Modelo murino de estenosis venosa central usando fístula aortocaval con una estenosis de salida

Summary

Una fístula aortófica fue creada perforando la aorta renal murina a través de ambas paredes en la vena cava inferior y fue seguida por la creación de una estenosis en su salida a través de la ligadura parcial de la vena cava inferior. Este modelo reproducible se puede utilizar para estudiar la estenosis venosa central.

Abstract

La estenosis venosa central es una entidad importante que contribuye a la insuficiencia de la fístula arteriovenosa (AVF). Un modelo de AVF murino fue modificado para crear una ligadura parcial de la vena cava inferior (IVC) en la salida de la fístula, imitando la estenosis venosa central. Se introducen aspectos técnicos de este modelo. La aorta y la CIV se exponen, después de una incisión abdominal. La aorta infrarrenal y la CIV se diseccionan para la sujeción proximal, y la aorta distal está expuesta para la punción. El CIV en el punto medio entre la vena renal izquierda y la bifurcación aórtica se disecciona cuidadosamente para colocar un 8-0 sutura debajo de la CIV. Después de sujetar la aorta y la CIV, se crea un AVF punzándose la aorta infrarrenal a través de ambas paredes en el CIV con una aguja de 25 G, seguido de ligar un catéter intra-venoso (IV) de 22 G y un IVC juntos. Luego se retira el catéter, creando una estenosis venosa reproducible sin oclusión. La aorta y la CIV no se sujetan después de confirmar la hemostasis primaria. Este novedoso modelo de estenosis venosis central es fácil de realizar, reproducible y facilitará los estudios sobre el fallo de la AVF.

Introduction

Las fístulas arteriovenosas (AVF) son los accesos más comunes para la hemodiálisis, con una latencia superior y una infección reducida en comparación con otros accesos como injertos o catéteres venosos centrales. Sin embargo, hasta el 60% de AVF no puede madurar^1,2,3; una revisión sistemática reciente informó que las tasas de paciencia primaria en 1 año fueron sólo 60%⁴. La estenosis a lo largo de la salida venosa causa predominantemente el fracaso de la maduración de la AVF^5,6. Hay ciertos lugares característicos propensos a la estenosis proximal a la fístula: el segmento de oscilación yuxtaanastomotica para la fístula radiocéfala, la región del arco cefálico para la fístula braquiocéfala y la vena central de la fístula con catéteres subclavistas ipsilaterales colocados o venas yugulares internas^7,8.

La estenosis venosa central es a menudo asintomática en pacientes sin AVF, pero puede causar edema ipsilateral en las extremidades porhipertensión venosa, así como fracaso de la maduración de la fístula cuando se le reta por el flujo de fístula 9. La fisiopatología de la estenosis venosa central probablemente está relacionada con la inflamación y la cascada de coagulación activada después de la colocación del dispositivo. Además, el movimiento constante de la punta del catéter, así como el aumento del flujo de la fístula pueden alterar la tensión de cizallamiento, lo que resulta en la deposición plaquetaria y el engrosamiento de la pared venosa¹⁰. Para entender los mecanismos básicos subyacentes a la falla de AVF causada por la estenosis venosa central, se requiere un modelo animal que imita la estenosis venosa central con un AVF.

Hemos establecido un modelo de fístula aortocaval murino que es fácil de realizar y dominar y recapitula el curso clínico de AVF humana. ¹¹ Aplicamos los conceptos y la técnica de varios modelos murinos previamente establecidos para crear un modelo de AVF murino novedoso con estenosis venosa. Introducimos un modelo de fístula de aortocaval murino con una estenosis IVC en la fístula de salida que se puede utilizar para el estudio de la estenosis venosa central.

Protocol

Todos los experimentos se realizaron con la aprobación del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Yale (IACUC). 1. Anestesia y procedimientos preoperatorios Esterilice todos los instrumentos y materiales quirúrgicos mediante autoclave. Encienda el dispositivo de soporte térmico para estar seguro de que está caliente (40-42 oC). Coloque un ratón C57BL/6 de 9-11 semanas en una cámara de inducción de acrílico y anestetizarlo con isoflur…

Representative Results

Los ratones machos se sometieron a la operación mencionada anteriormente para crear un AVF y una estenosis de CIV. Los ratones de control sólo se sometieron a laparotomía y disección de los tejidos que rodean el CIV, por ejemplo, un procedimiento falso, o sólo la creación de una estenosis de CIV sin la creación simultánea de un AVF. El IVC se observó con ultrasonido Doppler el día 7 después del procedimiento quirúrgi…

Discussion

El modelo aFIA murino se ha utilizado para estudiar los mecanismos básicos y los eventos moleculares que conducen a la maduración de la AVF^13,14. En este estudio, modificamos un modelo aVF murino establecido para crear un modelo de fístula aortocaval murino novedoso con una estenosis IVC en el tracto de salida de la fístula. Nuestro modelo de ligadura es similar a varios modelos murinos descritos anteriormente que utilizan ligadura vascular. Se creó un model…

Materials

20-60 Mhz scan head	VisualSonics Inc.	RMV-704
8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 µ), 3/8 Circle, TAP Point Needle	AROSuture	T06A08N14-13	polyamide monofilament sutures
Induction Chamber, 2 Liter 3.75"W x 9.00"D x 3.75"H	VetEquip	941444
Isoflo, Isoflurane liquid	Zoetis	26675-46-7
Mice, C57BL/6J	The Jackson Laboratory	664
Pet Bed Microwave Heating Pad	Snuggle Safe	6250
PrecisionGlide Needle 25G	BD	305122
Surflo I.V. Catheter 22G	Terumo	SR-OX2225CA	0.85mm outer diameter
Vascular clamp	Roboz Surgical Instrument	RS-5424
Vevo770 High Resolution Imaging System	VisualSonics Inc.	770