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Methodenartikel

Methoden zur Aufzucht des parasitoiden Ganaspis brasiliensis, einem vielversprechenden biologischen Bekämpfungsmittel für die invasive Drosophila suzukii

4.6K Aufrufe

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DOI:

10.3791/63898

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2. Juni 2022

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Ganaspis brasiliensis - ein Larvenparasitoid von Drosophila suzukii (ein globaler invasiver Obstkulturpest) - wurde zur biologischen Bekämpfung dieses Schädlings in Europa und den Vereinigten Staaten zugelassen oder wird für die Einführung in Europa und die Vereinigten Staaten in Betracht gezogen. Dieser Artikel enthält Protokolle für die Aufzucht dieses parasitoiden Parasitoids in kleinem und großem Maßstab.

Zusammenfassung

Die in Ostasien beheimatete Fleckenflügeldrosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), hat sich in den letzten zehn Jahren in Amerika, Europa und Teilen Afrikas weit verbreitet und ist in ihren überfallenen Regionen zu einem verheerenden Schädling verschiedener weichhäutiger Früchte geworden. Es wird erwartet, dass die biologische Bekämpfung, insbesondere durch selbsterhaltende und spezialisierte Parasitoide, eine praktikable Option für ein nachhaltiges flächendeckendes Management dieses hochmobilen und polyphagen Schädlings sein wird. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae) ist ein Larvenparasitoid, das in Ostasien weit verbreitet ist und sich als einer der wirksamsten Parasitoiden von D. suzukii erwiesen hat.

Nach strengen Bewertungen ihrer Wirksamkeit und potenzieller Nichtzielrisiken vor der Einführung wurde kürzlich eine der wirtsspezifischeren genetischen Gruppen dieser Art (G1 G. brasiliensis) für die Einführung und Freisetzung in den USA und Italien zugelassen. Eine andere genetische Gruppe (G3 G. brasiliensis), von der auch häufig festgestellt wurde, dass sie D. suzukii in Ostasien angreift, könnte für die Einführung in naher Zukunft in Betracht gezogen werden. Derzeit besteht ein enormes Interesse an der Aufzucht von G. brasiliensis für die Forschung oder an der Massenproduktion zur Freisetzung von Freisetzungen gegen D. suzukii. Dieses Protokoll und der zugehörige Videoartikel beschreiben effektive Aufzuchtmethoden für dieses Parasitoid, sowohl in kleinem Maßstab für die Forschung als auch in großem Maßstab für die Massenproduktion und Freisetzung im Freiland. Diese Methoden könnten der weiteren langfristigen Erforschung und Verwendung dieses in Asien geborenen Parasitoids als vielversprechendes biologisches Bekämpfungsmittel für diesen globalen invasiven Schädling zugute kommen.

Einleitung

Die in Ostasien beheimatete Fleckenflügeldrosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), hat sich in Amerika, Europa und Teilen Afrikas weit verbreitet 1,2. Die Fliege ist extrem polyphag und kann verschiedene kultivierte und wilde Früchte mit weichen und dünnen Häuten in ihren einheimischen und eingedrungenen Regionen 1,2,3 verwenden. Die derzeitigen Managementstrategien für diesen Schädling beruhen stark auf dem häufigen Einsatz von Insektiziden, die auf erwachsene Fliegen in Feldern ab....

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Protokoll

1. Methoden zur kleinräumigen Laboraufzucht von G3 Ganaspis brasiliensis

  1. Bereiten Sie die Ernährung des Gastgebers vor.
    1. Fügen Sie 600 ml destilliertes Wasser in einen 1.500 ml Glasbehälter hinzu und erhitzen Sie das Wasser auf einer Kochplatte.
    2. Fügen Sie 88,6 g handelsübliche Trockendiät (aus Agar, Bierhefe, Maismehl, Methylparaben und Saccharose) hinzu oder bereiten Sie die Diät mit der von Dalton et al.28 veröffentlichten Formel zu (siehe Schritt 2.1.2).
    3. Fügen Sie 300 ml destilliertes Wasser in die trockene Diät hinzu und rühren Sie die Diätmischung gründlich um.
    4. Füg....

