Summary

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Published: July 11, 2019
doi:

Summary

Bir aokaval fistül, her iki duvar üzerinden Vena Cava inferior içine murine infra-renal aort delip tarafından oluşturuldu ve inferior vena cava kısmi ligasyon yoluyla onun çıkış bir stenoz oluşturulması izledi. Bu tekrarlanabilir model, Merkezi venöz stenozu incelemek için kullanılabilir.

Abstract

Merkezi venöz stenoz, arteriovenöz fistül (AVF) yetmezliğine katkıda bulunan önemli bir varlıktır. Bir murine AVF modeli, fistül çıkışı, Merkezi venöz stenozis taklit inferior vena kava (ıVC) kısmi bir ligasyon oluşturmak için değiştirildi. Bu modelin teknik yönleri tanıtıldı. Aort ve ıVC, karın kesi sonrasında ortaya çıkar. İnfra-renal aort ve IVC proksimal bağlama için disseke ve distal aort delinme için maruz kalır. Sol böbrek ven ve aort bifurkasyon arasındaki orta noktada IVC dikkatle bir 8-0 yerleştirmek için disseke olduğunu ıVC altında sütür. Aort ve IVC ‘yi bağladıktan sonra, bir AVF, her iki duvara da 25 g iğne ile IVC içine infra-renal aort delip, ardından 22 g intra-venöz (IV) kateter ve IVC ile birbirine bağlanarak oluşturulur. Sonra kateter kaldırılır, oklüzyon olmadan yeniden üretilebilen bir venöz stenoz yaratılır. Aort ve ıVC birincil hemostaz onayladıktan sonra UNCL, vardır. Merkezi ven stenozu bu roman modeli, yeniden üretilebilen, gerçekleştirmek kolaydır ve AVF başarısızlığı üzerinde çalışmalar kolaylaştıracaktır.

Introduction

Arteriovenöz fistüller (AVF), Greftler veya Merkezi venöz kateter gibi diğer erişimler ile karşılaştırıldığında üstün patens ve azaltılmış enfeksiyon ile hemodiyaliz için en yaygın erişimlerdir. Ancak, AVF% 60 kadar olgun1,2,3başarısız; Son zamanlarda sistematik bir inceleme, 1 yılda primer patens oranlarının sadece%460 olduğunu bildirdi. Venöz çıkış boyunca stenoz ağırlıklı olarak AVF olgunlaşma başarısızlığa neden olur5,6. Fistül için proksimal stenoza eğilimli bazı karakteristik yerler vardır: radyosefalik fistül için juxtaanastomotik salıncak kesimi, brakiyosefalik fistül için sefalik kemer bölgesi ve daha önce fistül için merkezi ven yerleştirilmiş ipsilateral subklavian veya internal juguler ven kateter7,8.

Merkezi venöz stenoz genellikle AVF olmayan hastalarda asemptomatiktir, ancak venöz hipertansiyon ile ipsilateral ekstremite ödem ve fistül akışı9ile meydan okuyan fistül olgunlaşma yetmezliği neden olabilir. Merkezi venöz stenozun patofizyolojisi büyük olasılıkla inflamasyon ve cihaz yerleştirme sonrası aktif pıhtılaşma basamakıyla ilişkilidir. Ayrıca, kateter ucunun sürekli hareketi ve fistül akışından artan akış, kayma stresini değiştirebilir, trombosit birikimi ve venöz duvar kalınlaşması10‘ a neden olabilir. Merkezi venöz stenozun neden olduğu AVF yetmezliği temel mekanizmaları anlamak için, bir AVF ile Merkezi venöz stenozu taklit eden bir hayvan modeli gereklidir.

Biz gerçekleştirmek ve Master ve insan AVF klinik ders recapitir kolay bir murine aokaval fistül modeli kurduk. 11 biz, venöz stenoz ile yeni bir MURINE AVF modeli oluşturmak için daha önce kurulan birkaç duvar modelinin kavramları ve tekniği uygulandı. Biz Merkezi venöz stenozis çalışması için kullanılabilecek çıkış fistül bir ıVC stenozu ile bir murine aokaval fistül modeli tanıtmak.

Protocol

Tüm deneyler Yale Üniversitesi Kurumsal hayvan bakımı ve kullanım Komitesi (ıAYUC) onayı ile yapıldı. 1. anestezi ve ameliyat öncesi prosedürler Tüm cerrahi aletleri ve malzemeleri otoklavlama ile sterilize edin. Sıcak olduğundan emin olmak için termal destek cihazını açın (40 – 42 °C). Bir akrilik indüksiyon odasına bir 9 – 11-hafta eski C57BL/6 fare yerleştirin ve buharlaşmış 2,5% Isoflurane ve 0,8 L/min oksijen ile anestezize. Anestezi indü…

Representative Results

Erkek fareler, hem AVF hem de ıVC stenozu oluşturmak için yukarıda bahsedilen operasyondan dolayı yapıldı. Kontrol fareleri, ıVC ‘yi çevreleyen dokularda sadece laparotomi ve diseksiyon uygulandı, örn. bir sahte prosedür veya bir AVF ‘nin eşzamanlı oluşturulması olmadan sadece bir ıVC stenozu yaratılması. IVC, cerrahi işlemden sonra 7. gün Doppler ultrason ile gözlemlenmiştir (Şekil 2…

