Summary

Aspectos técnicos de la aortocava Fístula Ratón

Published: July 11, 2013
doi:

Summary

El objetivo es producir una fístula arteriovenosa que es simple y reproducible. Este método no utiliza suturas o adhesivos pegamento. Por lo tanto las muestras se pueden utilizar con la menor cantidad de materiales extraños para el análisis.

Abstract

Se discuten los aspectos técnicos de la creación de una fístula arteriovenosa en el ratón. Bajo anestesia general, se hizo una incisión abdominal, y la aorta y la vena cava inferior (IVC) están expuestos. La aorta infrarrenal proximal y la aorta distal se diseccionan para la colocación de la abrazadera y la punción de aguja, respectivamente. Se presta especial atención para evitar la disección entre la aorta y la vena cava inferior. Después de sujetar la aorta, se utiliza una aguja de 25 G para la punción ambas paredes de la aorta en la vena cava inferior. El tejido conectivo circundante se utiliza para la compresión hemostático. Creación y el éxito de la FAV se mostrará el flujo de sangre arterial pulsátil en la vena cava inferior. La confirmación adicional de FAV éxito se puede lograr mediante ecografía Doppler post-operatorio.

Introduction

La opción más común elegido para la terapia de reemplazo renal en pacientes con enfermedad renal en fase terminal es la hemodiálisis. Acceso para la hemodiálisis se realiza mediante una fístula arteriovenosa (FAV), injerto arteriovenoso o la colocación del catéter temporal. Aunque AVF son el modo preferido de acceso, AVF todavía están lejos de ser perfecto. Un año de primaria las tasas de permeabilidad AVF son sólo 60 a 65%, con muchas fallas debido a la hiperplasia neointimal. La biología molecular y la fisiología de la formación de AVF normal y la formación de mala adaptación sigue siendo mal caracterizado. Como tal, es mucho más que ganar para mejorar los resultados FAV con la ganancia de acompañamiento en la comprensión de la regulación de la formación de fístulas. 1-3

La exposición de una vena para el flujo arterial se estudia comúnmente en el contexto de los injertos de vena que son modelos directos de derivación quirúrgica. 4, 5 Aunque los injertos de vena y aVF similar exponen una vena para un entorno arterial, hay varios di críticoferencias entre ellos. En primer lugar, la resistencia de la cama escurrimiento distal es mucho más baja en FAV, como la FAV drena a la aurícula derecha, mientras que el injerto de la vena drena a los enfermos a menudo pequeñas arterias distales, lo que resulta en un aumento del flujo sanguíneo y la tensión de cizallamiento en la FAV. En segundo lugar, la sangre venosa en la extremidad de la FAV puede ser una mezcla de sangre venosa y arterial que conduce a una menor oxigenación en comparación con el contenido puramente arterial en el injerto de vena. En tercer lugar, la vena de la FAV no se quita de su cama, lo que lleva a la preservación de su vaso venorum y la inervación nerviosa, en comparación con la transposición completa de la vena del injerto en el lecho arterial. Por último, el número de anastomosis es por lo general dos en injertos de la vena mientras que una FAV típicamente tiene solamente una. En este estudio, se introduce un modelo de ratón de la fístula aorto-cava que se puede utilizar para el estudio de FAV.

Protocol

1. Procedimientos de anestesia y pre-operatorio La inducción de la anestesia general Se obtiene la aprobación por el Cuidado de Animales institucional apropiado y el empleo. C57/black ratones macho, de 10 semanas, se anestesian. Entregar 4% de isoflurano con 0,8 l / min de oxígeno a una caja de plexiglás a través de un vaporizador de isoflurano y colocar el ratón en el interior. Alternativamente, si se prefiere por el cirujano, la anestesia intraperitoneal se puede utilizar. Preservar l…

Representative Results

Después de la práctica, la supervivencia en el primer día post-operatorio es típicamente más del 95%; en el día 7 post-operatorio, la supervivencia fue 91,3% Figuras 1 y 2 muestran el sitio de punción ideales en vistas coronal y transversal;. Colocación de la punción El sitio es fundamental para obtener una buena supervivencia sin hemorragia excesiva. Muertes intraoperatorias y muertes postoperatorias tempranas se deben a hemorragias normalmente. Esto tiende a ocurrir con una disección excesiv…

