Summary
תאי גזע נחקרים ללא הרף כטיפולים פוטנציאליים עבור אנשים עם נזק שריר הלב, עם זאת, הכדאיות והשמירה שלהם ירד בתוך רקמה פצועה יכול להשפיע על היעילות שלהם לטווח ארוך. בכתב יד זה אנו מתארים שיטה חלופית למשלוח תאי גזע במודל מורין של פגיעה בהתרככיה.
Abstract
יש עניין משמעותי בשימוש בתאי גזע (SCs) להתאוששות של תפקוד הלב באנשים עם פציעות שריר הלב. הנפוץ ביותר, טיפול בתאי גזע לב נחקר על ידי אספקת SCs במקביל עם האינדוקציה של פגיעה בשריר הלב. עם זאת, גישה זו מציגה שתי מגבלות משמעותיות: הסביבה האיסכמית הפרו דלקתית העוינת המוקדמת עשויה להשפיע על הישרדותם של SCs מושתלים, והיא אינה מייצגת את תרחיש האוטם subacute שבו SCs סביר להניח ישמשו. כאן אנו מתארים סדרה של שני חלקים של הליכים כירורגיים עבור אינדוקציה של פגיעה איסכמיה-reperfusion ומסירה של תאי גזע mesenchymal (MSCs). שיטה זו של ניהול תאי גזע עשויה לאפשר את הכדאיות והשמירה הארוכה יותר סביב רקמה פגומה על ידי עקיפת התגובה החיסונית הראשונית. מודל של פגיעה reperfusion איסכמיה היה מושרה בעכברים מלווה במשלוח של תאי גזע mesenchymal (3.0 x 105), מבטא בstabing את הגן הכתב גחלילית לוציפראז תחת היזם CMV מבוטא באופן קונסטרטיבי, intramyocardially 7 ימים מאוחר יותר. בעלי החיים תדמינו באמצעות אולטרסאונד והדמיה ביו-לומסצנטית לאישור פציעה והזרקת תאים, בהתאמה. חשוב לציין, לא היה שיעור סיבוך נוסף בעת ביצוע גישה זו של שני נהלים עבור מסירה SC. שיטה זו של ניהול תאי גזע, יחד עם ניצול של גנים עיתונאי המדינה-of-the-art, עשוי לאפשר מחקר vivo של קיום ושמירה של SCs מושתלים במצב של איסכמיה כרונית נפוץ לראות קלינית, תוך עקיפת התגובה הפרו דלקתית הראשונית. לסיכום, הקמנו פרוטוקול לעיכוב במשלוח של תאי גזע לתוך שריר הלב, אשר יכול לשמש כגישה חדשה פוטנציאלית לקידום התחדשות של הרקמה הפגועה.
Introduction
מחלות לב וכלי דם נשאר הגורם הנפוץ ביותר של תחלואה ותמותה ברחבי העולם. אירועי לב איסכמי נמצאו מזיקים לתפקוד הכולל של שריר הלב והתאים שמסביב1. רק 0.45-1.0% מקרדיומיוציטים יתחדשו מדי שנה לאחר שנזק שריר הלביתרחש 2. למרות הביקוש הגובר וההתמקדות הטבועה בפיתוח טיפולים, טיפולים המסייעים להתחדשות של רקמות פצועות היו קשים להקים ועדייןדורשים אופטימיזציה נוספת 3,,4,,5. טיפולים בתאי גזע הוצגו כדרך חלופית כדי להצעיר רקמה פגומה לאחר אירוע איסכמי; עם זאת, קידום טיפולים אלה כבר אתגר על ידי הישרדות מוגבלת ושמירה של התאים לאזור6 פצוע.