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Ergebnisse

Abbildung 4 zeigt repräsentative Ergebnisse der kleinräumigen Laboraufzucht von G3 Ganaspis brasiliensis unter Verwendung von zwei verschiedenen parasitoiden Dichten (sechs oder 10 Paare) und zwei verschiedenen Expositionszeiten (5 oder 10 Tage) in der Quarantäneeinrichtung der USDA-ARS Beneficial Insects Introduction Unit (Newark, Delaware). Es gab 14 Replikate für jede Kombination von parasitoider Dichte und Expositionszeit. Insgesamt produzierten die 64 Kolben 4.018 Wespen (71,7 .......

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Diskussion

Langfristige Forschung und anschließende Freisetzungen eines biologischen Bekämpfungsmittels hängen von der Verfügbarkeit effektiver und wirtschaftlicher Aufzuchttechniken ab. Die in dieser Studie beschriebenen Methoden haben sich als effiziente Protokolle sowohl für die kleinräumige als auch für die großflächige Aufzucht von Ganaspis brasiliensis erwiesen. Das kleine Aufzuchtprotokoll wurde über mehrere Jahre entwickelt, um den Arbeitsaufwand zu optimieren und die spezielle Ausrüstung zu reduzieren, die zur gle.......

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Offenlegungen

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen.

