수확 정자와 마우스의 인공 수정
Summary
이 프로토콜은 남성의 testes에서 정자를 추출 후 여성 쥐를 inseminating하는 방법을 보여줍니다. 정확한 시간 발달 연구에서뿐만 아니라 유전자 변형 작업 필요한 경우이 절차는 유용합니다.
Abstract
속의 Peromyscus (사슴 마우스)의 설치류는 가장 널리 북미 포유류입니다. Peromyscus 종은 독성학, 역학, 생태, 행동, 그리고 유전자 연구를 포함한 연구의 다양한 사용됩니다. 여기 그들은 인공 수정의 데모에 대한 유용한 모델을 제공합니다.
여기에 표시된 것과 유사한 방법은 이전에 여러 사슴 마우스 연구에 사용되고 있고, 아직 자세한 프로토콜은 공개되지 않았습니다. 우리가 인공 수정의 기본 방법을 보여줍니다. 이 방법은 epididymis와 중이야의 deferens에서 정자를 분리 후, 설치류에서 testes를 추출 알아볼 수 있습니다. 이제 우유 혼합물의 성숙한 정자는, 배란의 시간에 여성의 생식 요로에 배치됩니다. 수정은 배아 개발의 타이밍에 대한 당일 0으로 계산됩니다. 배아는 다음 원하는 시간 지점에서 검색과 조작하실 수 있습니다.
인공 수정은 정확한 배아시기 얻기 위해 중요하거나 어려운 쥐 종 다양한에서 사용할 수 있습니다. 이 기술은 즉시 및 / 또는 어디에 짝짓기가 평가하는 어려운 친구되지 않을 수도 있습니다 종 또는 변종 (대부분의 Peromyscus 포함)에 대한 매우 중요합니다. 또한, 인공 수정은 개발 진행 및 / 또는 유전자 변형 작업을 매핑에 중 배아 개발을위한 정확한 타이밍을 제공합니다. 수정이 보장되어 있기 때문에 동물의 감소 번호를 사용할 수 있습니다. 이 방법은 Peromyscus 시스템을 발전에 필수적인되었으며, 희망뿐만 아니라 다른 사람을 도움이 될 것입니다.
Protocol
Acknowledgements
나는 쥐 복제에 Peromyscus 유전자 증권 그의 귀중한 통찰력 센터, 인내, 그리고 지식의 마이크 듀이 감사하고 싶습니다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri Dish | Tool | Fisher | 08-772-30 | |
| 18 gauge needle | Tool | Becton Dickinson | 305195 | |
| Powdered milk | Reagent | Any Grocery store | ||
| 1 ml syringe | Tool | National Scientific Company | S7510-1 | |
| Forceps | Tool | Roboz | RS-5060 | |
| Scissors | Tool | Roboz | RS-5882 | |
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Reagent | Gibco | 14200-075 | |
| 22 gauge blunt needle | Tool | Give to me |
