Summary
22C 3 antikor konsantre üzerinde yaygın olarak kullanılan kullanır bir tahlil geliştirdiğimiz uygunluk ile pembrolizumab, tedavi için akciğer kanseri hastalarının güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde değerlendirmek için yetenek laboratuvarları dünya çapında genişletmek için immunohistokimyasal autostainer, biyopsi ve sitoloji örnekleri için.
Abstract
Pembrolizumab tedavinin küçük hücreli dışı akciğer kanseri (NSCLC) PD-L1-gelişmiş ifade ile hastaların birinci ve ikinci basamak tedavisi için onaylanmıştır. PD-L1 mesaj PD-L1 immünhistokimya (IHC) 22C 3 arkadaşı teşhis tahlil ile test, (TPS) sayı hangi bir tümör oranını verir, tümör dokusu üzerinde doğrulandı. Biz 22C 3 antikor (Ab) konsantre üzerinde yaygın olarak kullanılan bir IHC autostainer biyopsi ve sitoloji örnekleri için kullandığı bir en iyi duruma getirilmiş laboratuar geliştirilen test (LDT) geliştirdi. PD-L1 TPS 120 eşleştirilmiş bütün tümör doku bölümleri ve biyopsi örnekleri ile değerlendirildi ve biyopsi ve sitoloji örnekleri 70 ile eşleştirilmiş (bronş yıkama, n = 40; plevral efüzyon, n = 30). Konsantre tabanlı LDT biyopsi (~ %100) ve sitoloji arasındaki yüksek bir uyumluluk oranı her iki TPS PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil kullanarak kararlı PD-L1 IHC ifade karşılaştırıldığında (~ %95) örnekler gösterdi. 22C 3 Ab noktaları (≥1%, ≥50%) kesti. PD-L1 ifade her iki tümör doku ve sitoloji örnekler, belirlemek için 22C 3 Ab konsantre kullanarak burada anlatılan en iyi duruma getirilmiş LDT NSCLC hastalar ile tedavi için uygunluğu değerlendirmek için yetenek laboratuvarları dünya çapında genişleyecektir pembrolizumab tedavinin güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde.
Introduction
Son klinik deneyler pembrolizumab, programlanmış hücre ölümü 1 arasındaki etkileşimi (PD-1) engelleyen bir insanlaşmış monoklonal Igg4 kappa izotip antikor ve hastalarının tedavisinde PD-L1 ve PD-L2, onun ligandlar etkinliğini göstermiştir Gelişmiş NSCLC1,2,3,4.
Şu anda, pembrolizumab PD-L1-ifade NSCLC ≥50% ve hiçbir epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR) veya Anaplastik Lenfoma kinaz (ALK) genomik tümör anomalileri3 bir PD-L1 ifade TPS her iki tedavi-naif hastalarda tedavisi için onaylanmıştır ve için daha önce bir PD-L1 TPS ≥1%1' in tedavi.
PD-L1 protein ifade IHC tarafından tespit anti-PD-1/PD-L1 tedaviler için yaygın bir akıllı biyomarker tahlil olarak kullanılmıştır. Pembrolizumab klinik çalışmalarda, PD-L1 formalin sabit parafin gömülü (FFPE) doku örnekleri ile elde edilen TPS PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil5kullanarak tespit edilmiştir. Bu tahlil ABD Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) tarafından onaylanmıştır ve CE-Avrupa'da işaretlenmiş tümör PD-L1 TPS5belirlenmesi için olmuştur.
Ek genel seçenekleri PD-L1 TPS 22C 3 antikor konsantre kullanan UMTH ile güvenilir ve yüksek kaliteli değerlendirmeler için kurumlar arasında klinik hasta pembrolizumab uygunluk ile ilgili kararlar desteklemek için gerekli olan tedavi. Patoloji Laboratuvarı, çok sayıda arkadaşı tanılama PD-L1 IHC 22C 3 tahlil için erişemez. Bu nedenle, güvenilir ve tutarlı UMTH ek, yaygın olarak kullanılan IHC autostainer platformları ile uyumlu geliştirilmesi esastır.
