Flaş Dondurma ve E12.5 Fare Beyin Cryosectioning

Summary

Bu video flaş fare embriyonik beyin dokusu dondurma ve kesit alma teknikleri vardır gösterdi. Ortaya çıkan doku bölümleri çatlak ve diğer çarpıtmalar olduğundan emin olmak için kesim sırasında kullanılabilir sorun giderme yöntemleri de dahil olmak üzere, Kriyostat kullanmak için yararlı ipuçları verilmiştir.

Protocol

Istenilen zaman için PBS içinde% 4 paraformaldehid doku sabitleyin. Sakkaroz demlenmeye doku (cryoprotection) 2059 tüp PBS w / v% 30 sakaroz çözeltisini olun. PBS içinde doku 3x sallanan ile durulayın (~ 5 dk). % 30 sukroz solüsyonu yerleştirin doku. Doku lavabo olmaz. Batırdı, 4 ° C gecede kadar veya doku yerleştirin. Etiket uygun boyutu, bilgi ve yönlendirme ile cryomold. (Baloncuklar önlemek) OCT ile cryomold doldurun. Ekim banyo …

Materials

Material Name	Tipo	Company	Catalogue Number	Comment
Tissue-Tek Cryomold		Ted Pella, Inc.	27181
O.C.T.		Ted Pella, Inc	27050
Sucrose solution				30% sucrose solution in PBS w/v
paraformaldehyde				4% paraformaldehyde in PBS