Protocol
BEMÆRK: Alle procedurer udføres her blev forelagt for og godkendt af IACUC (Office of Research Compliance) og blev gennemført efter NIH retningslinjer. Mus, der anvendes i den adfærdsmæssige test paradigme var naiv og ikke anvendes til andre tests. Den C57BL / 6 vildtype og Knock Out mus anvendes i denne protokol er blevet beskrevet tidligere 9 og data her, er fra dette manuskript.
1. Forberedelse af Test Room og åben mark Apparatur
- Brug en multipel enhed åben mark labyrint (OFM) bestående af fire aktivitet kamre blev anvendt til denne analyse (figur 1). Hvert kammer måles 50 cm (længde) x 50 cm (bredde) x 38 cm (højde) og er fremstillet af hvidt høj densitet og ikke-porøs plast.
- Tekstur gulvet i labyrinten for trækkraft under ambulation mens labyrint vægge var glatte. Maze kvadranter var helt tomt i forbindelse med denne test. I betragtning af resten af denne protocol, vil en enkelt kvadrant af labyrinten beskrevet ovenfor anvendes til at påvise OFM.
- Tør kammer med en 95% ethanol før brug og før efterfølgende test for at fjerne eventuelle duft spor efterladt af den tidligere emne musen.
- Lad ethanol fordampe helt, før teste mus. Dette kan tage 5-10 min mellem hver test session.
- Til denne analyse anvendes SMART Video Tracking software fra PanLab / Harvard Apparatus at registrere og vurdere musen.
BEMÆRK: Enhver kommerciel video sporing kamera og software kan bruges til at spore testpersonen og vurdere resultater fra åben mark labyrint. Det er meget vigtigt for slutbrugeren at forstå, hvordan at kalibrere og køre software, der anvendes for hver enkelt analyse. Uanset videokamera og tracking software anvendes, opnås de bedste resultater, når kameraet og software er korrekt kalibreret i henhold til producentens anvisninger. - Udfør test ina standard oplyste rum stand til at indeholde labyrint-apparatet og computeren kræves for at køre softwaren. Hæng videokamera over labyrinten enten ved at knytte den til loftet eller ved at bruge nogen forhøjede støtte, som gør det muligt for kameralinsen for at se hele labyrint området (figur 2).
- Da den menneskelige administrator af testen, skal du sørge for at have nok plads i plads til at være helt uobserverbare af forsøgspersonerne i labyrinten, så for ikke at påvirke musenes adfærd.
2. Forberedelse af Softwaren til måling af aktivitetsdata
- Åbn Video Tracking software.
- Når softwaren åbnes, skal du flytte markøren til "Single-emne sporing" valgmulighed findes under fanebladet "Data Acquisition" og enkelt klik for at åbne denne mulighed.
- Vælg "Static Baggrund" valgmulighed nederst på skærmen.
- Når du har valgt "Static Baggrund" er valgtn, er det nødvendigt at anvende software til at tage et billede af labyrinten før tilsætning af forsøgspersoner. For at gøre dette, skal du flytte markøren til "Foto" knappen nederst på skærmen, og enkelt klik.
BEMÆRK: Softwaren vil tage et billede af forløbet uden testpersonen, som vil blive trukket fra det billede, taget under sporing proces. Dette resulterer i kun bevægelse af patienten, der analyseres af softwaren. - Bekræft, at baggrundsbilledet taget ovenfor er helt fjernet af tracking software ved at flytte markøren til "Test" knappen nederst på skærmen, og klikke én gang. En solid hvid felt vises, hvis baggrundsbilledet er helt fjernet fra sporingen billedet. Hvis lysforholdene ændrer eller labyrinten ved et uheld flyttes, vil du se sorte "skygger" i dette felt angiver de to billeder ikke helt sammenfaldende. For at afhjælpe denne situation, blot gentage stes 2.4 ovenfor.
- Efter bekræftelse indstillinger baggrund, skal du bruge Timing indstilling til at konfigurere den måde, tiden er styret under købet. For at gøre dette, skal du flytte markøren til fanen "Konfiguration" og klik en gang på "Timings" overskrift. Brug den nyåbnede vindue for at indtaste eksperimentelle parametre.