Danksagungen

Die Autoren danken Lukas Seehausen und Marc Kenis (CABI, Schweiz) für die freundliche Bereitstellung von G1 G. brasiliensis. Die Finanzierung in Italien wurde von der Provincia Autonoma di Trento, Trient, Italien, und in den USA vom National Institute of Food and Agriculture, dem USDA Specialty Crops Research Initiative Award (# 2020-5118-32140), dem USDA Animal and Plant Health Inspection Service (Farm Bill, Fonds 14-8130-0463) und den USDA ARS CRIS Basisfonds (Projekt 8010-22000-033-00D) bereitgestellt. Das USDA ist ein Anbieter von Chancengleichheit und Arbeitgeber und unterstützt keine in dieser Veröffentlichung genannten Produkte.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Aktive TrockenhefeFleischmanns Yeast, Cincinatti, OH, USAKeineWird verwendet, um Früchte abzudecken, um das Schimmelwachstum zu reduzieren und die Anziehungskraft der Frui auf die Fliegen zu erhöhen
Bakteriologischer AgarMerk Life Science S.r.l., Mailand, ItalienA1296 - 5KGWird zur Herstellung der Standard Drosophila
Medium Bleach Solutionverwendet Clorox Company, Oakland, CA, USAKeineWird zur Desinfektion von Fruchtfleisch
verwendetBlauer StopfenAzer Scientific, Morgantown, PA, USAES3837Wird verwendet, um das Rohr abzudichten und gleichzeitig die Belüftung von Insekten zu ermöglichen
BlueberriesGrocery Store, Newark, DE, USAKeineAls Wirtsfrucht für die Fliegen bereitgestellt (verschiedene andere Früchte können auch verwendet werden)
BugDorm Insektenaufzuchtkäfig (B24,5 x T24,5 x H63,0 cm)Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan4E3030Zur Aufzucht von Parasitoiden (Parasitismuskäfig)
BugDorm Insektenaufzuchtkäfig (B32,5 x T32,5 x H32,5 cm)Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan4E4590Zur Aufzucht von Fliegen
BugDorm Insektenaufzuchtkäfig (B32,5 x T32,5 x H32,5 cm)Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan4E4545Zur Aufzucht von Parasitoiden (Käfig)
Hühnerdraht (0,64 cm, 19 gauge)Everbilt, OH, USA308231EBWird verwendet, um die Früchte anzuheben, um eine maximale parasitoide Eiablage zu ermöglichen
MaismehlLebensmittelgeschäft, Trento, TN, ItalienKeineWird zur Zubereitung der Standard Drosophila Medium
Dental Watterolle (1 x 3,8 cm) verwendetGimaS.p.A., Gessate, MI, Italien35000Wird verwendet, um die Parasitoide im Vorratsbehälter mit Wasser zu versorgen
Drosophila-DiätFrontier Scientific, Newark, DE, USATF1003Maßgeschneidertes Futter zur Aufzucht von Fliegen
Drosophila Fläschchen schmal, Polystiren (2,5 x 9,5 cm)VWR International, LLC., Radnor, PA, US75813-160Wird verwendet, um die Parasitoide im Käfig mit Wasser zu versorgen
Drosophila Fläschchenpfropfen, Celluloseacetat (2,5 cm)VWR International, LLC., Radnor, PA, US89168-886Wird verwendet, um die Parasitoide im Käfig mit Wasser zu versorgen
Erlenmeyerkolben (250 mL)Carolina Biological, Burlington, NC, USA731029Wird zur Aufzucht von Fliegen und Parasitoiden
verwendet Zentrifugenröhrchen im Falcon-Stil (50 mL)VWR International, LLC., Radnor, PA, USVWRI525-0611Modifiziert für den Versand von adulten Parasitoiden
SchaumstoffstopfenJaece Industries, North Tanawanda, NY, USAL800-CWird zum Abdichten der Kolben verwendet und ermöglicht gleichzeitig die Belüftung von Insekten
HoneyGrocery Store, Newark, DE, USAKeine Wirdals Futter für Parasitoide bereitgestellt
Identi-Plug KunststoffschaumstopfenFisher Scientific Company, L.L.C., Pittsburg, PA, US14-127-40E Wirdals Futterspender für Parasitoide und zum Versiegeln des Vorratsbehälters verwendet
Industrielles PapierhandtuchLebensmittelgeschäft, Newark, DE, USAKeineWird als Verpuppungssubstrat für Puppen und gemilderte Feuchtigkeit bereitgestellt
Mikron-Mesh-Gewebe (250 mL)Industrielles Netz, Maple Grove, MN, USAWN0250-72Wird zur Herstellung von Belüftungsdeckeln für Insekten verwendet
Nährhefe (Flocken)Lebensmittelgeschäft, Trento, TN, ItalienKeineWird zur Vorbereitung des Standard Drosophila Medium
Papieruntersetzers (10,2 cm)verwendetHoffmaster, WI, USA35NG26Wird als Verpuppungssubstrat für Fliegen und zerfleischte Puppen
verwendetPlastikbecher (Ø 13,3 cm, 800 mL)Berry Superfos, Taastrup, DänemarkUnipak 5134Modifiziert für die Lagerung von adulten Parasitoiden
Kunststoffdeckel (& Oslash; 13,3 cm)Berry Superfos, Taastrup, DänemarkPP 2830Modifiziert für die Lagerung von adulten Parasitoiden
PropionsäureMerk Life Science S.r.l., Mailand, ItalienP1386 - 1LWird zur Herstellung der Standard Drosophila
Medium SaccharoseverwendetLebensmittelgeschäft, Trento, TN, ItalienKeineWird zur Zubereitung des Standard Drosophila Medium
Suppenbechers mit Deckel (475 mL)verwendet.StackMan, VietnamDC1648Wird für parasitierte Larven verwendet, um
SojabohnenmehlLebensmittelgeschäft, Trento, TN, ItalienKeineWird zur Zubereitung der Standard Drosophila Medium
White Filzscheibe (0,64 cm dick, 5 mm ID x 20 mm AD) verwendet. Lincoln, NH, USWFW/.25 x 5 x 20 mmWird als Futterring für Parasitoide verwendet
zu verpuppen

Referenzen

  1. Asplen, M. K., et al. Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities. Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).
  2. Tait, G., et al.

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Nachdrucke und Genehmigungen

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