È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 02:28Fly Cup Preparation and Embryo Collection
- 04:00Embryo Homogenization and Clarification
- 04:48Microtubule Polymerization, Kinesin Binding and Differential Sedimentation of Microtubules and Kinesin
- 06:49Representative Kinesin Purification Results
- 08:29Conclusion
Bu aktif tam uzunlukta kinesin izole bir protokoldür<em> Drosophila</em> Tek-molekül biyofiziksel çalışmaları için embriyo. Biz, embriyolar toplamak embriyo lizat olun ve mikrotübüllerin (MTS) polimerize nasıl gösterir. Kinesin, MTs üzerinde hareketsizleştirici kinesin-MT kompleksleri aşağı doğru dönen, ve daha sonra ATP ilave yoluyla MTS kinesin salgılatıcı ile arıtılır.
Tags
IsolationPurificationKinesinDrosophila EmbryosMotor ProteinsMicrotubulesSub-cellular LocationsNeurodegenerative DiseasesTherapeutic ApproachesATP HydrolysisPurification ProtocolGeneticaSingle-molecule Biophysical StudiesLaying CupsFemales Per CupOvernight CollectionsBleach DechorionatedHomogenizedLow Speed SpinHigh Speed CentrifugationClarified SupernatantGTP And TaxolPolymerize MTsImmobilized On Polymerized MTsATP AnalogAdenylyl ImidodiphosphateRoom TemperatureMicrotubule Pellet