Ayrıca, UMTH NSCLC hastalar sık sık kullanılabilir tek numune türü vardır sitoloji numuneleri kullanılarak kurmaya gerek yoktur. Bronkoskopi 100 tümör hücreleri belirtiyorsa PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil rezeksiyonu, çekirdek iğne biyopsileri ve bronchoscopies için doğrulanır. Her ne kadar yukarıdaki örnek türleri sık sık elde edilen, sitoloji örnekleri daha kolay toplanan ve bazı kurumlar6,7en yaygın olarak bulunan örnek türü vardır. Ancak, orada şu anda doğrulanan hiçbir teşhis tahlil sitoloji örnekleri PD-L1 ifadede değerlendirilmesi için kullanılabilir; güvenilir UMTH sitoloji örnekleri ile uyumlu daha fazla yüksek kaliteli PD-L1 test kolaylaştırmak.
Ayrıca, bir LDT klinik doğrulanmasını kurarken, IHC ilgili klinik olarak doğrulanmış ticari test8için benzer bir şekilde yapılmalıdır. Örneğin, birkaç önemli adımlar antikor titrasyonu, tedavi öncesi gecikmeler, kuluçka süresi ve güçlendirme sistemleri9gibi seri bölümlerde aynı sinyal almak için doğrulanması gerekir.
Son zamanlarda 22C 3 antikor konsantre tümör biyopsi ve sitoloji örnekleri10,11PD-L1 ifade değerlendirmek için kullandığı bir en iyi duruma getirilmiş LDT geliştirdik. Liberal düşünce topluluğu karşı "altın standart" PD-L1 IHC 22C 3 tahlil10,11ile yüksek bir uyum bulduk. Güvenilir, yüksek kaliteli PD-L1 bölgeler arasında genel olarak test bu klinik olarak doğrulanan iletişim kuralını destekler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm yordamları Yerel Etik Komitesi tarafından onaylanmış olan (insan Araştırma Etik Komitesi, merkezi Hospitalier Universitaire de Nice/Tumorothèque BB-0033-00025).
Not: Bu protokol özel olarak piyasada bulunan bir otomatik IHC stainer (burada autostainer, Tablo malzemelerigörmek için denir) 22C 3 antikor konsantre kullanımı için tümör biyopsi ve sitoloji örnekler için ayarlanır.
1. tümör doku örneği hazırlanması
- Tümör doku % 10 tarafsız tampon formalin (NBF) bir kaset içinde fix.
Not: Proksimal akciğer tümörleri tümör doku genellikle bronkoskopi, ılımlı sedasyon altında bir akşam veya akciğer uzmanı tarafından gerçekleştirilen elde edilir. Periferik lezyonlar ve diffüz akciğer hastalığı, transbronchial veya iğne biyopsisi gösterilir. Bu yordamları genellikle bir ameliyat odası veya yoğun bakım yapılır. - Kaset içinde parafin gömün.
Not: Fiksasyon perfüzyon veya hemen sonrasında diseksiyon daldırma tarafından elde edilebilir ve genellikle 8-10 h gerektirir. Sabitleştirici Cilt 15-20 x örnek ses daha yüksek olmalıdır. Overfixation antijen maskeleme neden olabileceğinden daha 10 h için biyopsi doku düzeltmek için önerilmez. Yaklaşık 1 mm/saat oda sıcaklığında fiksasyon hızıdır. - Sabit doku örneği doku işlemci balmumu ile sızmak ( Tablo malzemelerigörmek).
