Focalización de estructuras profundas del cerebro con microinyecciones de entrega de medicamentos, vectores virales, o trasplantes de células
Summary
En este artículo, se muestra un método para fabricar agujas capilar de vidrio con una luz de 50 micras. Esta técnica reduce significativamente el daño cerebral, minimiza la difusión pasiva de las drogas y permite una segmentación precisa en el cerebro de roedores.
Abstract
Microinyecciones en el parénquima cerebral son procedimientos importantes para llevar medicamentos, vectores virales o los trasplantes de células. La lesión cerebral que produce una aguja de la inyección durante su trayectoria es una gran preocupación especialmente en el cerebro del ratón, no sólo para el cerebro es pequeño, pero también a veces se necesitan múltiples inyecciones. Mostramos aquí un método para producir agujas capilar de vidrio con una luz de 50 m que reduce significativamente el daño cerebral y permite una segmentación precisa en el cerebro de roedores. Este método permite una entrega de volúmenes pequeños (20 a 100 nl), reduce los riesgos de sangrado y reduce al mínimo la difusión pasiva de drogas en el parénquima cerebral. Mediante el uso de diferentes tamaños de tubos capilares, o cambiar la luz de aguja, varios tipos de sustancias y las células se pueden inyectar. Microinyecciones con un tubo capilar de vidrio representan una mejora significativa en las técnicas de inyección y cerebral profunda orientación con mínimo daño colateral en los roedores pequeños.
Protocol
Discussion
El método demostró en este video es muy útil para proporcionar la mayor parte de los fármacos o vectores virales en lugares muy precisos en el cerebro. Algunas de las principales ventajas de esta técnica son la confiabilidad del punto de focalización, la exactitud de las inyecciones y el pequeño tamaño de la lesión cerebral y daños en las vías 1, 2, 5, 6. Una vez que la técnica se estandarizó el rango de mala focalización que 50 micras o menos 1, 2. Los trasplantes de células tambié…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
OG-P fue apoyado por CONACyT s de subvención (CB-2008 a 101.476) y FRABA (686 décimos). AQ-H el apoyo del Instituto Nacional de Salud, el Instituto Médico Howard Hughes, la Fundación Robert Wood Johnson y la Fundación Madre Maryland celular.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Capillary glass tube | Wiretrol I | 5-000-1001 | ||
| Micropipette puller | Kopf | Model 730 | ||
| Microforge | World Precision Instruments | Model 48000 | ||
| Mineral oil | MSDS | M7700 | ||
| High-vacuum grease | Dow Corning | 05054-AB | ||
| Anesthesia: 2.5% Avertin | 2,2,2-tribromoethanol + tert-amyl alcohol, 1:1 w/v | |||
| Heater pad | Mastex | Model 900 | ||
| Stereotactic device | Kopf | Model Kopf-900 | ||
| Surgical scalpel blade # 15 | Medi-Cut | |||
| Micro driller | Ideal Micro Drill | 67-1000 | ||
| Fine forceps | Fine Scientific Tools | |||
| 1-μL Micropipette | Rainin | |||
| Parafilm M. | ||||
| Surgical microscope | Zeiss | Vasiorkop with Contraves system | ||
| Microinjector | Narishige | Model MO-10 |
References
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