המיקרו-סביבה של הלב לאחר אירוע איסכמי יכולה להיות מאופיינת כ hypoxic, פרו חמצון, ופרו דלקתיות, הצגת תנאים עוינים עבור תאי גזע טיפוליים להסתגללהישרדות 7,,8. כמו תגובה חיסונית מופעלת בעקבות פציעה, לימפוציטים נאיביים, מקרופאגים, נויטרופילים ותאי תורן מנסים לתקן את הנזק על ידי הסרת תאים גוססים ואיזות התהליך לשיפוץרקמות 9,10,11. בתוך 3 הימים הראשונים לאחר איסכמיה, דלקת היא בשיאה עם שחרורו של ציטוקינות פרו דלקתיות עם מספרים גבוהים של נויטרופילים ומונוציטים באזור10,12. לאחר 7 ימים, חלק גדול מהדלקת דעך והמעבר לתאים שיפוץ מתחיל, ממשיך עד מפל השיפוץ הושלמה, כ 14 ימים בעכברים13. השיטה הכירורגית שלנו היא גישה חלופית פוטנציאלית להחדרת ביולוגיות לתוך שריר הלב כדי לעקוף את התגובה החיסונית המולדת שיא לאחר פגיעה איסכמיה reperfusion. במקביל, זה יאפשר את המחקר של כל טיפולים במצב של איסכמיה subacute / כרוני שבו ייתכנו משתנים שונים לשקול בהשוואה אוטם שריר הלב חריפה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
הניסויים בוצעו על עכברי C57BL/6 נקבה, גיל 10-12 שבועות ו 20-25 גרם משקל גוף. כל ההליכים בבעלי חיים צייתו לסטנדרטים שנקבעו במדריך לטיפול ושימוש בבעלי חיים מעבדה (המכון למשאבי בעלי חיים במעבדה, האקדמיה הלאומית למדעים, בת'סדה, MD, ארה"ב) ואושרו על ידי המכללה לרפואה של מאיו לרפואה מוסדית לטיפול בבעלי חיים וועדת שימוש (IACUC).
1. הכנה וצנרור
- Autoclave כל כלי הניתוח לפני הניתוח. אם יש לבצע מספר ניתוחים בפגישה אחת, נקה את המכשירים לאחר כל בעל חיים ועיקור מחדש באמצעות מחטא חרוזים חם.
- להמריד את העכברים עם 3.5-4% isoflurane ב 1 L/min O2 בתא אינדוקציה.
- לתת Buprenorphine SR 1 מ"ג/ק"ג (משכך כאבים) תת עורית, לשקול את החיה, ולהזין את המשקל לתוך מכונת ההנשמה.
- לגלח את הצד השמאלי של החזה מעצם החזה לרמה של הכתף ולהחיל קרם depilatory כדי להסיר פרווה עודפת.
- עבור הליך reperfusion איסכמיה לשמור על הלחץ הסופי החיובי (PEEP) על מכונת ההנשמה ב 2 cmH2O. עבור הזרקה מושהית של הליך תאים לשנות את ה-PEEP ל 3 cmH2O כדי למנוע קריסת ריאות.
- צנרר את החיה באמצעות צינור אנדוטרצ'ל 20 G, להעביר כרית חימום מבוקרת כדי לשמור על טמפרטורת גוף של 35-37 ° C.
- מניחים את העכבר על מכונת הנשמה בהתכוויה רוחבית עם קצה גולגולתי בצד שמאל וקץ סיבתי בצד ימין.
- לשמור על הרדמה ב 2-2.5% isoflurane ב 1 L/min O2 למשך שארית ההליך.
- לקרצף את האזור הכירורגי לסירוגין בין povidone-יוד ואלכוהול ספוגיות שלוש פעמים ולהחיל משחה אופטלמית על שתי העיניים.
2. פציעת איסכמיה
- באמצעות #10 להב עשה חתך אנכי 2.5 מ"מ לימין הפטמה השמאלית ביותר בשדה התצוגה.
- באמצעות מספריים לחתוך דרך שכבות שריר שטחי עד השרירים intercostal וצלעות גלויים.
- בעת הרמת הצלעות והרקמה שמסביב, לחתוך דרך החלל הבין-צלבי בין הצלעות 4 ו -5, ואז להכניס את מפשק העפעפיים לחלל הפתוח.
- משוך את החיידק באמצעות מ מפסים מעוקלים, הזזת הריאה כלפי מעלה ומחוץ לתצוגה.
- לדמיין את עורק LAD, באמצעות תפר ניילון 9-0, לעבור דרך שריר הלב מתחת לעורק 2.5 מ"מ דיסטל לתכלת השמאלית ולקשור קשר מרובע רופף.
