Summary

流出狭窄を伴う大軌道瘻を用した中枢静脈狭窄のマウスモデル

Published: July 11, 2019
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Summary

大器内膜瘻は、両方の壁を通して下の静脈カバに尿の赤外線大腸を穿刺することによって作成され、その後、劣った静脈カバの部分的なライゲーションを介してその流出における狭窄の作成が行われた。この再現可能なモデルは、中央静脈狭窄症の研究に使用することができる。

Abstract

中枢静脈狭窄は、動脈瘻(AVF)障害に寄与する重要な実体である。マウスAVFモデルは、瘻孔の流出における劣った静脈カバ(IVC)の部分的なライゲーションを作成するために改変され、中央静脈狭窄を模倣した。このモデルの技術的な側面を紹介します。大動脈とIVCは、腹部切開後に露出する。赤外線大動脈およびIVCは近位クランプのために解剖され、遠位大動脈は穿刺のために露出される。左腎静脈と大動脈分岐の中間点にあるIVCは慎重に解剖され、8-0IVC の下に縫合します。大動脈とIVCを締め付けた後、AVFは25Gの針で両方の壁を通して赤外線大動脈をIVCに穿刺し、続いて22G静脈内(IV)カテーテルとIVCを合わせて結び付けることによって作成される。その後、カテーテルが取り外され、閉塞することなく再現可能な静脈狭窄を作り出す。大動脈とIVCは、一次止止めを確認した後、クランプ解除されます。中静脈狭窄症のこの新しいモデルは、実行しやすく、再現性があり、AVF障害に関する研究を容易にします。

Introduction

動脈静脈瘻(AVF)は血液温水症の最も一般的なアクセスであり、移植片や中央静脈カテーテルなどの他のアクセスと比較して、優れた若性および減少した感染を有する。しかし、AVFの最大60%は1、2、3を成熟に失敗する。最近の体系的なレビューは、1年の一次滞起率が60%4だけであったと報告しました。静脈流出に沿った狭窄は、主にAVF成熟5、6の障害を引き起こす。瘻孔に近い狭窄しやすい特定の特徴的な場所があります:放射線静脈瘻の並置体スイングセグメント、ブラキオケファリック瘻のcephalicアーチ領域、および以前の瘻孔の中央静脈置かれたイプシラテラルサブクラビアンまたは内部頸静脈カテーテル7、8.

中枢静脈狭窄症は、AVFを持たない患者では無症候性であることが多いが、瘻孔流動9に挑戦した場合の静脈高血圧および瘻孔成熟の障害による虚索前肢浮腫を引き起こす可能性がある。中枢静脈狭窄症の病態生理学は、デバイス配置後の炎症および活性化凝固カスケードに関連する可能性が最も高い。さらに、カテーテル先端の一定の動きと瘻孔からの流れの増加は、せん断ストレスを変化させることができ、血小板沈着および静脈壁肥厚10をもたらす。中央静脈狭窄によって引き起こされるAVF障害の基礎となる基本的なメカニズムを理解するためには、AVFを使用して中央静脈狭窄を模倣する動物モデルが必要である。

ヒトAVFの臨床経過を習得し、要約しやすいマウス大横腔瘻モデルを確立した。11静脈狭窄を伴う新しいマウスAVFモデルを作成するために、以前に確立されたいくつかのマウスモデルの概念と技術を適用しました。中枢静脈狭窄の研究に用いることができる流出瘻におけるIVC狭窄を伴うマウス大横腔瘻モデルを紹介する。

Protocol

すべての実験は、イェール大学機関動物ケア使用委員会(IACUC)の承認を得て行われました。 1. 麻酔および術前の手順 オートクレーブによってすべての外科器械および材料を殺菌する。熱サポートデバイスの電源を入れ、暖かくなることを確認します(40~42°C)。 9-11週齢のC57BL/6マウスをアクリル誘導室に入れ、気化した2.5%のイソルランと0.8L/分の酸素で麻酔す…

Representative Results

雄マウスは、AVFとIVC狭窄の両方を作成するために上記の操作を受けた。対照マウスは、IVCを取り巻く組織の腹腔切除および解剖のみを受けた、例えば、偽の手順、またはAVFの同時作成なしにIVC狭窄の作成のみを行った。 IVCは、外科的処置の後7日目にドップラー超音波で観察された(図2)。IVCの瘻孔お?…

Discussion

マウスAVFモデルは、AVF成熟につながる基本的なメカニズムおよび分子事象を研究するために使用されてきた13,14.本研究では、確立されたマウスAVFモデルを改定し、瘻孔の流出管にIVC狭窄を伴う新規マウス大極瘻モデルを作成した。我々のライゲーションモデルは、血管ライゲーションを使用するいくつかの以前に説明されたマウスモデルに似てい?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この研究は、米国国立衛生研究所(NIH)グラントR01-HL128406によってサポートされました。米国退役軍人省生物医学研究所研究開発プログラムメリットレビュー賞I01-BX002336;だけでなく、VAコネチカットヘルスケアシステム、ウェストヘブン、CTのリソースと施設の使用と同様に。

Materials

20-60 Mhz scan head VisualSonics Inc. RMV-704
8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 µ), 3/8 Circle, TAP Point Needle AROSuture T06A08N14-13 polyamide monofilament sutures
Induction Chamber, 2 Liter
3.75"W x 9.00"D x 3.75"H
VetEquip 941444
Isoflo, Isoflurane liquid Zoetis 26675-46-7
Mice, C57BL/6J The Jackson Laboratory 664
Pet Bed Microwave Heating Pad Snuggle Safe 6250
PrecisionGlide Needle 25G BD 305122
Surflo I.V. Catheter 22G Terumo SR-OX2225CA 0.85mm outer diameter
Vascular clamp Roboz Surgical Instrument RS-5424
Vevo770 High Resolution Imaging System VisualSonics Inc. 770

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Citer Cet Article
Isaji, T., Ono, S., Hashimoto, T., Yamamoto, K., Taniguchi, R., Hu, H., Wang, T., Koizumi, J., Nishibe, T., Hoshina, K., Dardik, A. Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis. J. Vis. Exp. (149), e59540, doi:10.3791/59540 (2019).

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