- Til denne protokol, valgte "Programmeret tid" indstilling som 10 min sporing periode. Indstil "latenstid" til 5 sek at give brugeren tid til at placere musen i midten af labyrinten og bevæge sig væk før påbegyndelse af sporing. Indtast "Acquisition" på 10 minutter under hele testen. Indstil "Stop kontrol" sat til "Når programmeret tid (10 min) er forbi", som automatisk slukker for kameraet og tracking funktionen af softwaren.
- Flyt markøren til "Luk" knappen efter alle tider er blevet indstillet til at lukke vinduet. Du er nu klar til at begynde testening procedure.
3. Administration af Open Field Test
BEMÆRK: softwarepakke anvendes i denne protokol tillader sporing af op til 16 individuelle mus på én gang. For at lette udførelse og som nævnt ovenfor, protokollen beskrevet her er for en enkelt mus ved hjælp af en enkelt kvadrant af OFM. For udstyr i brug i denne protokol, kan maksimalt 4 individuelle mus spores ved hjælp hver kvadrant af labyrinten. Hvis udnytte en multi-kabinet labyrint, efter at placere den første emne mus i sin definerede kvadrant, placere de resterende mus i deres respektive labyrint kvadrant til sporing analyse. Med henblik på denne protokol, vil yderligere instruktion være specifikke for en enkelt kvadrant af labyrinten.
- Bring mus i deres hjem bure fra deres bolig værelse ind i test værelse. Lad mus for at akklimatisere til proceduren plads til mindst 30 minutter før testen startes.
- Fjern en enkelt mOuse fra hjemmet bur ved forsigtigt fat sin hale og placere musen i midten af det åbne felt labyrint mens samtidig aktivering af SMART-softwaren ved en enkelt klikke på knappen Start for at begynde at spore musen. Det er normalt, musen til at flytte straks til periferien vægge labyrinten og timingen af frigivelse og sporing indfangning af musen skal falde sammen for at optage denne bevægelse.
- Tillade fri og uafbrudt bevægelse af emnet mus hele den respektive kvadrant af labyrinten for en enkelt 10 min periode, i hvilken tid, vil tracking software optage bevægelse (figur 3).
- Ved afslutningen af testperioden, afhente emnet musen forsigtigt, fjerne det fra labyrinten og returnere det til sin hjem bur.
- Før rengøring af labyrinten, visuelt tælle fækale Boli pellets stede i labyrinten og manuelt optage numrene til yderligere analyse.
- Fjern alle fecal pellets og tør alle pletter af vandladning. Spray gulv og vægge i labyrinten kvadrant med 95% ethanol og tørre ned med en ren køkkenrulle. Lad ethanolopløsning tørre fuldstændigt før testning af andre mus.
- Gentag proceduren med den næste musen.
4. Måling og analyse af adfærd under Test Procedure
BEMÆRK: Til måling, er tre aspekter af åben mark adfærd let karakteriseres ved hjælp af denne protokol (se diskussion). En kort instruktion om, hvordan at få adgang til disse målinger i videoen tracking software følger.
- Fra hovedskærmen for SMART-softwaren, skal du flytte markøren til fanen "zoner" og enkelt klik "Definition" for at åbne Zone Editor.
- Følg de detaljerede instruktioner i SMART software Brugervejledning do definere zoner eller gitre til overlay på sporing stier. Her blev software anvendes til at definere en 5 x 5 gitter på 10 cm kvadrater, der dækker gulvet i labyrinten (
- Fra hovedskærmen for SMART-softwaren, skal du flytte markøren til fanen "Analyser" og enkelt klik for at åbne Data Analysis vinduet.
- Flyt markøren til fanen "File" og åbn Zone fil oprettet ovenfor.
- Flyt markøren til fanen "Konfiguration" og åbn "Track Analysis" valgmulighed. Dette vil åbne "Single-emne analyse konfiguration" vinduet.
- Flyt markøren til "Standard" fanen og flyt "Rejste afstanden" parameter fra den tilgængelige parametre boks (venstre side) til Parametre boksen Inkluderet (højre side).
- Flyt markøren til fanen "zoner Transitions" og flytte alle relevante parametre til kassen Inkluderet parametre som ovenfor.
- Sørg for, at "Full Track" er markeret i bunden af vinduet.
- Move markøren til knappen OK, og luk Single-emne analyse konfigurationsvinduet.