- חותכים 1 ס"מ של צינורות פוליאתילן ומניחים אותו בתוך הקשר הרופף.
- אבטחו את התפר מסביב לצינורות, אישרו איסכמיה, ואז שחררו אחרי 35 דקות.
הערה: אשר איסכמיה באמצעות חיוורון והפרעה בקצב הלב בחדר. - לאחר שחרור הקשירה והסרת הצינורות, המתן 5 דקות כדי לאשר את ההתרגזות של שריר הלב.
- שים צינור צנתר 24 ג'י.וי.
- סגור את החתך הבין-צלבי עם תפר קליט 6-0 בתבנית פשוטה שהופסקה.
- סגור את שכבת השריר עם תפר 6-0 נספג בתבנית תפר רציפה.
- לאחר סגירת שכבת השריר השטחית, הסר את נקז החזה תוך משיכת האוויר מחיל בית החזה באמצעות מזרק שחפת 1 מ"ל.
- סגור את חתך העור עם תפר קליט 6-0 בתבנית מזרן אופקית רציפה
הערה: תפרים ניילון ודפוס תפר בלתי רציפות עשוי לשמש גם לשכבת העור. - לתת 1.5 מ"ל של תמיסת מלח חמה תת עורית ולהחיל משחה משולשת אנטיביוטיקה לאתר החתך כדי למנוע זיהום.
- כבה את isoflurane ולאפשר לחיה לנשום דרך מכונת ההנשמה על 100% O 2 עד שהוא יכוללנשום ברציפות ללא סיוע.
- העבר את העכבר לכלוב ללא מצעים או לכלוב עם מצעים מכוסים (מגבת נייר או וילונות) על משטח חם בטמפרטורה של 35-37°C עד להחלמה מלאה.
3. משלוח תאי גזע mesenchymal עכבר
הערה: הזן של עכברים המשמשים להליך הם קו מלידה ונחשבים זהים גנטית. תאי הגזע mesenchymal הושגו מבעלי חיים מאותו זן, על ידי עיצוב פרוטוקול, דיכוי המערכת החיסונית לא היה מושרה1.
- השלם את שלבי ההכנה וצנרור כפי שנעשה בעבר עבור ההליך הראשון.
- הסר את התפר משכבת העור באמצעות מספריים ומפסים.
- עם #10 אזמל, לעשות חתך באותו מיקום כמו הניתוח הקודם.
- המשך להשתמש באזמל כדי לחתוך דרך רקמת צלקת עד תפר שכבת שריר גלוי
- באמצעות המספריים והמקציות להסיר את התפר ולחתוך את שכבת השריר פתוח.
- דמיין והסר את התפרים המחזיקים את הצלעות יחד ולהמשיך לחתוך דרך השריר הבין-צלע מהחתך הקודם.
הערה: ייתכן שהריאות דבקו בקיר החזה, אם הדבר מתרחש, השתמש במשקולות קהות או מעוקלות כדי להפריד ולשחרר אותן בזהירות. - מניחים את מפשק העפעפיים בחלל הבין-קוסטלי ואתרו את אזור הרצועה הקודמת.
- טען את תאי הגזע mesenchymal (3.0 x 105), מושעה20 μL PBS, לתוך מזרק אינסולין 30 G, לכופף את המחט מעט לפי הצורך עבור הזווית הנכונה להזריק.
הערה: תאי גזע Mesenchymal (MSCs) היו מבודדים רקמת שומן של 4-6 שבועות C56BL/6 עכברים. תאי מעבר מוקדמים (p3) הושרשו עם וקטור המבטא את הגן גחלילית לוציפראז תחת מקדם CMV כדי לאפשר ניטור הכדאיות של תאי vivo. MSC עכבר נגזר אדיפוז היו מאופיינים ציטומטריית זרימה ואת התאים היו חיוביים CD44, CD29, CD90 ו CD105 אבל שלילי עבור סמן hematopoietic CD4514. לפני הזריקה, MSCs היו תרבותיים לפחות מעבר אחד כדי למנוע אובדן של תאים מתהליך ההפשרה. - נע בכיוון מן apex לכיוון הבסיס של הלב להכניס את המזרק לאזור peri-אוטם עד פתיחת המחט הוא לחלוטין בתוך שריר הלב.
