neurology,APHP- Necker Enfants Malades Hospital
Chapters
- 00:07Introduction
- 01:42Generation of 2D hIPS Cell-Based Models of Neocortical Development
- 02:56Generation of Dorsal Forebrain Organoids
- 04:56In toto Immunolabeling, Clearing, and Lightsheet Acquisition of Dorsal Forebrain Organoids
- 07:00Immunostaining and Clearing of Free-Floating Sections of Dorsal Forebrain Organoids
- 09:20Representative Results
- 13:11Conclusion
Wir präsentieren detaillierte Protokolle für die Erzeugung und Charakterisierung von 2D- und 3D-Modellen für humane induzierte pluripotente Stammzellen (hIPSC) der neokortikalen Entwicklung sowie ergänzende Methoden, die eine qualitative und quantitative Analyse der primären Cilium (PC) -Biogenese und -Funktion ermöglichen.