Discussion

Murine AVF modeli,13,14olgunlaşma yol açan temel mekanizmalar ve moleküler olayları incelemek için kullanılmıştır. Bu çalışmada, fistül çıkış yolu içinde bir ıVC stenozu ile yeni bir murine aokaval fistül modeli oluşturmak için kurulan bir murine AVF modelini değiştirdik. Bizim ligasyon modeli vasküler ligasyon kullanan birkaç önceden açıklanan murine modelleri benzer. Derin ven trombozu bir duvar modeli 30 G iğne spacer ile kısmi ?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma ABD Ulusal Sağlık Enstitüsü (NıH) Grant R01-HL128406 tarafından desteklenmektedir; Amerika Birleşik Devletleri Gaziler Işleri bölümü Biyomedikal Laboratuar Araştırma ve geliştirme programı Merit Inceleme Ödülü ı0d-BX002336; yanı sıra kaynakları ve VA Connecticut sağlık sistemi, Batı Haven, CT tesisleri kullanımı ile.

Materials

20-60 Mhz scan head VisualSonics Inc. RMV-704
8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 µ), 3/8 Circle, TAP Point Needle AROSuture T06A08N14-13 polyamide monofilament sutures
Induction Chamber, 2 Liter
3.75"W x 9.00"D x 3.75"H
VetEquip 941444
Isoflo, Isoflurane liquid Zoetis 26675-46-7
Mice, C57BL/6J The Jackson Laboratory 664
Pet Bed Microwave Heating Pad Snuggle Safe 6250
PrecisionGlide Needle 25G BD 305122
Surflo I.V. Catheter 22G Terumo SR-OX2225CA 0.85mm outer diameter
Vascular clamp Roboz Surgical Instrument RS-5424
Vevo770 High Resolution Imaging System VisualSonics Inc. 770

References

  1. Dember, L. M., et al. Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial. JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).
  2. Dixon, B. S. Why don’t fistulas mature?. Kidney International. 70 (8), 1413-1422 (2006).
  3. Wilmink, T., Hollingworth, L., Powers, S., Allen, C., Dasgupta, I. Natural History of Common Autologous Arteriovenous Fistulae: Consequences for Planning of Dialysis. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 51 (1), 134-140 (2016).
  4. Al-Jaishi, A. A., et al. Patency rates of the arteriovenous fistula for hemodialysis: a systematic review and meta-analysis. American Journal of Kidney Diseases. 63 (3), 464-478 (2014).
  5. Rocco, M. V., Bleyer, A. J., Burkart, J. M. Utilization of inpatient and outpatient resources for the management of hemodialysis access complications. American Journal of Kidney Diseases. 28 (2), 250-256 (1996).
  6. Roy-Chaudhury, P., Sukhatme, V. P., Cheung, A. K. Hemodialysis vascular access dysfunction: a cellular and molecular viewpoint. Journal of the American Society of Nephrology. 17 (4), 1112-1127 (2006).
  7. Quencer, K. B., Arici, M. Arteriovenous Fistulas and Their Characteristic Sites of Stenosis. AJR: American Journal of Roentgenology. 205 (4), 726-734 (2015).
  8. Kian, K., Asif, A. Cephalic arch stenosis. Semin Dial. 21 (1), 78-82 (2008).
  9. Agarwal, A. K. Central vein stenosis. American Journal of Kidney Diseases. 61 (6), 1001-1015 (2013).
  10. Glanz, S., et al. Axillary and subclavian vein stenosis: percutaneous angioplasty. Radiology. 168 (2), 371-373 (1988).
  11. Yamamoto, K., et al. The mouse aortocaval fistula recapitulates human arteriovenous fistula maturation. American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 305 (12), H1718-H1725 (2013).
  12. North American Symptomatic Carotid Endarterectomy Trial. Methods, patient characteristics, and progress. Stroke. 22 (6), 711-720 (1991).
  13. Kuwahara, G., et al. CD44 Promotes Inflammation and Extracellular Matrix Production During Arteriovenous Fistula Maturation. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (6), 1147-1156 (2017).
  14. Protack, C. D., et al. Eph-B4 regulates adaptive venous remodeling to improve arteriovenous fistula patency. Scientific Reports. 7 (1), 15386 (2017).
  15. Payne, H., Brill, A. Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis. J Vis Exp. (130), (2017).
  16. Nam, D., et al. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 297 (4), H1535-H1543 (2009).
  17. Ene-Iordache, B., Remuzzi, A. Disturbed flow in radial-cephalic arteriovenous fistulae for haemodialysis: low and oscillating shear stress locates the sites of stenosis. Nephrology, Dialysis, Transplantation. 27 (1), 358-368 (2012).
  18. Yamamoto, K., et al. Disturbed shear stress reduces Klf2 expression in arterial-venous fistulae in vivo. Physiological reports. 3, (2015).
  19. Remuzzi, A., Ene-Iordache, B. Novel paradigms for dialysis vascular access: upstream hemodynamics and vascular remodeling in dialysis access stenosis. Clinical Journal of the American Society of Nephrology. 8 (12), 2186-2193 (2013).
check_url/fr/59540?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Isaji, T., Ono, S., Hashimoto, T., Yamamoto, K., Taniguchi, R., Hu, H., Wang, T., Koizumi, J., Nishibe, T., Hoshina, K., Dardik, A. Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis. J. Vis. Exp. (149), e59540, doi:10.3791/59540 (2019).

View Video