- ברגע שנכנס לאט להזריק את התאים לתוך שריר הלב, לחכות 3 s, ולאחר מכן להסיר את המחט.
- שים לב מקרוב במשך 3 דקות כדי להיות בטוח ללא תגובות חריגות לתאים כגון פתפור חדרי.
- מניחים צינור צנתר 24 ג'י 4 בחלל בית החזה, חלל בין-תאי אחד מימין לפתיחה.
- סגור את שכבות intercostal, שריר, ועור ולהסיר את נקז החזה באותה שיטה כמו ההליך הראשון.
- לתת 1.5 מ"ל של תמיסת מלח חמה תת עורית ולהחיל משחה משולשת אנטיביוטיקה לאתר החתך כדי למנוע זיהום.
- כבה את isoflurane ולאפשר לבעלי חיים לנשום דרך מכונת ההנשמה על 100% O 2 עד שהוא מסוגללנשום ברציפות ללא סיוע.
- העבר את העכבר לכלוב ללא מצעים או לכלוב עם מצעים מכוסים (מגבת נייר או וילונות) על משטח חם בטמפרטורה של 35-37°C עד להחלמה מלאה.
4. טיפול לאחר הניתוח ים בעקבות שני ההליכים
- יש להקפיד על החיה ללא הרף עד לנסימה ספונטנית, לתפיכת החזה ולתנועה נורמלית.
- המשך תצפית כל 15-30 דקות לפחות 3 שעות ביום הניתוח.
- בדוק את העכברים לתסיסה הפצע או כאב חריג פעם ביום במשך 5 ימים, אז 2-3 פעמים בשבוע.
- אם בעל החיים מראה סימנים של כאב (כלומר גב מקושת, תנועה מינימלית, grimacing, או פרווה מוזנחת) לאחר 72 שעות לאחר הניתוח, לספק מנה נוספת של משכך כאבים Buprenorphine SR.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
פציעת תפרוק איסכמיה נגרמה בעכברים ביום 0, ואחריו אקו-קרדיוגרמה ואלקטרוקרדיוגרם לאחר הניתוח ביום שלפני השתלת תאי גזע. ניתוח אולטרסאונד ואלקטרוקרדיוגרם אישר אוטם וירידה בתפקוד ההתכווצות בחדר הלב(איור 1לערך). בדיקה נוספת של הנתונים הראתה כי השבר והקיצור החלקי ירדו בעכברים שקיבלו פגיעה איסכמית, בעוד שנפחי הסיום והסיסטוליים גדלו(טבלה 1). בהשוואה לב עכבר נורמלי(איור 2A), הכתמתטריכרום Masson של רקמת שריר הלב 7 ימים לאחר הפציעה(איור 2B)הראה תצהיר קולגן מוגבר ודילול של קיר החדר השמאלי. ההליך השני בוצע 7 ימים לאחר הפציעה; עכברים קיבלו הזרקה תוך הכרית של תאי גזע mesenchymal (3.0 x 105 ב 20 μL PBS) בהבעה באופן דקירה את הגן הכתב גחלילית לוציפראז תחת היזם CMV שהביע באופן קונסטרטיבי. בהדמיה ביולומונדסנטית vivo (BLI) של עכברים אלה הושלמה יום לאחר השתלת תאי גזע לאישור של זריקה מוצלחת. המסירה המוצלחת של MSCs היא מופת על ידי אות BLI, לעומת עכברים שנגרמו איסכמיה reperfusion פציעה אך לא קיבל MSCs (דמויות 3A, B). הליך התערבות כפול זה היה שיעור התשה של 22%, בדומה לזה שנצפה בבעלי חיים שקיבלו MSCs בתרחיש אקוטי.
