収穫精子とマウスの人工授精
Summary
このプロトコルは、男性の精巣から精子を抽出し、雌マウスをinseminatingための方法を示しています。正確な時間が発生試験と同様にトランスジェニック作業に必要な場合にこの手順が便利です。
Abstract
属のPeromyscus（鹿のマウス）のげっ歯類では最も普及しているネイティブの北米の哺乳動物です。 Peromyscus種は毒性学、疫学、生態学、行動、および遺伝学的研究を含む研究の幅広い分野で使用されています。ここで彼らは、人工授精のデモンストレーションのための有用なモデルを提供しています。
ここに表示されるものと同様の方法では、以前にいくつかの鹿のマウスの研究で用いられてきた、まだ詳細なプロトコルが公開されていない。ここでは、人工授精の基本的な方法を示しています。このメソッドは、精巣上体および精管から精子を分離し、齧歯類から精巣を抽出伴います。今ミルクの混合物で成熟した精子は、、排卵の時に女性の生殖器に配置されます。受精は胚発生のタイミングを0日としてカウントされます。胚は、所望の時間の時点で取得して操作することができます。
人工授精は、正確な胚のタイミングを得るために重要なまたは困難なげっ歯類の用途に使用できます。このテクニックはすぐに交尾および/または交配が評価しにくい場合があります種または菌株（最もPeromyscusを含む）に不可欠です。さらに、人工授精は、発達の進行および/またはトランスジェニック作業のマッピングのいずれかで胚発生の正確なタイミングを提供します。受精が保証されているので、動物の減少数は、使用することができます。このメソッドは、Peromyscusシステムを促進するために不可欠であったが、うまくいけば同様に他の人の利益になる。
Protocol
Acknowledgements
私はげっ歯類の生殖に関するPeromyscus遺伝株式の彼の貴重な洞察のためのセンター、忍耐、そして知識からマイクデューイに感謝いたします。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri Dish | Tool | Fisher | 08-772-30 | |
| 18 gauge needle | Tool | Becton Dickinson | 305195 | |
| Powdered milk | Reagent | Any Grocery store | ||
| 1 ml syringe | Tool | National Scientific Company | S7510-1 | |
| Forceps | Tool | Roboz | RS-5060 | |
| Scissors | Tool | Roboz | RS-5882 | |
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Reagent | Gibco | 14200-075 | |
| 22 gauge blunt needle | Tool | Give to me |
