Journal
/
生物工程
/
פרוטוקול של נוקאוט גנים מרובים עכבר קטן Organoids באמצעות CISPR-concatemer
JoVE 杂志
生物工程
This content is Free Access.
JoVE 杂志 生物工程
A Protocol for Multiple Gene Knockout in Mouse Small Intestinal Organoids Using a CRISPR-concatemer
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

פרוטוקול של נוקאוט גנים מרובים עכבר קטן Organoids באמצעות CISPR-concatemer

DOI:
10.3791/55916-v

•

11:53 min

•

July 12, 2017

•

, , , , ,
1Wellcome Trust – Medical Research Council Stem Cell Institute,University of Cambridge, 2Department of Genetics,University of Cambridge, 3Department of Pathology,Yonsei University College of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:50Cloning of gRNAs into the CRISPER-concatemer Vector
  • 03:40Assessing Success of Cloning by Restriction Digest
  • 05:28Preparing Intestinal Organoids for Electroporation
  • 08:08Electroporation
  • 10:36Results: Successful Generation of CRISPER-concatemers and Electroporation of Intestinal Organoids
  • 11:24Conlcusion

Summary

自动翻译

自动翻译

פרוטוקול זה מתאר את השלבים לשיבוט מספר רב של מדריך RNAs לתוך אחד וקטור RNA concatmer מדריך, שהוא שימוש מיוחד ביצירת נוק-אאוט רב גנים באמצעות טכנולוגיית CRISPR / Cas9. הדור של נוקאאוטס כפול באורגנואידים במעיים מוצג כיישום אפשרי של שיטה זו.

Tags

Keywords: CRISPR-concatemerMultiple Gene KnockoutMouse Small Intestinal OrganoidsCRISPRGuide RNAsElectroporationSimultaneous KnockoutLoss Of Function StudiesParallel CompensationCloningBbs1 Shuffling ReactionThree GRNA ConcatemerFour GRNA Concatemer

Article

Embed

添加到播放列表

Usage Statistics

Related Videos

check_url/cn/55916?article_type=v

המצאה של אלקטרוכימי-DNA Biosensors לגילוי Reagentless של חומצות, חלבונים ומולקולות קטנות גרעין
check_url/cn/55916?article_type=v

יצירת דו מימדי מצעים Patterned עבור החזקת חלבון ו-Cell
check_url/cn/55916?article_type=v

מכשיר microfluidic ללימוד זני Distinct מרובים
check_url/cn/55916?article_type=v

Decellularization מתודולוגיה לייצור של המעיים מטריקס הטבעי acellular
check_url/cn/55916?article_type=v

ניטור בזמן אמת של תאיים חומצות מרה Dynamics שימוש חומצות מרה חיישן מבוסס סריג גנטי מקודד
check_url/cn/55916?article_type=v

פרוטוקול עבור Decellularizing Cochleae העכבר עבור הנדסת רקמות האוזן הפנימית
check_url/cn/55916?article_type=v

זיהוי ויזואלי של מספר חומצות גרעין ב מערך נימי
check_url/cn/55916?article_type=v

הדחקת שעתוק גנים על ידי ניתוב מחדש מכונות הסלולר עם המגבילים Epigenetic כימי
check_url/cn/55916?article_type=v

ניצוח מספר מצבי הדמיה עם מיקרוסקופ זריחה אחת
check_url/cn/55916?article_type=v

ניתוח ביטוי גנטי של תאי אנדותל נחשף להטיית מתח באמצעות מרובות במקביל-plate זרימה צ'יימברס

Read Article