Not: Dehidratasyon artan konsantrasyonları % 70, % 85 ve % 90 ile üç alkol banyosu içinde gerçekleştirilir. Su son olarak üç final mutlak alkol banyoları tarafından kaldırılır. Açıklığın üç Toluen banyoları ve balmumu infiltrasyon sıcak balmumu banyoları (44-60 ° C) içinde gerçekleştirilir. - Doku erimiş parafin ile dolu bir kalıp içine embed ( Tablo malzemelerigörmek) ve katılaşma için bekleyin.
- Bir microtome üzerinde 3 mikron kalınlığında, parafin gömülü doku bölüm.
- Pozitif yüklü mikroskop cam parafin Şerite slayt ( Tablo malzemelerigörmek) transferi.
- Slayt 37 ° C'de 1 h için Kuru
Not: doku bölümler (tercih edilen) 2-8 ° C'de veya oda sıcaklığında saklamak ilâ 25 ° antigenicity korumak ve kesit 15 d içinde leke C.
2. sitoloji örnekleri hazırlanması
-
Koruyucu bir çözümde bronşiyal yıkama toplamak (tablo malzemeleri görmek).
Not: bunun için standart bronkoskopi tekniği kullanılır.- Lavaj tatmak için bronş dağılımı. Yıkama temiz bir kap içinde toplamak. Etiket kapsayıcı hasta ile ilk ve son isim, Doğum tarihinizi ve numune kaynak.
- Bronş yıkama 50 mL konik tüp aktarmak ve DL-Dithiothreitol 2 g ekleyin (bkz. Tablo reçetesi) girdap 30 dk için tüp toz ve sonra 250 x g oda sıcaklığında 5 min için de santrifüj kapasitesi.
- Süpernatant kaldırın ve 10 mL mucolytic çözeltisi ekleyin ( Tablo bilgilerikonusuna bakın).
- Örnek 20 dk için orta hızda (Seviye 9) sallamak ve 250 x g oda sıcaklığında 5 min için de santrifüj kapasitesi.
- Süpernatant kaldırmak ve hücre Pelet % 10 içeren koleksiyon tüplerde mevduat NBF.
- Bir hücre block hazırlık reaktif 4 damla ekleyin ( Tablo malzemelerigörmek) hücre Pelet için.
- Bir kaset için hücre Pelet aktarmak, % 10 tamir NBF ve parafin-hücre block hazırlık ve kesit için (bkz: adımları 1.1-1,7) katıştırmak.
3. PD-L1 tahlil boyama
- Autostainer ve bilgisayar geçiş yapar.
- Autostainer simgesine çift tıklayın ve Kullanıcı seçin.
- 'Oluştur label' ve ardından 'Protokol'tıklayın.
- 22C 3 protokolü üzerinde çift tıklatın.
Not: Protokol ilk ' protokol oluştur 'ı tıklatarak autostainer'ın bilgisayara yüklenir. Tüm iletişim kuralı ek dosya 1sağlanır. - Hastanın kimliği üzerindeki etiketi yazın ve 'Yazdır' ı tıklatın.
- Etiket slayt üzerinde sopa.
- Slayt çekmece seçildi çekmece butonuna basarak açın.
- Etiketli slayt üzerinde Termal pad up - ve içe dönük etiketi ile yerleştirmek.
- Slayt çekmeceyi kapat.
- Kapaklar dağıtıcılar kaldırmak ve reaktifler rafları reaktifleri yükleyin.
- Stainer Kaputu açın ve uygun ve pozisyonda tutmak emin reaktifler atlıkarınca rafları koyun.
- Kapağı kapatın.
- Yazılım, 'Çalışan'tıklatın ve kullanılacak araç'ı tıklatın.
- IHC yordamın bitiminde, slayt musluk suyu ve bir damla bir temizleme solüsyonu ile birkaç saniye yıkayın.
- Bir banyo etanol % 100 ve % 95 etanol ikinci bir banyo ile slayt birkaç saniye boyunca suyla temasa.
- Coverslipping makine coverslip otomatik bir yükleme slayta yerleştirin.
