隔离和动物血清自由膨胀的人脐血源性间质基质细胞（MSCs），内皮细胞集落形成祖细胞（ECFCs）
Summary
这个协议描述不使用动物血清中产生自体对实验移植的目的的间质基质细胞和内皮细胞集落形成细胞的分离和随后的扩大。
Abstract
脐带是一种具有高增殖潜能，包括间质的基质干细胞（也称为间质干细胞，MSCS）和内皮细胞集落形成祖细胞（ECFCs）的祖细胞的丰富来源。这两种类型的细胞，在维持组织的完整性关键人物，并可能也参与再生过程和肿瘤的形成。
要比较的方式研究它们的生物学和功能，它是重要的，都从同一供体细胞类型。这也可能是来自同一组织的干细胞和ECFCs，有利于再生的目的。
由于细胞疗法，最终找到自己的方式从替补到床边，我们建立了一个新的方法来隔离和进一步扩大不使用动物性蛋白质的祖细胞。在我们的协议中的所有步骤汇集人类血小板裂解液（pHPL）所取代胎牛血清完全避免接触细胞异种蛋白质。
该视频演示了从一个脐带祖细胞的分离和扩张的方法。
所有材料和程序进行说明。
Protocol
Discussion
有一个从中获取干细胞或ECFCs包括骨髓，脂肪组织，脐带血，等各种来源
从相同的源祖细胞两种类型直接比较的样组织和血管再生或肿瘤进展的贡献过程中的不同类型的细胞参与，这是必要的。
隔离，并随后从同一供体研究ECFCs和干细胞自体对缓解使得这种方法排除在个别实验的捐助变化的优势。
与造血干细胞可能造成的污染降到最?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者感谢提供有用的意见，手稿，丹妮拉泰勒和Margaretha神父hwirth提供技术援助，莫妮卡语言编辑法雷尔，乌韦郎，马尔吉特Holzapfel和桑德拉部Eppich妇产科pHPL，伊娃罗德和妮可霍夫曼卡塔琳娜Schallmoser提供的线。
这项工作一直由奥地利研究基金会（FWF，授予N211南到DS），奥地利研究促进署（FFG，授予N200到DS）和成体干细胞研究基金会（AR）的支持。 AR是博士课程的格拉茨医科大学分子医学研究员。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| alpha modified MEM | Sigma | |||
| L-GLutamin | Sigma | |||
| Penicillin/Streptomycin | Sigma | |||
| EBM | Lonza | |||
| Single cytokine quots | Lonza | |||
| 75 cm2 flasks | Corning | |||
| 150 cm2 plates | Corning | |||
| Cell scraper | Corning | |||
| Trypsin/EDTA | Sigma | |||
| Monoclonal antibodies | Becton Dickenson | |||
| PBS | ||||
| 50 ml tubes | Falcon | |||
| 500 mL filter 20 μm pore size |
Millipore | |||
| Preservative free heparin | Biochrom |
References
- Schallmoser, K. Human platelet lysate can replace fetal bovine serum for clinical-scale expansion of functional mesenchymal stromal cells. Transfusion. 47, 1436-1446 (2007).
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