Farelerin Hasat Sperm ve Suni Tohumlama

Summary

Bu protokol, erkeklerin testislerde sperm açılan ve daha sonra dişi farelerin döllemeden yöntemleri göstermektedir. Bu prosedür de transgenik çalışma olarak gelişim çalışmalarında hassas zaman gerekli olduğunda yararlıdır.

Abstract

Cinsi Peromyscus (geyik fareler) Kemirgenler en yaygın yerli Kuzey Amerika memeliler. Peromyscus türlerin toksikoloji, epidemiyoloji, ekoloji, davranış ve genetik çalışmalar da dahil olmak üzere geniş bir yelpazede araştırma kullanılır. Burada suni tohumlama gösteriler için yararlı bir model sağlar.

Burada görüntülenir benzer yöntemler daha önce birkaç geyik Fareler üzerinde yapılan çalışmalarda, henüz herhangi bir ayrıntılı protokol yayımlanmıştır. Burada temel suni tohumlama yöntemi göstermektedir. Bu yöntem, sperm, epididim ve vas deferens izole kemirgen, sonra testis açılan gerektirir. Süt karışımı olgun sperm, yumurtlama zamanında, kadın üreme sisteminde yerleştirilir. Döllenme, embriyo gelişimi zamanlaması için her gün 0 olarak sayılır. Embriyolar sonra istenilen zaman noktasında alınan ve manipüle edilebilir.

Suni tohumlama, embriyo tam olarak elde etmek için zamanlama çok önemli ya da zor çeşitli kemirgen türleri kullanılabilir. Bu teknik, hemen ve / veya çiftleşme değerlendirmek zordur arkadaşı olmayabilir türler veya suşları (çoğu Peromyscus dahil) için hayati önem taşımaktadır. Yanı sıra, gelişim, ilerleme ve / veya transgenik çalışma eşleme ya da suni tohumlama, embriyo gelişimi için kesin zamanlama sağlar. Döllenme garanti beri hayvanların azaltılmış numaraları kullanılabilir. Bu yöntem Peromyscus sistemi sürdürmek için hayati olmuştur ve umarım aynı zamanda başkalarının yararına olacaktır.

Protocol

Suni dölleme Suni döllenme şansını artırmak için tüm kadın hamile olduğunu doğal çiftleşmelerin yerine kullanılır. 2 erkek her 1 süperovulasyon kadın veya östrus içinde olduğu bilinen bir kadın için kullanılmıştır. Olgun erkek fareler caudae epididymides% 9 süt süspansiyon yerleştirilir ve 18 gauge iğne ile açık dilimlenmiş. Sperm birkaç dakika için serbestçe yüzmeye izin verildi ve ardından karışımı epididymides alınmıştır. Süspansiyon izdiham ve…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Petri Dish	Tool	Fisher	08-772-30
18 gauge needle	Tool	Becton Dickinson	305195
Powdered milk	Reagent	Any Grocery store
1 ml syringe	Tool	National Scientific Company	S7510-1
Forceps	Tool	Roboz	RS-5060
Scissors	Tool	Roboz	RS-5882
Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline	Reagent	Gibco	14200-075
22 gauge blunt needle	Tool	Give to me