4. PD-L1 boyama yorumu
Not: Nitelikli bir patolog PD-L1 IHC test yorumu yapmak gerekir.
- Pozitif ve negatif denetimleri hastanın numune incelenmesi önce analiz ederek PD-L1 boyama kalitesini değerlendirmek.
Not: hastanın numune üzerinde elde edilen sonuçları kontrol boyama edilemez ise geçersiz kabul edilir. - En az 100 canlı tümör hücreleri mikroskop altında varlığını doğrulamak.
Not: hastanın numune 100 tümör hücreleri olduğunda rapor. - 4 X düşük büyütme oranında tüm iyi korunmuş pozitif ve negatif tümör alanlarda değerlendirin.
Not: düşük bir büyütme oranında kısmi membran boyama veya membran zayıf yoğunluğu (1 +) boyama tanımak zor olabilir. - Kısmi veya tam hücre zarı boyama puan.
Not: Sitoplazmik boyama yorumu dışlanmaları gerekir. - TPS PD-L1 pozitif tümör hücreleri tüm tümör hücreleri iyi korunmuş tümör alanlarında mevcut göre oranının değerlendirilmesi tarafından hesaplayın.
Not: Yalnızca uygun tümör hücrelerinin incelenmesi gerekir. Tüm hücresel gibi diğer öğeleri, bağışıklık hücreleri, nekrotik hücreleri, normal hücreleri ve yapıları, sınav hariç olmak zorunda.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Burada ve ayrıntılı olarak açıklandığı gibi bu grubun son yayınlar10,11' de sunulan yordamı kullanarak, en iyi duruma getirilmiş LDT klinik olarak cerrahi uygulanan hastalar 120 arşivleme FFPE NSCLC biyopsi örnekleri ile doğrulandı rezeksiyon veya biyopsi Pasteur Üniversitesi Hastanesi, Nice, Mart 2016 arasındaki askeri yürüyüş 2007. Ayrıca, sitoloji örnekleri PD-L1 ifade değerlendirme için 70 eşleştirilmiş doku biyopsisi örnekleri ve bronş yıkama hazırlanmıştır hücre blokları TPS değerlendirildi (n = 40) veya plevral efüzyonu (n = 30) (toplanan Pasteur adlı Üniversite Hastanesi, güzel, Temmuz 2014 ve Kasım 2016 arasında). Tüm slaytlara taze kesilmiş ve 24 saat içinde lekeli.
PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil (altın standart) ile karşılaştırıldığında 22C 3 antikor konsantresi (LDT) kullanarak numuneler Şekil 1A ve 1Bgösterilir biyopsi desenle boyama bir temsilcisi. Bir TPS ≥1% kullanarak, 54/120 durumlarda (% 45) PD-L1 vardı olumlu, ≥50%, TPS kullanırken 29/120 durumlarda (% 24) PD-L1 için pozitif kabul edildi.
İçi korelasyon katsayısı (ICC) TPS puanı korelasyon bir sürekli değişken olarak ölçmek için kullanılan LDT ve altın standart arasında % 99 idi. Her iki TPS kullanılarak kesme noktaları ≥1%, ≥50%, interpathologist anlaşma κ puanları içinde LDT platform 1'e eşit.
22C 3 antikor kullanarak örnekleri PD-L1 IHC 22C 3 seti (altın standart) ile karşılaştırıldığında LDT konsantre sitoloji desenle boyama bir temsilcisi Şekil 1 c ve 1 Dgösterilir. Puan ≥1% 70 TPS birini kullanarak LDT biyopsi ve sitoloji örnekleriyle çiftlerini uyum hızı kesti ve ≥50% %95 ve ICC 0,88 ve 0,90 arasında sürekli bir değişken olduğu gibi TPS puanı kullanarak daha büyük. Bu bulgu sitoloji örnek her tür tutarlı (plevral efüzyon vs. bronşiyal yıkama) veya tümör histolojisi (adenokarsinom vs. skuamöz hücreli karsinom) bir ICC 0,96 arasındaki 0.82 ile. 37 (dışarı-in 70) PD-L1 TPS karşılaştırırken sitoloji örnekleri LDT altın standart, ≥1% TPS veya ≥50% TPS kesme noktası kullanarak uyumluluk oranı ile biyopsi örnekleri ile çift % 97'den büyük ve ICC 0.93 ve 0.95 arasında oldu.
