Сбор спермы и искусственного осеменения Мыши
Summary
Этот протокол демонстрирует методы для извлечения сперматозоидов из яичек самцов, а затем inseminating самок мышей. Эта процедура полезна, когда точное время необходимо в развитии исследований, а также трансгенные работы.
Abstract
Грызуны Реготузсиз рода (олени мышей) являются наиболее распространенными коренных народов Северной Америки млекопитающих. Реготузсиз видов используются в широком диапазоне исследований, включая токсикологии, эпидемиологии, экологии, поведенческие и генетические исследования. Здесь они предоставляют полезную модель для демонстрации искусственного оплодотворения.
Методы, аналогичные отображаются здесь ранее использовались в нескольких исследованиях, мышь оленя, но не подробный протокол был опубликован. Здесь мы показываем, основным методом искусственного оплодотворения. Этот метод влечет за собой извлечение из яички грызунов, то выделение спермы из придатка яичка и семявыносящих протоков. Зрелые сперматозоиды, теперь в молочную смесь, помещаются в половые пути самки в момент овуляции. Оплодотворение считается как день 0 для синхронизации развития эмбриона. Эмбрионы могут быть получены в заданное время точкой и манипулировать.
Искусственное оплодотворение может быть использован в различных видов грызунов, где точные сроки эмбрион имеет решающее значение или трудно получить. Эта техника имеет жизненно важное значение для видов или штаммов (в том числе большинство Реготузсиз), которые не могут спариваться сразу и / или там, где спаривание трудно оценить. Кроме того, искусственное осеменение обеспечивает точное время для развития эмбриона или в отображении развития прогресса и / или трансгенных работы. Сокращение числа животных может быть использован с оплодотворением гарантируется. Этот метод имеет жизненно важное значение для дальнейшего Реготузсиз системы, и мы надеемся принести пользу другим, а также.
Protocol
Acknowledgements
Я хотел бы поблагодарить Майка Дьюи из Реготузсиз Генетический центр Биржевые котировки за ценную информацию, терпения и знаний о грызунах воспроизводства.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri Dish | Tool | Fisher | 08-772-30 | |
| 18 gauge needle | Tool | Becton Dickinson | 305195 | |
| Powdered milk | Reagent | Any Grocery store | ||
| 1 ml syringe | Tool | National Scientific Company | S7510-1 | |
| Forceps | Tool | Roboz | RS-5060 | |
| Scissors | Tool | Roboz | RS-5882 | |
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Reagent | Gibco | 14200-075 | |
| 22 gauge blunt needle | Tool | Give to me |
