Journal
/
生物工程
/
بروتوكول لعدة خروج المغلوب الجيني في ماوس الأورغانويدات المعوية الصغيرة باستخدام كريسبر-كونكاتيمر
JoVE 杂志
生物工程
This content is Free Access.
JoVE 杂志 生物工程
A Protocol for Multiple Gene Knockout in Mouse Small Intestinal Organoids Using a CRISPR-concatemer
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

بروتوكول لعدة خروج المغلوب الجيني في ماوس الأورغانويدات المعوية الصغيرة باستخدام كريسبر-كونكاتيمر

DOI:
10.3791/55916-v

•

11:53 min

•

July 12, 2017

•

, , , , ,
1Wellcome Trust – Medical Research Council Stem Cell Institute,University of Cambridge, 2Department of Genetics,University of Cambridge, 3Department of Pathology,Yonsei University College of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:50Cloning of gRNAs into the CRISPER-concatemer Vector
  • 03:40Assessing Success of Cloning by Restriction Digest
  • 05:28Preparing Intestinal Organoids for Electroporation
  • 08:08Electroporation
  • 10:36Results: Successful Generation of CRISPER-concatemers and Electroporation of Intestinal Organoids
  • 11:24Conlcusion

Summary

自动翻译

自动翻译

يصف هذا البروتوكول خطوات لاستنساخ متعددة رنا دليل واحد في دليل واحد ناقلات الحمض النووي الريبي المتجهات، والتي هي ذات فائدة خاصة في خلق ضربات قاضية متعددة الجينات باستخدام تقنية كريسبر / Cas9. ويظهر توليد ضربات قاضية مزدوجة في أورغانويدز الأمعاء باعتبارها تطبيق محتمل لهذه الطريقة.

Tags

Keywords: CRISPR-concatemerMultiple Gene KnockoutMouse Small Intestinal OrganoidsCRISPRGuide RNAsElectroporationSimultaneous KnockoutLoss Of Function StudiesParallel CompensationCloningBbs1 Shuffling ReactionThree GRNA ConcatemerFour GRNA Concatemer

Article

Embed

添加到播放列表

Usage Statistics

Related Videos

check_url/cn/55916?article_type=v

تصنيع أجهزة الاستشعار الكهروكيميائية الدنا للكشف Reagentless من الأحماض النووية والبروتينات والجزيئات الصغيرة
check_url/cn/55916?article_type=v

إنشاء ثنائي الأبعاد ركائز منقوشة على الحبس البروتين والخلايا
check_url/cn/55916?article_type=v

جهاز ميكروفلويديك لدراسة سلالات متميزة متعددة
check_url/cn/55916?article_type=v

منهج Decellularization لإنتاج وغير خلوي الطبيعية المعوية ماتريكس
check_url/cn/55916?article_type=v

رصد في الوقت الحقيقي من بين الخلايا الصفراء حمض حيوية باستخدام حمض الصفراء الاستشعار القائمة على الحنق ترميز وراثيا
check_url/cn/55916?article_type=v

بروتوكول ديسيلولاريزينج كوكليا الماوس لهندسة الأنسجة الإذن الداخلية
check_url/cn/55916?article_type=v

الكشف عن الأحماض النووية متعددة في صفيف شعرية البصرية
check_url/cn/55916?article_type=v

قمع النسخ الجيني قبل إعادة توجيه الأجهزة الخلوية مع المعدلات جينية الكيميائية
check_url/cn/55916?article_type=v

إجراء وسائط تصوير متعددة مع واحد Fluorescence المجهر
check_url/cn/55916?article_type=v

تحليل التعبير الجيني غشائي الخلايا المعرضة للإجهاد باستخدام عدة تدفق مواز-لوحة الدوائر للقص

Read Article