Şekil 1: desen 22C 3 antikor konsantresi (LDT), kullanarak biyopsi ve sitoloji örnekleri üzerinde boyama temsilcisi 22C 3 seti (altın standart) PD-L1 IHC ile karşılaştırıldığında. (A) Bu panel gösterir PD-L1 IHC 22C 3 tahlil tümör biyopsi. (B) Bu panel 22C 3 antikor konsantre paneli Aanaliz gibi seri aynı tümör biyopsisi bölümleri kullanarak en iyi duruma getirilmiş LDT gösterir. (C) Bu panel PD-L1 IHC 22C 3 tahlil bir hücre bloğunda gösterir. (D) Bu panel 22C 3 antikor kullanarak en iyi duruma getirilmiş LDT konsantre seri bölümlerinde aynı hücre Block Cpanelinde analiz gibi gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Biz 22C 3 PD-L1 antikor konsantre ol, karşılık gelen klinik olarak doğrulanmış ticari test10,11ile karşılaştırarak kullanarak en iyi duruma getirilmiş bir LDT doğrulanmış var. 22C 3 antikor tabanlı LDT biyopsi (~ %100) ve PD-L1 IHC 22C 3 tahlil ≥1% TPS ve ≥50% kesme noktaları TPS olarak kullanarak kararlı PD-L1 IHC ifade karşılaştırıldığında sitoloji (~ %95) örnekler arasında yüksek bir uyumluluk oranı gösterdi yoğunlaşmıştır. Son zamanlarda tavsiye edilen olarak akciğer kanseri çalışma Uluslararası Derneği tarafından PD-L1 olumlu alanlarda yaklaşık 10 PD-L1 negatif örnekler, 10 PD-L1 olumlu örnekler ve doğrusal dinamik aralığını kapsayan 20 örnekleri için aynı olması gerekir klinik olarak doğrulanmış PD-L1 IHC8test edin. Biz bir doğrulama çalışma 120 biyopsi ve 70 sitoloji örnekleri üzerinde gerçekleştirilen. Genel olarak, uyumluluk yüksek, TPS kesme pozitifliği, türü ve numune veya tümör histolojisi için bağımsız olarak. Burada sunulan bulgular ile anlaşma bu doku ve sitoloji numuneler12,13,14,yüksek bir uyumluluk oranı gösterilen diğer önceki çalışmaların çoğu15.
Bu çalışmada, % 10'luk tüm örnekler düzeltildi NBF. Biz şu anda keşfedilmemiş alkol bazlı fiksajlar gibi diğer sigara formalin fiksajlar PD-L1 boyama üzerinde etkisi ise diğer fiksajlar etkisini değerlendirmek değil. Bağışıklık hücreleri PD-L1, özellikle makrofajlar, ifade varlığı sitoloji örneklerin dikkatli bir yorumu garanti eder. Bu örnekler seri Hematoksilen ve eozin slayt referansla değerlendirilecek gerekir ve bazı zor durumlarda bağışıklık hücreleri değerlendirmek için tamamlayıcı lekeleri tümör hücreleri sadece PD-L1 ifadede herhangi bir yanlış yorumlanmasına dışlamak için gerçekleştirilebilir.