איור 1: הדמיה של תפקוד הלב של העכברים. ניתוח אולטרסאונד של העכבר בבסיס (A) מראה התכווצות אחידה של שריר הלב בחדר השמאלי בהשוואה לעכבר לאחר פציעת איסכמיה reperfusion (B), אשר מראה תנועה חדרית ירדה. בהשוואה לאלקטרוקרדיוגרם הבסיסי של עכבר רגיל (C), ישנן שינויים משמעותיים במקטע ST של עכבר עם פציעת איסכמיה reperfusion (D), המציין ירידה בתפקוד החדר. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.
| EF% | FS% | EDV (μl) | ESV (μl) | SV (μl) | |
| בסיסית | 74.19±1.2 | 44.67±2 | 3.6±3.8 | 6.14±0.98 | 2.7 םיוווווווו |
| לאחר IR | 43.9±3.8 | 30.65±3.8 | 33.88±4.4 | 18.11±1.4 | 3.2 3.74 ±3.74 |
טבלה 1: ניתוח אקוקרדיוגרפיה. משתנים מבוטאים כ- Mean ± שגיאת תקן של ממוצע. EF: שבר פליטה, FS: קיצור חלקי, EDV: אמצעי אחסון סוף-דיאסטולי, ESV: אמצעי אחסון סוף-סיסטולי, SV: עוצמת קו.
איור 2: כתם היסטולוגי של רקמת לב. הכתמת הטריכרום של מאסון של שריר הלב בעכבר רגיל(A)אינה מראה פגיעה ברקמת הלב, בעוד העכבר עם פגיעה reperfusion איסכמיה(ב)מראה תצהיר קולגן מוגבר ודילול בשריר הלב של החדר השמאלי, תמיכה בקביעה של אוטם מוצלח. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.
איור 3: בהדמיה ביורו ביו-לום. עכבר עם פציעת איסכמיה reperfusion שלא קיבל הזרקה תוך-מקרדיאלית של תאי גזע לא הראה שום אות bioluminescent(A). עכבר עם פציעת איסכמיה reperfusion אשר קיבל הזרקה מושהית של תאי גזע mesenchymal (CMV-FLUC) הראה כמות משמעותית של אות (B). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
מעל 85 מיליון אנשים ברחבי העולם מושפעים ממחלות לב וכלידם 3. השכיחות הגבוהה של אירועים איסכמיים אלה מצדיקה פיתוח נוסף והרחבה של טיפולים חלופיים לקידום התחדשות של רקמות פגומות. שיטות מסורתיות לנצל את הליך reperfusion איסכמיה בסביבה חריפה עם ניהול עוקב שלטיפולית 1. תגובות דלקתיות נמצאות בשיאה בין 3-4 ימים לאחר אירוע איסכמי לב, עם חדירה של נויטרופילים, מקרופאגים, וציטוקין מוגבר איתות10,12. לאחר תקופה זו של פירוק תאים מתים, התגובה החיסונית העיקרית מתחילה לדעך ולעבור לשלבישיפוץ 13. יתר על כן, חשוב כי טיפולים נחקרים באותו תרחיש כפי שהוצג בסביבה הקלינית. בכתב יד זה, אנו מציגים תוצאות מייצגות שהתקבלו מעכברים איסכמיים כדי להדגים את הכדאיות ואת הבטיחות של ההליך הכירורגי הכפול, עם הזרקה מושהית של MSCs. אנו מאמינים כי גישה זו יכולה לשמש לא רק עבור מודלים בעלי חיים איסכמיה שריר הלב, אלא גם עבור מודלים של בעלי חיים של מחלה שבו דלקת עשויה לשחק תפקיד קריטי, שינוי ההצלחה של אסטרטגיות טיפוליות המערבות ביולוגיות, כגון טיפולים בתא או סמים.
לכן, בכתב יד זה אנו מתארים שיטה כירורגית להעברת תאי גזע לתוך אוטם subacute, 7-10 ימים לאחר שגורם לפציעה איסכמיה reperfusion בעכברים. טכניקה זו תהיה שימושית בחקר הכדאיות של תאי גזע וביולוגיה בהקשר לשלבים שונים של התגובה החיסונית ובשלב התועה/כרוני של תהליך המחלה האיסכמית. מודלים מורין הם נושאים אידיאליים עבור שיטה זו של מחקר במונחים של רבייה ונוחות, עם זאת, הם עשויים לשאת כמה חסרונות. גודלו של בעל החיים מצדיק מידה מסוימת של מיומנות כירורגית אם כי, עם תרגול, הליכים אלה ניתן להשלים בהצלחה.