BEMÆRK: Afhængigt af analysen, du ønsker at udføre, kan mange andre muligheder vælges i dette vindue for at mine data fra analysen. Læs den detaljerede brugervejledning til dine specifikke program at afgøre, hvilke parametre der er vigtigst for analyse af dine data.
- Under fanen Filer øverst til venstre i programvinduet, skal du åbne enkeltfag spor vindue og placere et flueben ved siden af alle spor, der analyseres. Flyt markøren til flueben knappen øverst i vinduet, og klik for at lukke Track Stifinder.
- Flyt markøren til "Go" knappen i Data Analysis vinduet og enkelt klik at indlede analysen af spordata.
- Analyse af data kan udlæses som enten ASCII tekstfiler, eller det kan direkte eksporteres til et Excel-regneark. Bruge output værktøjer af software program, du bruger til produktionen af data til eget brug.
BEMÆRK: samlede distance og tid tilbragt i angivne zoner udsendes efter dataanalyse trinene ovenfor. Igen understreges det, at de skridt til at nå disse målinger er repræsenteret her, vil variere afhængigt af brugerens software, der bruges. Men selve dataene og fortolkningen af resultaterne bør være ens uafhængigt af programmet tidligere. Det er også værd at bemærke, at test administrator partiskhed fjernes fra denne protokol, da alle de indsamlede kvantificeres data målt af softwaren og ikke administratoren data. Der er således ingen qualifiable element til de indsamlede som beskrevet data.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Det gennemsnitlige antal individer pr stamme af testede i de fleste tilfælde mus er ca. 20 til at generere tilstrækkelig statistisk relevans. Imidlertid kan dette antal være i intervallet 8-30, afhængigt af mus tilgængelighed. Afhængigt af målingen eller sammenligninger kræves, er det også gunstigt at anvende aldersmatchede emner.
Den første og velsagtens vigtigste specifik parameter at måle på åben mark Maze er total ambulant distance. Mens måleenheden er irrelevant med henblik på sammenligning, er det oftest udtrykt metriske måling (cm). I de eksperimentelle data, der præsenteres her (figur 5), Vild type (WT) eller normale C57BL / 6-mus viser lignende ambulant evne til en specifik knock-out C57BL / 6 musestamme (KO). Når den samlede distance gennemkøres er ens mellem stammer eller behandlinger, er en yderligere analyse af følelsesmæssige adfærd forenklet fordi bevægelsesaktivitet effektivt fjernes fra EQUAtion. Hvis der er betydelige forskelle i bevægeapparatet evne af de testede mus, analyser yderligere såsom zone poster eller tid tilbragt i visse udpegede områder i labyrinten kan være skæv på grund af inaktivitet i stedet for stamme eller behandlingseffekt. Teknikker er til for at tage højde for ulige bevægelsesaktivitet, men disse er oftest specifikke for forskningsspørgsmålet.
Som alt ambulant afstand mellem de to musestammer var ens, var vi i stand til at analysere thigmotaxis eller tendens til et emne til at forblive tæt på vægge, i WT versus KO mus (figur 6). Graden af thigmotaxis er valideret som et mål for anxiogene adfærd hos mus 10. Thigmotaxis stiger som angst stiger. Ved hjælp af SMART-softwaren blev individuelle zoner overlejret på stierne tilbagelagt af mus (figur 3) og tid tilbragt i indre zoner versus ydre zoner beregnes og medtages som en funktion af den samlede tid (10 min) i than labyrint. I dette tilfælde KO-mus viste signifikant højere anxiogen adfærd end deres WT modstykker. En repræsentativ bevægelsesbanen kan ses i figur 4, hvor WT mus sti krydser de midterste områder af labyrinten på en meget større frekvens end den KO mus, som forbliver tæt på væggene i labyrinten selvom distance både mus lignende. Vi kan konkludere, at de KO-mus udviser højere angst forbundet adfærd end at gøre WT mus.
For yderligere at støtte forøget angst niveauer i KO-mus, fecal Boli tilbage i labyrinten efter 10 min testperiode blev talt af observatøren når testpersonen blev fjernet (figur 13). Efter den populære opfattelse, at meget følelsesladet dyr udviser øget afføring, KO-mus udviser betydelige stigninger i fækal boli stede i forhold til WT mus. Dette korrelerer med niveauerne af thigmotaxis målt i KO-mus og viser tha t knock-out mus anvendt i denne undersøgelse viste øget emotionalitet og angst i forhold til deres WT modstykker.