Bu çalışmada sınırlamalar, tek bir kurum ve hiçbir hastanın klinik sonuç değerlendirmek için pembrolizumab ile tedavi edildi aslında retrospektif bir analiz de dahil olmak üzere bir dizi tutar. Buna ek olarak, liberal düşünce topluluğu küçük bir sınırlama burada zaman zaman onların yorumu daha zor hale getirebilir güçlendirme sistemleri kullanılırken gözlendi taneli boyama desen endişeleri sundu. Ayrıca, bağışıklık hücreleri boyama desen biraz daha altın standart ile gözlenen daha yoğundur. Patologlar eğitim PD-L1 IHC ile boyama doğru bir yorum elde etmek gereklidir. 16
Klinik ortamda UMTH sağlamlık zamanla sertifikasyon ve akreditasyon arayan tarafından aşağıdaki standart işletim yordamlar tarafından ve düzenli olarak dış kalite değerlendirme düzenleri8' katılarak muhafaza edilmesi gerekmektedir. Bu Önkoşullar başarılı8olduğunda klinik akıllı performans garantisi sağlanmış olur.
Protokol adresleri PD-L1 UMTH için kritik gerek altın standart tahlil ile donatılmış değil coğrafi bölgeler arasında yaygın olarak kullanılan bir autostainer üzerinde analiz zaman biyopsi ve sitoloji örnekleri üzerinde burada sunulan. 22C 3 antikor konsantre kullanarak optimize edildi, burada anlatılan LDT PD-L1 ifade NSCLC hastalar biyopsi ve sitoloji örnekleri üzerinde değerlendirmek için kullanılabilir. Bu güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde pembrolizumab tedavinin ile tedavi için uygun olan yüksek kaliteli PD-L1 ile NSCLC hastalar tanımlamak için test sunabilir laboratuvarları sayısı önemli ölçüde artıracaktır.
Diğer sitoloji numune türleri kullanarak fizibilite değerlendirmek için bir potansiyel geleceği yönünde olduğunu (Örneğin, ince iğne biyopsisi, FNA, bronkoskopi güdümlü endobronchial gelen numuneler ultrason güdümlü FNA ve bronş fırçalar) 22C 3 antikor ile UMTH konsantre tabanlı.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bu çalışmada Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, ABD tarafından sponsor oldu. Fon çalışma tasarım, veri toplama ve analizi, yayımlamaya karar veya el yazması hazırlanması hiçbir rol oynamıştır.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| NovaPrep HQ1 | Novacyt | NA | Preservative solution for cytology specimens |
| Novaprep® HQ+ B | Novacyt | NA | Mucolytic solution |
| Tissue-Tek VIP 6 | Sakura | 6042 VIP 6 | |
| Tissue-Tek TEC 5 Tissue Embedding Console System | Sakura | 5229 TEC 5 | |
| microscope glass slide SuperFrost Plus | Thermo Fisher Scientific | 4951PLUS4 | |
| DL-Dithiothreitol powder | Sigma-Aldrich | D3801 | |
| Heidolph Multi Reax Vortex Shaker | Thermo Fisher Scientific | 13-889-410 | |
| Shandon Cytoblock | Thermo Fisher Scientific | 7401150 | |
| 22C3 anti-PD-L1 concentrate antibody | Agilent Dako | #M365329 | |
| PD-L1 IHC 22C3 pharmDx | Agilent Dako | SK006 | |
| Autostainer Link 48 | Agilent Dako | AS480 | |
| BenchMark ULTRA autostainer | Ventana | #750-600 | |
| OptiView HQ Universal Linker | Ventana | #760-700 | |
| OptiView HRP Multimer | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Amplification H2O2 | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplifier | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplification Multimer | Ventana | #760-100 | |
| OptiView DAB | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Copper | Ventana | #760-700 | |
| Hematoxylin II | Ventana | #790-2208 | |
| Bluing Reagent | Ventana | #760-2037 | |
| Cell Conditioning 1 (CC1) | Ventana | #950-124 | |
| Tissue-Tek Film Coverslipper | Sakura | 4742 |
References
- Garon, E. B., et al. Pembrolizumab for the treatment of non-small-cell lung cancer. The New England Journal of Medicine. 372 (21), 2018-2028 (2015).