כדי לבצע את ההליכים המוצגים בכתב יד זה, חשוב לציין כמה צעדים מרכזיים ותצפיות חיוניים להשלמה מוצלחת של ניתוחים אלה. שלב קריטי של ההליך הראשון הוא הרצועה של העורק הכלילי הקדמי השמאלי יורד (LAD) ומיקום של צינורות פוליאתילן כדי להשיג איסכמיה זמנית של שריר הלב. שימוש בספוגיות כותנה סטריליות מחודדות כדי להפעיל לחץ על רקמת הלב דיסטל לאטריום מאפשר תיחום משופר של LAD. ברגע הצינורות הוא במקום ואת התפר מאובטח היטב, תצפית של הפרעה בקצב הלב וחיור של הרקמה חיונית לקביעת אינדוקציה מוצלחת של איסכמיה. תקופת האיסכמיה וההתפרה שלאחר מכן, לאחר תפר שוחרר, חשוב לעקביות של פציעה על פני בעלי חיים מרובים. בנוסף, במהלך ההליך המתואר השני, הזרקת תאי גזע mesenchymal יש לבצע עם תנועות אופקיות בכיוון דיסטלי לכיוון פרוקסימלי. בשל פיברוזיס כתוצאה מההליך הראשון, לחץ משמעותי אך יציב נדרש להכניס את המחט ואחריו הזרקה עקבית איטית של התאים כדי למנוע הלם. לבסוף, מתן חום מתמשך ונוזלים תת עוריים משלימים לפני ערירת עכברים מהרדמה, ימנע אובדן חום וסיוע בהחלפת כל דם שאבד במהלך ההליכים, כמו גם ההתאוששות הכוללת של בעל החיים.
בכתב יד זה, אנו מספקים פרוטוקול להשלמת הליכים מרובים כשיטה לניהול תאי גזע כטיפול טיפולי במודל מורין של פגיעה איסכמיה כרונית. ניצול של הליכים כירורגיים אלה מציע גישה חדשה לאספקת תאי גזע לסביבה איסכמית עוינת לאחר פציעה כדי לשפר את הכדאיות שלהם לאורך זמן. השימוש בגישה זו לחקר הטיפול בתאי גזע ישלים באופן משמעותי מחקרים אחרים המתמקדים בשימוש ב-SCs בסביבה אקוטית. לסיכום, הפרוטוקול המתואר מצליח בגידול לפציעה איסכמית ולעיכוב בהשתלה של תאי גזע לשימוש כמודל במחקרים פרה-קליניים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
לסופרים אין מה לחשוף.
Acknowledgments
ללא.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% NaCl Irrigation, USP | Baxter | 0338-0048-04 | |
| 11x12" Press n' Seal surgical drape, autoclavable | SAI Infusion Technologies | PSS-SD | |
| 24G 3/4" IV catheter tube | Jelco | 4053 | |
| 28G x 1/2" 1mL allergy syringe | BD | 305500 | Injection of analgesic |
| 30G x 1/2" 3/10cc insulin syringe | Ulticare | 08222.0933.56 | Injection of stem cells |
| 6-0 S-29, 12" Vicryl suture | Ethicon | J556G | Intercostal, superficial muscle and skin layer incision closure |
| 9-0 BV100-4, 5" Ethilon suture | Ethicon | 2829G | Ligation of the LAD artery |
| Absorbent underpad | Thermo Fischer Scientific | 14-206-64 | For underneath the animal |
| Alcohol prep pads, 2 ply, medium | Coviden | 6818 | |
| Anti-fog face mask | Halyard | 49235 | |
| Bonn Strabismus scissors, curved, blunt | Fine Science Tools | 14085-09 | |
| Buprenorphine HCL SR LAB 1mg/ml, 5 ml | ZooPharm Pharmacy | Buprenorphine narcotic analgesic formulated in a polymer that slows absorption extending duration of action (72 hours duration of activity). | |
| Castroviejo needle holders, curved | Fine Science Tools | 12061-01 | |
| Curity sterile gauze sponges | Coviden | 397310 | |
| Delicate suture tying forceps, 45 angle bent | Fine Science Tools | 11063-07 | |
| Electric Razor | Wahl | Fur removal | |
| Isoflurane 100 ml | Cardinal Health | PI23238 | Anesthetic |
| Lab coat | |||
| Monoject 1 mL hypodermic syringe | Coviden | 8881501400 | |
| Moria iris forceps, curved, serrated (x2) | Fine Science Tools | 11370-31 | |
| Moria speculum retractor | Fine Science Tools | 17370-53 | |
| Mouse endotracheal intubation kit | Kent Scientific | ||