Figur 1. Eksempel på en fire kvadrant OFM. Den OFM afbilledet blev opnået fra San Diego Instruments og blev anvendt i alle testprocedurer er beskrevet. Dimensioner på en kvadrant af labyrinten er i centimeter, og hver kvadrant identificeres (Q1-Q4).
Figur 2. Eksempel på overhead-kamera billede af en fire kvadrant OFM. Billedet viste repræsenterer kameravisningen anerkendt af SMART-softwaren før sporing procedurer. Hver kvadrant er mærket (Q1) til (Q4) og vil indeholde en enkelt mus til sporing.
Figur 3. Sammenligning af spor stier til WT og KO-mus. Repræsentative spor for enten WT eller KO mus er vist. Hvert spor repræsenterer den samlede distance, som spørgsmålet i løbet af 10 min tid testperioden. Begyndelsen punkt (B) og slutpunktet (E) i sporingen er angivet. WT eksempel spor krydser i den centrale del af labyrinten med regelmæssige mellemrum, mens KO sporet forbliver tæt i nærheden af væggene i labyrinten angivne øget thigmotaxis eller angst-relateret adfærd.
Figur 4. Zone overlay bruges til at fortolke sporingsdata for thigmotaxis fra OFM. Brug af SMART softwareanalyse pakke, var en serie på 10 x 10 cm zoner identified og anvendes til at evaluere omfattet spor. Den ydre zone bestod af 16 blokke, som er identificeret, mens den indre zone bestod af 9 blokke og er skraveret. Større tidsforbrug i de ydre zoner labyrinten optages som øgede thigmotaxis og er tegn på forstærket angst-relateret adfærd.
Figur 5. samlede distance i OFM. WT (n = 24) og KO (n = 27) blev musene udsat for OFM og samlede afstand i centimeter for deres respektive spor blev kombineret og analyseret statistisk at visualisere eventuelle forskelle i ambulation. WT og KO-mus udført på samme måde i OFM da samlede distance blev målt. Resultaterne for de data, blev udtrykt som gennemsnit +/- SEM statistiske analyser (t -tests) blev udført ved anvendelse af Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) og SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). [Data er modifiéd fra Ramesh Babu, et al, 2008.]
Figur 6. Tid tilbragt i indre og ydre zoner af OFM. WT (n = 24) og KO (n = 27) blev musene udsat for OFM og tidsforbrug i indre og ydre zoner af labyrinten analyseret statistisk for forskelle i mus stammer. Tid brugt i de yderste zoner af labyrinten identificeret i figur 7 foranstaltninger thigmotaxis eller væg-hugging adfærd og er tegn på angst-relateret adfærd. KO-mus udviste højere angst foranstaltninger end til WT baseret på thigmotaxis. Resultaterne for de data, blev udtrykt som gennemsnit +/- SEM statistiske analyser (t -tests) blev udført ved anvendelse af Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) og SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0,05. [Data er modificeret fra Ramesh Babu, et al, 2008.]
Figur 7. Fækale Boli aflejringer i OFM. WT (n = 24) og KO (n = 27) blev musene lov til at fuldføre en 10 min test i OFM før de fjernes fra labyrinten tilbage til deres bure. Efter mus blev fjernet, blev antallet af afføringer eller fækale Boli indskud manuelt optalt af iagttageren. Øget antal boli kan være tegn på øget angst og emotionalitet af emnet dyr. KO-mus udviste en stigning i fækal boli sammenlignet med WT. Resultaterne for de data, blev udtrykt som gennemsnit +/- SEM statistiske analyser (t -tests) blev udført ved anvendelse af Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) og SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0,05. [Data oprindeligt udgivet i Ramesh Babu, et al, 2008.]
