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Isolamento de fibroblastos papilares e reticular da pele humana por triagem celular ativada por fluorescência
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遗传学
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JoVE 杂志 遗传学
Isolation of Papillary and Reticular Fibroblasts from Human Skin by Fluorescence-activated Cell Sorting

Isolamento de fibroblastos papilares e reticular da pele humana por triagem celular ativada por fluorescência

DOI:
10.3791/59372-v

•

09:14 min

•

May 07, 2019

•

, ,
1Skin, Endothelium Research Division, Department of Dermatology,Medical University of Vienna

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:00Sectioning of Human Skin Dermis into Papillary and Reticular Layers
  • 02:38Separation and Enzymatic Digestion of Epidermis and Dermis
  • 03:52Preparation of Single Cell Suspension and Erythrocyte Lysis
  • 05:58Culturing of Fibroblasts and Adipogenesis Assay
  • 07:04Results: FAP+CD90-, FAP+CD90+ and FAP-CD90+ Fibroblasts Differ in Dermal Localization, Gene Expression and Functionality
  • 08:44Conclusion

Summary

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Este manuscrito descreve um protocolo FACS-baseado para a isolação de fibroblasto Papillary e reticular da pele humana. Contorna a cultura in vitro que era inevitável com o protocolo comumente usado da isolação através das culturas do explante. Os subconjuntos emanando do fibroblasto são funcionalmente distintos e indicam a expressão e a localização diferenciais do gene dentro da derma.

Tags

Keyword Extraction: Papillary FibroblastsReticular FibroblastsHuman SkinFluorescence-activated Cell SortingFACSDermal Fibroblast SubsetsSkin PathologiesCancerInflammatory Skin DiseasesFull-thickness DermisSubcutaneous Fat LayerPapillary DermisReticular DermisEnzymatic DigestionDissociating Enzyme Solution

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