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형광 현미경을 사용 키네신 -1-화물 식별

JoVE Revista
Biología

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Identification of Kinesin-1 Cargos Using Fluorescence Microscopy

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형광 현미경을 사용 키네신 -1-화물 식별

DOI:

10.3791/53632-v

•

08:06 min

•

February 14, 2016

•

Clement M. Lee

¹Department of Oncological Sciences,Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Capítulos

00:05Título
00:39Cell Culture for Immunofluorescence Microscopy
01:32Preparation of Transfection Complex and Transfection of Cells
03:08Live Cell Imaging and Indirect Immunofluorescence
05:40Results: Identifying Kinesin Cargo via Fluorescence Microscopy
06:50Conclusion

Summary

Traducción Automática

여기에서, 프로토콜은 키네신 -1-화물을 식별하기 위해 제시된다. 키네신-1 중쇄 (KIF5B)의 모터리스 돌연변이는 세포질에 집계 및화물의 응집을 유도한다. 모두 집계는 형광 현미경에서 검출된다. 유사한 전략이 다른 모터 단백질화물을 식별하기 위해 사용될 수있다.

Tags

Kinesin-1 Cargos Fluorescence Microscopy Molecular Motors Dominant Negative KIF5B Mutants Live Cell Imaging Indirect Fluorescence Imaging Immunofluorescent Studies Cover Glasses Cell Culture Transfection Medium TdTomato-tagged Wild Type KIF5B Expression Plasmid Motorless KIF5B Expression Plasmid Candidate Cargo Protein

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