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Marken Maze er en af de mest udbredte platforme i Dyreadfærdsundersøgelser. En række vigtige konventionelle og etologiske parametre 2,4 kan indsamles og analyseres under udførelsen af OFM. Disse data gør det muligt for forskeren at måle adfærd lige fra overordnet bevægelsesaktivitet til angst-relaterede følelsesmæssige adfærd 8. Men brug af OFM er ikke uden mangler. En confounding spørgsmål er den brede vifte af statiske variable, som kan manipuleres i løbet af en testsession. Eksempler omfatter tid, lysforhold og objekt inklusion roman. Variation i forsøgsprotokol opsætning og design, som er afgørende for at støtte et bredt spektrum af applikationer, kan gøre det vanskeligt at sammenligne studier. Når variabilitet, såsom forskellige baggrunde eller transgene mus linjer og lægemiddelbehandlinger er inkluderet, kan vanskeligheden ved test sammenligninger stige endnu mere. På trods af disse problemer, OFM er fortsat et af de mest anvendte teknikker i gnaver-adfærdsforskning. Her diskuterer vi opnået fra OFM resultater og deres analyse som den vedrører mus angst og emotionalitet.
Her er tre aspekter af åben mark adfærd let karakteriseres ved hjælp af denne protokol: 1) Samlet distance, (i cm) under hele timede del af testen; 2) Thigmotaxis eller et mål for procent af 10 min totale testtid at emnet forbliver støder op til den ydre væg af den labyrint, som er indikativ for angst-lignende opførsel; 3) Antallet af fækale pellets (Boli) tilbage i kvadrant, efter at emnet er fjernet tælles. Defækation er en negativt relateret foranstaltning følelsesmæssighed gnavere 5 og kan anvendes til at indikere niveauer af angst i mus emne. En kort instruktion om, hvordan at få adgang til disse målinger i SMART-softwaren følger.
Lokomotorisk aktivitet hos forsøgspersonerne er vigtigt atskelne før analyse af OFM data eller for den sags skyld ethvert dyr adfærdsmæssige labyrint. Når man sammenligner forskellige stammer af mus eller forskellige virkninger af lægemiddelbehandlinger, den ambulante evne musen er altafgørende. Hvis locomotor evne er kompromitteret på grund af behandlingseffekt, derefter måle aktiviteter, der er afhængige af evnen af motivet til at flytte er beskæmmet. Derfor er det første skridt i dette forsøg var at sammenligne den samlede bevægelse mellem de to, der er omfattet stammer. Brug af emnet sporing funktion i SMART-softwaren, målte vi den samlede ambulant tilbagelagte afstand i labyrinten under testens varighed af to forskellige stammer af C57BL / 6 mus (Figur 4). Både vildtype (WT) og genetiske knock-out mus (KO) viste lignende ambulant evne. Der var ingen statistisk forskel i den samlede afstand (i cm) rejste enten muse linje i hele 10 min tidsramme af eksperimentet. Havde en stamme vist en signifikant forskel i ambulation sammenlignettil den anden, ville en mere specialiseret undersøgelse, eventuelt ved hjælp af andre adfærdsmæssige paradigmer, være forpligtet til at karakterisere forskellen. Men i dette tilfælde, ambulation af de omhandlede stammer var lig muliggør direkte brug af ujusterede OFM-afledte data til yderligere at undersøge anxiolytiske parametre. Det skal her bemærkes, at nogle forskere har fortolket høj aktivitet eller øge udforskende adfærd som et indeks for lav emotionalitet, mens andre forestille udforskende adfærd er uafhængig af emotionalitet 11. Man må erkende, at forskelle i bevægelsesaktivitet kan forvirre følelsesmæssige foranstaltninger 12. Men som alt ambulant distance var ens mellem musestammer her anvendte, aktivitetsniveauer af musene blev separeret fra emotionalitet faktorer.
Opdræt adfærd består af emne Dyr stående på begge bagpoter i en lodret oprejst stilling. Det betragtes som en udforskende adfærd og har været anvendt somet mål for angst i både OFM og Elevated Plus Maze 13. Men der er ingen klar indikation af, at opdræt adfærd er enten anxiolytisk eller anxiogene. Nogle undersøgelser tyder på øget opdræt er i konkordans med øget angst niveauer i mus 14, mens andre postulerer nedsat opdræt adfærd viser øget angst 15. Således, mens opdræt blev ikke analyseret her, afhængigt forsøgsprotokol og etologiske parametre undersøgte opdræt kunne anvendes til at skelne angst-linked adfærd fra simple ambulant adfærd.