| Nair depilatory cream | Johnson & Johnson | Fur removal | |
| Optixcare eye lube plus | Aventix | Sterile ocular lubricant | |
| Physiosuite ventilator | Kent Scientific | ||
| PolyE Polyethylene tubing | Harvard Apparatus | 72-0191 | Temporary compression of LAD artery |
| Povidone-iodine swabs | PDI | S41125 | |
| Scalpel, 10-blade | Bard-Parker | 371610 | |
| Sterile 3" cotton tipped applicators | Cardinal Health | C15055-003 | |
| Sterile 6" tapered cotton tip applicators | Puritan | 25-826-5WC | |
| Sterile gloves | Cardinal Health | N8830 | |
| Sterilization pouches | Medline | MPP100525GS | |
| Surgery cap | |||
| Surgical Microscope | Leica | M125 | |
| Suture tying forceps, straight (x2) | Fine Science Tools | 10825-10 | |
| Transpore surgical tape | 3M | 1527-1 | |
| Triple antibiotic ointment | G&W Laboratories | 11-2683ILNC2 | Topical application to prevent infection |
| Vannas-Tübingen Spring Scissors, curved | Fine Science Tools | 15004-08 | |
| Vetflo vaporizer | Kent Scientific |
References
- Franchi, F., et al. The Myocardial Microenvironment Modulates the Biology of Transplanted Mesenchymal Stem Cells. Molecular Imaging Biology. , (2020).
- Bergmann, O., et al. Evidence for cardiomyocyte renewal in humans. Science. 324 (5923), 98-102 (2009).
- Writing Group, M., et al. Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association. Circulation. 133 (4), 38 (2016).
- Gersh, B. J., Simari, R. D., Behfar, A., Terzic, C. M., Terzic, A. Cardiac cell repair therapy: a clinical perspective. Mayo Clinic Protocol. 84 (10), 876-892 (2009).
- Terzic, A., Behfar, A. Regenerative heart failure therapy headed for optimization. European Heart Journal. 35 (19), 1231-1234 (2014).
- Beegle, J., et al. Hypoxic preconditioning of mesenchymal stromal cells induces metabolic changes, enhances survival, and promotes cell retention in vivo. Stem Cells. 33 (6), 1818-1828 (2015).
- Kubli, D. A., Gustafsson, A. B. Mitochondria and mitophagy: the yin and yang of cell death control. Circulation Research. 111 (9), 1208-1221 (2012).
- Psaltis, P. J., et al. Noninvasive monitoring of oxidative stress in transplanted mesenchymal stromal cells. JACC Cardiovascular Imaging. 6 (7), 795-802 (2013).
- Peet, C., Ivetic, A., Bromage, D. I., Shah, A. M. Cardiac monocytes and macrophages after myocardial infarction. Cardiovasc Research. 16 (6), 1101-1112 (2020).
- Swirski, F. K., Nahrendorf, M. Cardioimmunology: the immune system in cardiac homeostasis and disease. Nature Reviews Immunology. 18 (12), 733-744 (2018).
- Zhang, Z., et al. Mesenchymal Stem Cells Promote the Resolution of Cardiac Inflammation After Ischemia Reperfusion Via Enhancing Efferocytosis of Neutrophils. Journal of the American Heart Association. 9 (5), 014397 (2020).
- Saxena, A., Russo, I., Frangogiannis, N. G. Inflammation as a therapeutic target in myocardial infarction: learning from past failures to meet future challenges. Translational Research. 167 (1), 152-166 (2016).
- Prabhu, S. D., Frangogiannis, N. G. The Biological Basis for Cardiac Repair After Myocardial Infarction: From Inflammation to Fibrosis. Circulation Research. 119 (1), 91-112 (2016).
- Dominici, M., et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy. 8 (4), 315-317 (2006).
