حصاد الحيوانات المنوية والتلقيح الاصطناعي من الفئران
Summary
هذا البروتوكول يوضح طرق لاستخراج الحيوانات المنوية من الخصيتين للذكور وإناث الفئران ثم تلقيح. هذا الإجراء مفيد عندما يكون في حاجة الى الوقت الدقيق في الدراسات التنموية ، وكذلك العمل المعدلة وراثيا.
Abstract
القوارض من جنس Peromyscus (الغزلان الفئران) هي الأكثر انتشارا في أميركا الشمالية الأصليين الثدييات. وتستخدم الأنواع Peromyscus في طائفة واسعة من البحوث بما في ذلك السموم ، وعلم الأوبئة ، والبيئة ، والسلوكيات ، والدراسات الجينية. هنا أنها توفر نموذجا مفيدا للمظاهرات التلقيح الاصطناعي.
أساليب مماثلة لتلك المعروضة هنا قد سبق استخدامها في العديد من الدراسات الماوس الغزلان ، ولكن تم نشر أي بروتوكول مفصلة. نحن هنا لشرح الطريقة الأساسية التلقيح الاصطناعي. هذا الأسلوب ينطوي على استخراج الخصيتين من القوارض ، ثم عزل الحيوانات المنوية من البربخ والأسهر. توضع الحيوانات المنوية الناضجة ، والآن في خليط الحليب ، في الجهاز التناسلي للإناث في وقت الإباضة. يحسب التسميد ك 0 يوم لتوقيت تطور الجنين. ويمكن بعد ذلك يمكن استرجاع الأجنة عند نقطة في الوقت المطلوب والتلاعب بها.
ويمكن استخدام التلقيح الاصطناعي في مجموعة متنوعة من أنواع القوارض حيث التوقيت الدقيق الجنين أمر بالغ الأهمية أو من الصعب الحصول عليها. هذه التقنية أمر حيوي بالنسبة للأنواع أو سلالات (بما في ذلك معظم Peromyscus) والتي قد لا لم فورا و / أو التزاوج حيث من الصعب تقييم. بالإضافة إلى ذلك ، يوفر التلقيح الاصطناعي التوقيت الدقيق لتطور الجنين إما التقدم التنموي في رسم الخرائط و / أو العمل المعدلة وراثيا. ويمكن أن يستخدم هذا الرقم انخفض من الحيوانات منذ مكفولة الإخصاب. وقد كان هذا الأسلوب حيوية لتعزيز نظام Peromyscus ، والمؤمل ان تعود بالنفع الآخرين كذلك.
Protocol
Acknowledgements
وأود أن أشكر مايك ديوي من مركز ألبوم الوراثية Peromyscus بصيرته عن القيمة ، والصبر ، والمعرفة على التكاثر القوارض.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri Dish | Tool | Fisher | 08-772-30 | |
| 18 gauge needle | Tool | Becton Dickinson | 305195 | |
| Powdered milk | Reagent | Any Grocery store | ||
| 1 ml syringe | Tool | National Scientific Company | S7510-1 | |
| Forceps | Tool | Roboz | RS-5060 | |
| Scissors | Tool | Roboz | RS-5882 | |
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Reagent | Gibco | 14200-075 | |
| 22 gauge blunt needle | Tool | Give to me |