Det er blevet foreslået, at måling af angst i gnavermodeller er meget mere kompliceret end at anvende en enkelt parameter i en enkelt labyrint miljø 16. Derfor bruger flere prøver eller flere foranstaltninger i en enkelt test kan evaluering af resultaterne styrke. Thigmotaxis eller væg-hugging adfærd er observeret i de fleste gnavere og er knyttet til angst relaterede værehaviors. Det er mest sandsynligt, bundet til en gnaver underliggende tilbøjelighed til at undgå store åbne områder eller områder med opfattet fare 17,18. Uanset den underliggende årsag, thigmotaxis er en vigtig angst-bundet adfærd, der ofte betragtes som udgangspunktet for yderligere specifik angst relaterede tests 19.
Thigmotaxis i OFM anvendes til at evaluere anxiolytisk, anxiogene og endog ikke-farmakologiske behandlinger. Angst relaterede lægemidler såsom diazepam og chlordiazepoxid har vist signifikante virkninger på museadfærd i OFM 4, mens dopaminagonister har vist, at D1 og D2 dopaminreceptorer er involveret i anxiogene effekter på grund af øget dopaminerge transmissioner 20. Der er også klare stamme sondringer som reaktion på mus angst-lignende adfærd i OFM 21. For eksempel BALB / c-mus, en albino dyrket i laboratoriet stamme af fælles hus mus, udvise større adfærdsmæssig reaktionakut stress end do C57BL / 6-mus 22. Derfor skal baseline variation i respons mellem individer skal tages hensyn til ved oprettelsen af de parametre, der er forbundet med test paradigmer og vælge, hvilke arter til brug for en bestemt problemstilling.
Det er også den populære opfattelse, at meget følelsesladet dyr udviser øget afføring. Dette synspunkt er blevet bekræftet af nogle, men gyldigheden af afføring som forskellig målestok for angst er blevet afhørt 23. Men da Hall oprindelige afhandling (1934) korrelere afføring begivenheder med emotionalitet hos gnavere, har en stor mængde litteratur om emnet bekræftede dette forhold 2. Nyere fund har vist, at afføringer faktisk kan være en nyttig indikator for følelsesmæssige angst-relaterede adfærd i relativt korte testperiode som udføres her i modsætning til lange observationer (30 min), hvor forskelle i svarene er mindre klare 21
Det er vigtigt at bemærke, at opførsel af mus i OFM er afhængige af deres taktile fornemmelser. Således beskadigelse eller mangel på knurhår til musene kan medføre et fald i målt angst-linked adfærd som musene mister taktile kontakt med væggene i labyrinten og indtaste de centrale dele lettere 3. Maze udforskning kan også være afhængig af mad eller vand afsavn, belysning under testproceduren eller endda på farven af labyrinten gulv 24. Det er vigtigt at kontrollere disse variabler, samt eventuelle behandling inducerede faktorer, før tolkning OFM resultater for angstrelaterede adfærd. Detaljeret rapportering af alle testbetingelser i manuskripter er også afgørende for at fremme passende sammenligninger på tværs af studier.
Også, mens vi her diskuterer brugen af OFM som den vedrører motor bevægelse og emotionalitet af musene undersøgte den OFM kan også bruges til at teste andre adfærd such som ny objekt genkendelse og hukommelse 25. Afhængigt af den type hukommelse, der analyseres, kan tid i labyrinten med en hidtil ukendt objekt variere fra 5 min til 24 timer. Den lethed og fleksibilitet af labyrinten i det hidtil ukendte testobjekt anerkendelse giver mulighed for prøvning af kort- eller langsigtede hukommelse og kan anvendes til selektivt at analysere virkningerne af akut medicinsk behandling på et bestemt stadium af memory formation. Som konklusion OFM er en apikal test af ydeevne 26. Den angst-relaterede adfærd målt er kumulation af flere adfærdsmæssige underliggende processer. Således når et svar er påviseligt måles, er det ofte nødvendigt at undersøge dette svar yderligere at identificere en specifik defekt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Multi Unit Open Field Test | San Diego Instruments, Inc. | White 7001-0354 | Any single or multi unit open field maze can be used |
| SMART DT Tracking Software | PanLab/Harvard Apparatus | 76-0695 | Any tracking software can be utilized with this protocol |
| Sony 990x Video Camera Recorder | Sony | CCD-TRV328 | Any suitable video camera can be attached to computer for recording tracking profiles. |
References
- Hall, C. S. Emotional behavior in the rat: defecation and urination as measures of individual differences in emotionality. J. Comp. Psychol. 18, 385-403 (1934).
- Walsh, R. N., Cummins, R. A. The open field test: a critical review. Psychol. Bull. 83, 482-504 (1976).