Discussion

Hay varios informes que han descrito FAV en ratas, incluyendo FAV femoral, 6, 7 carótida para yugular FAV 8 y aortocava FAV. 9, 10 La rata es varias veces más grande que el ratón, lo que facilita la cirugía en comparación con la rata el ratón. Sin embargo, con el fin de tomar ventaja de las cepas y variantes genéticos de ratón el procedimiento debe ser extendida para incluir modelos de ratón. Varios informes publicados anteriormente presentó el modelo de AVF en ratones, pero es…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado en parte por el Instituto Nacional de Salud de subvención R01-HL095498, así como con los recursos y el uso de instalaciones de la VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.

Materials

Name of equipment Company Catalog number Comments (optional)
Vevo 770 ultrasound machine Visualsonics 20-60 Mhz scan head; RMV-704  
Vascular clamp Roboz Surgical Instrument Co. RS-5424  
Clamp applying forceps Roboz Surgical Instrument Co. RS-5410  
25 Gauge Needle Becton Dickinson BD PrecisionGlide Needle 25 G x 7/8 #305124  

Referencias

  1. Allon, M. Current management of vascular access. Clinical Journal of the American Society of Nephrology. 2 (4), 786-800 (2007).
  2. Dixon, B. S. Why don’t fistulas mature?. Kidney International. 70 (8), 1413-1422 (2006).
  3. Roy-Chaudhury, P., Spergel, L. M., Besarab, A., Asif, A., Ravani, P. Biology of arteriovenous fistula failure. Journal of Nephrology. 20 (2), 150-163 (2007).
  4. Kudo, F. A., Muto, A., et al. Venous identity is lost but arterial identity is not gained during vein graft adaptation. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 27 (7), 1562-1571 (2007).
  5. Muto, A., Yi, T., et al. Eph-B4 prevents venous adaptive remodeling in the adult arterial environment. The Journal of Experimental Medicine. 208 (3), 561-575 (2011).
  6. Croatt, A. J., Grande, J. P., et al. Characterization of a model of an arteriovenous fistula in the rat: the effect of L-NAME. The American Journal of Pathology. 176 (5), 2530-2541 (2010).
  7. Misra, S., Fu, A. A., et al. The rat femoral arteriovenous fistula model: increased expression of matrix metalloproteinase-2 and -9 at the venous stenosis. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 19 (4), 587-594 (2008).
  8. Kojima, T., Miyachi, S., et al. The relationship between venous hypertension and expression of vascular endothelial growth factor: hemodynamic and immunohistochemical examinations in a rat venous hypertension model. Surgical Neurology. 68 (3), 277-284 (2007).
  9. Caplice, N. M., Wang, S., et al. Neoangiogenesis and the presence of progenitor cells in the venous limb of an arteriovenous fistula in the rat. American Journal of Physiology Renal Physiology. 293 (2), F470-F475 (2007).
  10. Nath, K. A., Kanakiriya, S. K., Grande, J. P., Croatt, A. J., Katusic, Z. S. Increased venous proinflammatory gene expression and intimal hyperplasia in an aorto-caval fistula model in the rat. The American Journal of Pathology. 162 (6), 2079-2090 (2003).
  11. Karram, T., Hoffman, A., et al. Induction of cardiac hypertrophy by a controlled reproducible sutureless aortocaval shunt in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 18 (6), 325-334 (2005).
  12. Perry, G. J., Mori, T., et al. Genetic variation in angiotensin-converting enzyme does not prevent development of cardiac hypertrophy or upregulation of angiotensin II in response to aortocaval fistula. Circulation. 103 (7), 1012-1016 (2001).
  13. Guzman, R. J., Krystkowiak, A., Zarins, C. K. Early and sustained medial cell activation after aortocaval fistula creation in mice. The Journal of Surgical Research. 108 (1), 112-121 (2002).
  14. Castier, Y., Lehoux, S., et al. Characterization of neointima lesions associated with arteriovenous fistulas in a mouse model. Kidney International. 70 (2), 315-320 (2006).

Play Video

Citar este artículo
Yamamoto, K., Li, X., Shu, C., Miyata, T., Dardik, A. Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula. J. Vis. Exp. (77), e50449, doi:10.3791/50449 (2013).

View Video