In diesem Artikel zeigen wir eine Methode zur Glaskapillare Nadeln mit einem 50-um Lumen zu machen. Diese Technik reduziert die Schädigungen des Gehirns, minimiert passive Verbreitung von Drogen und ermöglicht eine genaue Ausrichtung in die Nager Gehirn.
Abstract
Mikroinjektionen in das Hirnparenchym sind wichtige Verfahren, die Drogen, virale Vektoren oder Zelltransplantaten liefern. Die Hirnverletzung, dass eine Injektionsnadel produziert während ihrer Flugbahn ist ein wichtiges Anliegen vor allem im Gehirn der Maus nicht nur für das Gehirn ist klein, aber manchmal auch mehrere Injektionen erforderlich sind. Wir zeigen hier eine Methode zur Glaskapillare Nadeln mit einem 50-Lumen um die erheblich reduziert die Hirnschäden und ermöglicht eine genaue Ausrichtung in die Nager Gehirn zu produzieren. Diese Methode erlaubt eine Lieferung von kleinen Mengen (20 bis 100 nl), reduziert Blutungen Risiken und minimiert passive Verbreitung von Drogen in das Hirnparenchym. Durch die Verwendung unterschiedlicher Größe der Kapillare Glasröhren oder dem Wechseln der Nadel Lumen, können verschiedene Arten von Substanzen und Zellen injiziert werden. Mikroinjektionen mit einer Glaskapillare eine erhebliche Verbesserung in Injektionstechniken und Tiefenhirnstimulation Targeting mit minimalen Kollateralschäden in kleinen Nagern.
Protocol
Machen Glasnadeln bevor Maus-Chirurgie: Legen Sie die Glaskapillare in einer Mikropipette Abzieher. Erhitzen Sie die Mitte des Glasrohres mit dem Glasrohr in der lokalisierten Bereich zu erweichen. Stretch das Glasrohr entlang seiner Längsachse durch eine anfängliche Abstand ausreicht, um eine Reduzierung der Durchmesser der Glasröhre in der lokalisierten Bereich verursachen. Halten Dehnung der Glasröhre, bis er bricht. Auf diese Weise sind zwei identische Single Barrel Nadeln e…
Discussion
Die Methode zeigte in diesem Video ist sehr nützlich für die meisten Medikamente oder viralen Vektoren in sehr genauen Orte in das Gehirn liefern. Einige der wichtigsten Vorteile dieser Technik sind die Zuverlässigkeit der Targeting-Punkt, die Richtigkeit der Injektionen und die geringe Größe der Hirnschädigung und Darm-Trakt Schaden 1, 2, 5, 6. Sobald die Technik ist standardisiert Bereich von mistargeting sollte 50 um oder weniger 1, 2. Zelltransplantate kann auch mit weiteren, 100-150 um <…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
OG-P wurde durch CONACyT s zu gewähren (CB-2008 bis 101476) und FRABA (686/10) unterstützt. AQ-H durch das National Institute of Health, der Howard Hughes Medical Institute, der Robert Wood Johnson Foundation und der Maryland Stem Cell Foundation unterstützt.
Gonzalez-Perez, O., Guerrero-Cazares, H., Quiñones-Hinojosa, A. Targeting of Deep Brain Structures with Microinjections for Delivery of Drugs, Viral Vectors, or Cell Transplants. J. Vis. Exp. (46), e2082, doi:10.3791/2082 (2010).