Un modèle de course thrombotique Basé sur cérébrale transitoire hypoxie-ischémie

Résumé

Les modèles d’AVC thromboemboliques sont des outils essentiels pour optimiser la thérapie de recanalisation. Nous rapportons ici un modèle murin d’AVC thrombotique basé sur une agression hypoxique-ischémique cérébrale transitoire (tHI), qui déclenche une thrombose et un infarctus, et répond favorablement à la fibrinolyse médiée par l’activateur tissulaire du plasminogène (tPA) dans une fenêtre thérapeutique similaire à celles des patients victimes d’AVC.

Résumé

la recherche de l'AVC a subi de nombreux revers dans la traduction de thérapies neuroprotectrices dans la pratique clinique. En revanche, la thérapie du monde réel (tPA thrombolyse) produit rarement des avantages dans des modèles expérimentaux basés mécaniques occlusion, qui dominent la recherche préclinique de course. Cette scission entre le banc et chevet suggère la nécessité d'employer des modèles tPA-sensibles dans la recherche préclinique de course. À cette fin, un modèle d'accident thrombotique simple et tPA-réactive est inventé et décrit ici. Ce modèle consiste en une occlusion transitoire de l'artère carotide commune unilatérale et la livraison de 7,5% d'oxygène à travers un masque de visage chez la souris adulte pour 30 min, tout en maintenant la température rectale des animaux à 37,5 ± 0,5 ° C. Bien que la ligature réversible de l'artère carotide ou une hypoxie unilatéral supprimée chaque débit sanguin cérébral seulement de manière transitoire, la combinaison des deux injurieux provoqué une durée déficits de reperfusion, de la fibrine et le dépôt de plaquettes et une grande Infarct sur le territoire de l'artère cérébrale moyenne fournie. Surtout, la queue veineuse injection de tPA recombinant à 0,5, 1 ou 4 heures post-Thi (10 mg / kg) a fourni la réduction du temps-dépendante du taux de mortalité et la taille de l'infarctus. Ce nouveau modèle de course est simple et peut être normalisée dans les laboratoires de comparer les résultats expérimentaux. De plus, il induit la thrombose ou sans introduction d'emboles craniectomy préformés. Compte tenu de ces avantages uniques, le modèle Thi est un complément utile au répertoire de recherche sur l'AVC préclinique.

Introduction

Thrombolyse et recanalisation est la thérapie la plus efficace de l'AVC ischémique aigu dans la pratique clinique ^1. Cependant, la majorité des recherches de neuroprotection préclinique a été effectuée dans un modèle transitoire mécanique d'obstruction (intraluminal suture d'occlusion de l'artère cérébrale moyenne) qui produit une récupération rapide de la circulation sanguine cérébrale après le retrait de l'occlusion vasculaire et montre peu ou pas d'avantages par tPA thrombolyse. Il a été suggéré que le choix douteux de modèles d'AVC a contribué, au moins en partie, à la difficulté de traduire la thérapie neuroprotectrice aux ....

Protocole

Ce protocole est approuvé par le Comité institutionnel de protection des animaux et l'utilisation (IACUC) de l'Université Emory et suit les Instituts nationaux de la directrice de Santé pour les soins et l'utilisation des animaux de laboratoire.

1. Configuration

1. Préparer le lit chirurgicale sur coussin chauffant relié avec pompe à chaleur à 37 ° C pendant au moins 15 min avant la chirurgie. Placez un rouleau de cou à l'aide du canon de seringue de 3 ml sur le lit chirurgical. Préparer le gaz d'anesthésie avec 2% d'isoflurane dans l'air médical.
2. Préparer pince autoclaves, des ciseaux, porte-....

Résultats

Deux dimensions contraste de granularité laser imagerie (LSCI) ¹⁶ a été utilisé pour comparer les altérations du débit sanguin cérébral (CBF) de 30 min occlusion transitoire carotide unilatérale (tCCAO), exposition de 30 min à l'hypoxie (7,5% d'oxygène), et 30 min unilatérale ligature de la carotide sous hypoxie (THI). Cette expérience a révélé que tCCAO sous la normoxie supprimée CBF sur la carotide hémisphère ligaturé à ~ 50% de la valeur de référence, qui récupère rapidement à plus de 85% après la .......

Discussion

L'AVC est un problème majeur de santé d'une importance croissante pour toute société avec un vieillissement de la population. Globalement, l'AVC est la deuxième principale cause de décès avec un taux d'environ 5,9 millions d'événements mortels en 2010, ce qui équivaut à 11,1% de tous les décès ^18. L'AVC est également la troisième cause d'années de vie ajustées sur l'incapacité (DALY) perdues dans le monde en 2010, passant de la cinquième position en 1990 ^19. Ces donn.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
souris mâles adultes	Charles River	C57BL/6  ;	10-13 semaines (22-30 g)
Système d’anesthésie animale de laboratoire mobile	VetEquip	901807	anesthésie
Réservoir d’air médical (comprimé) Airgas		UN1002	anesthésie
Isoflurane	Piramal Healthcare	NDC 66794-013-25	anesthésie
Laboratoire multi-stations Anesthésie animaleSystème d’anesthésie animale	Surgivet	V703501	système
d’hypoxie7,5 % O2 équilibré par 92,5 % N2 réservoir	Airgas	UN1956	d’hypoxie
Régulateur de température avec lampe chauffante  ;	Cole Parmer  ;	EW-89000-10	Régulateurs de température
Sonde rectale	Cole Parmer  ;	NCI-00141PG	Régulateurs de température
Microscope de dissection  ;	Olympe  ;	Configuration chirurgicale	SZ40
Pompe à chaleur avec coussin chauffant	Gaymar  ;	Dispositif chirurgical	TP700
Pince fine incurvée (dentelée)	Instrument chirurgical	FST	11370-31
Pince fine incurvée (lisse)	FST	11373-12	instrument chirurgical
micro-ciseaux	FST	15000-03	Instrument chirurgical
	FST	12060-01	Instrument chirurgical
Halsted-Mosquito hémostats	FST	13008-12	instrument chirurgical
5-0 suture en soie  ;	Harvard Apparatus	624143	fournitures chirurgicales
4-0 Suture monofilament en nylon	LOOK	766B	Fournitures
chirurgicales Colle tissulaire	Abbott Laboratories	NC9855218	fournitures chirurgicales
Puralube Vet ointement	Fisher	NC0138063  ;	prévention de la sécheresse oculaire
Imageur de flux sanguin MoorFLPI-2	Moor	780-nm	Laser Speckle Contrast Imaging
Mannitol	Sigma	M4125	in vivo TTC
2,3,5-triphényltétrazolium chlorure (TTC)  ;	Sigma	T8877	in vivo TTC
Vibratome	Stoelting	51425	section du cerveau pour in vivo TTC  ;
Microscope numérique	Dino-Lite	AM2111	imagerie du cerveau entier
composé O.C.T	Sakura Finetek	4583
chèvre anti-lapin Alexa Fluro 488	Invitrogen	A11008	Immunohistochimie
Cryostat	Vibratome	ultrapro 5000	section du cerveau pour IHC
Evans bleu	Sigma	E2129	Détection vasculaire perfusion
Microtome Microscopie	électronique Sciences	5000	section du cerveau pour l’histologie
Avertin (2, 2, 2-Tribromoéthanol)	Sigma	T48402	euthanasie
Microscope fluorescent	Olympus	DP73
Meloxicam SR	ZooPharm		AINS analgésie

Système Source laser