- Prut, L., Belzung, C. The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review. Eur. J. of Pharm. 463, 3-33 (2003).
- Choleris, E., Thomas, A. W., Kavaliers, M., Prato, F. S. A detailed ethological analysis of the mouse open field test: effects of diazepam, chlordiazpoxide and an extremely low frequency pulsed magnetic field. Neurosci. Biobehav. Rev. 25, 235-260 (2001).
- Ramos, A. Animal Models of anxiety: do I need multiple tests. TIPS. 29, 493-498 (2008).
- Archer, J. Tests for emotionality in rats and mice: a review. Anim. Behav. 21, 205-235 (1973).
- Gray, J. A. Emotionality in male and female rodents: a reply to Archer. Brit. J. Psych. 70, 425-440 (1979).
- Carola, V., D’Olimpio, F., Brunamonti, E., Mangia, F., Renzi, P. Evaluation of the elevated plus-maze and open-field tests for the assessment of anxiety-related behavior in inbred mice. Behav. Brain Res. 134, 49-57 (2002).
- Ramesh Babu, J., Seibenhener, M. L., Peng, J., Strom, A. L., Kemppainen, R., Cox, N., Zhu, H., Wooten, M. C., Diaz-Meco, M. T., Moscat, J., Wooten, M. W. Genetic inactivation of p62 leads to accumulation of hyperphosphorylated tau and neurodegeneration. J. Neurochem. 106, 107-120 (2008).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice: influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Denenberg, V. H. Open-field behavior in the rat: what does it mean. Ann. N.Y. Acad. Sci. 159, 852-859 (1969).
- Stanford, S. C. The open field test: reinventing the wheel. J. Psychopharm. 21, 134-135 (2007).
- Ennaceur, A. Tests of unconditional anxiety – pitfalls and disappointments. J. Phys. Behav. 135, 55-71 (2014).
- Borta, A., Schwarting, R. K. Inhibitory avoidance, pain reactivity, and plus-maze behavior in Wistar rats with high versus low rearing activity. J. Phys. Behav. 84, 387-396 (2005).
- Costall, B., Jones, B. J., Kelly, M. E., Naylor, R. J., Tomkins, D. M. Exploration of mice in a black and white test box: validation as a model of anxiety. Pharmacol. Biochem. Behav. 32, 777-785 (1989).
- Bouwknecht, J. A., Paylor, R. Pitfalls in the interpretation of genetic and pharmacological effects on anxiety-like behavior in rodents. Behav. Pharm. 19, 385-402 (2008).
- Webster, D. G., Baumgardner, D. J., Dewsbury, D. A. Open field behavior in eight taxa of muriod rodents. Bull. Psychonom. Soc. 13, 90-92 (1979).
- Wilson, R. C., Vacek, T., Lanier, D. L., Dewsbury, D. A. Open field behavior in muroid rodents. Behav. Biol. 17, 495-506 (1976).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice: experimental designs and evaluation of general health, sensory functions, motor abilities and specific behavioral tests. Brain Res. 835, 18-26 (1999).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice. influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Miller, B. H., Schultz, L. E., Gulati, A., Su, A. I., Pletcher, M. T. Phenotypic characterization of a genetically diverse panel of mice for behavioral despair and anxiety. PLoS One. 5, e14458 (2010).
- Tannenbaum, B., Anisman, H. Impact of chronic intermittent challenges in stressor-susceptible and resilient strains of mice. Biol. Psych. 53, 292-303 (2003).
- Lister, R. G. Ethologically-based animal models of anxiety disorders. Pharmacol. Ther. 46, 321-340 (1990).
- Kulesskaya, N., Voikar, V. Assessment of mouse anxiety-like behavior in the light-dark box and open-field arena: role of equipment and procedure. Phys. Behav. 133, 30-38 (2014).
- Han, H., Du, W., Zhou, B., Zhang, W., Xu, G., Niu, R., Sun, Z. Effects of chronic fluoride exposure on object recognition memory and mRNA expression of SNARE complex in hippocampus of male mice. Biol. Trace Elem. Res. 158, 58-64 (2014).
- Barrow, P., Leconte, I. The influence of body weight on open field and swimming maze performance during the post-weaning period in the rat. Lab. Animals. 30, 22-27 (1996).