- Herbst, R. S., et al. Pembrolizumab versus docetaxel for previously treated, PD-L1-positive, advanced non-small-cell lung cancer (KEYNOTE-010): a randomised controlled trial. The Lancet. 387 (10027), 1540-1550 (2016).
- Reck, M., et al. Pembrolizumab versus Chemotherapy for PD-L1-Positive Non-Small-Cell Lung Cancer. The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1823-1833 (2016).
- Langer, C. J., et al. Carboplatin and pemetrexed with or without pembrolizumab for advanced, non-squamous non-small-cell lung cancer: a randomised, phase 2 cohort of the open-label KEYNOTE-021 study. The Lancet Oncology. 17 (11), 1497-1508 (2016).
- Buttner, R., et al. Programmed Death-Ligand 1 Immunohistochemistry Testing: A Review of Analytical Assays and Clinical Implementation in Non-Small-Cell Lung Cancer. Journal of Clinical Oncology. 35 (34), 3867-3876 (2017).
- Folch, E., Costa, D. B., Wright, J., VanderLaan, P. A. Lung cancer diagnosis and staging in the minimally invasive age with increasing demands for tissue analysis. Translational Lung Cancer Research. 4 (4), 392-403 (2015).
- Padmanabhan, V., et al. Improving Adequacy of Small Biopsy and Fine-Needle Aspiration Specimens for Molecular Testing by Next-Generation Sequencing in Patients With Lung Cancer: A Quality Improvement Study at Dartmouth-Hitchcock Medical Center. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 141 (3), 402-409 (2017).
- Tsao, M. S., et al. IASLC ATLAS of PD-L1 Immunohistochemistry Testing in Lung Cancer. , International Association for the Study of Lung Cancer (IASLC) Press. (2017).
- Thunnissen, E., de Langen, A. J., Smit, E. F. PD-L1 IHC in NSCLC with a global and methodological perspective. Lung Cancer. , 102-105 (2017).
- Ilie, M., et al. Use of the 22C3 anti-PD-L1 antibody to determine PD-L1 expression in multiple automated immunohistochemistry platforms. PLoS One. 12 (8), e0183023 (2017).
- Ilie, M., et al. Use of the 22C3 anti-programmed death ligand 1 antibody to determine programmed death ligand 1 expression in cytology samples obtained from non-small cell lung cancer patients. Cancer Cytopathology. 126 (4), 264-274 (2018).
- Skov, B. G., Skov, T. Paired Comparison of PD-L1 Expression on Cytologic and Histologic Specimens From Malignancies in the Lung Assessed With PD-L1 IHC 28-8pharmDx and PD-L1 IHC 22C3pharmDx. Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology. 25 (7), 453-459 (2017).
- Russell-Goldman, E., Kravets, S., Dahlberg, S. E., Sholl, L. M., Vivero, M. Cytologic-histologic correlation of programmed death-ligand 1 immunohistochemistry in lung carcinomas. Cancer Cytopathology. 126 (4), 253-263 (2018).
- Heymann, J. J., et al. PD-L1 expression in non-small cell lung carcinoma: Comparison among cytology, small biopsy, and surgical resection specimens. Cancer Cytopathology. 125 (12), 896-907 (2017).
- Stoy, S. P., Rosen, L., Mueller, J., Murgu, S. Programmed death-ligand 1 testing of lung cancer cytology specimens obtained with bronchoscopy. Cancer Cytopathology. 126 (2), 122-128 (2018).
- Ilie, M., Hofman, P. Reproducibility of PD-L1 assessment in non-small cell lung cancer-know your limits but never stop trying to exceed them. Translational Lung Cancer Research. 6 (Suppl 1), S51-S54 (2017).
